綠僵菌桔霉素生物合成氧化還原酶基因MaCtnB的克隆與功能分析.pdf

1、綠僵菌(Metarhiziumanisopliae)作為一類重要昆蟲(chóng)病原真菌生防潛力巨大。在自然條件下，綠僵菌主要以孢子控制害蟲(chóng)。孢子成熟時(shí)間的長(zhǎng)，生產(chǎn)成本高，易受環(huán)境的影響，殺蟲(chóng)速度慢等都制約真菌農(nóng)藥的大規(guī)模生產(chǎn)及其應(yīng)用。在高溫、營(yíng)養(yǎng)缺陷等不利條件下，自身能進(jìn)行微循環(huán)產(chǎn)孢。微循環(huán)產(chǎn)孢是絲狀真菌遇到逆境條件的一種自我保護(hù)機(jī)制，具有產(chǎn)孢速度快，產(chǎn)孢量大，孢子大小更為均一等優(yōu)點(diǎn)，但目前該機(jī)制的相關(guān)基因研究報(bào)道尚少。
　　為了明確微循環(huán)

2、產(chǎn)孢的機(jī)制，我們課題組在前期構(gòu)建了綠僵菌微循環(huán)產(chǎn)孢時(shí)期的均一化全長(zhǎng)cDNA文庫(kù)和微循環(huán)產(chǎn)孢時(shí)期的差減文庫(kù)，發(fā)現(xiàn)桔霉素生物合成氧化還原酶CtnB基因在上述文庫(kù)中上調(diào)表達(dá)。根據(jù)綠僵菌全基因組序列克隆得到桔霉素生物合成氧化還原酶基因MaCtnB，并采用基因敲除策略對(duì)該基因功能進(jìn)行研究，主要研究結(jié)果如下：
　?、費(fèi)aCtnB影響綠僵菌在微循環(huán)產(chǎn)孢培養(yǎng)基上的的產(chǎn)孢方式和產(chǎn)孢量，以及影響了綠僵菌在正常培養(yǎng)基上的萌發(fā)；
　　②桔霉素影響了