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文檔簡介
1、以蚯蚓的生態(tài)適應為理論基點,研究了蚯蚓Eisenia fetida的兩種抗菌肽.通過硫酸銨沉淀和超濾等,將蚯蚓勻漿分成6個粗組分,即30﹪~60﹪硫酸銨沉淀大于10KDa(Ⅰ),10KDa~1KDa(Ⅱ)及小于1KDa(Ⅲ)三組,60﹪~90﹪硫酸銨沉淀大于10KDa(Ⅳ)、10KDa~1KDa(Ⅴ)及小于1KDa(Ⅵ)三組.通過抑菌圈法和微量稀釋法檢測抗菌活性.在初步篩選的基礎上又經(jīng)硫酸銨沉淀、超濾、陽離子交換分離和反相FPLC,得到
2、了兩種新的蚯吲抗菌肽F-1與F-2.分子量經(jīng)電噴霧離子源質(zhì)譜(ESI-MS)測定為535.27Da和519.27Da.串聯(lián)質(zhì)譜(MS/MS)數(shù)據(jù)表明F-1的肽序列為Ac-Ala-Met-Val-Ser-Ser,F-2的肽序列為Ac-Ala-Met-Val-Gly-Thr.最小抑菌濃度(MIC)實驗表明,F-1與F-2對鶉雞腸球菌Enterococcus gallinarum、綠膿桿菌Pseudomonas pyocyanea、鮑氏不動A
3、cinetobacter baumanii、土生克雷伯菌Klebsiella terrigena的MIC分別為11.4mg/L和12.85mg/L,對糞腸球菌Enterococcus faecalis的MIC分別為22.8mg/L和25.68mg/L.對真菌白色念株菌Candida albicans沒有表現(xiàn)為完全的抑制作用.利用MTT法和掃描電鏡,對F-1和F-2對體外培養(yǎng)的MGC803胃癌細胞的殺傷作用及其機理進行了研究.F-1與F-
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