益生性尿腸球菌HDRsEf1對雛雞盲腸菌群發(fā)育的影響.pdf

1、本論文將實驗室分離得到的具有良好益生特性的屎腸球菌HDRsEf1添加在玉米-豆粕基礎(chǔ)日糧中，利用變性梯度凝膠電泳(Denaturing gradient gelel ectrophoresis，DGGE)指紋圖譜技術(shù)來研究它對肉雞盲腸菌群發(fā)育的影響，利用Real-timePCR技術(shù)分析了盲腸中特定菌群數(shù)量的變化;同時本論文還對正常肉雛雞在7到14日齡發(fā)育過程中盲腸菌群的具體變化進行了研究，并以禽致病性大腸桿菌O78為例，通過對組織載菌量

2、的檢測和組織病變的觀察，對益生性屎腸球菌HDRsEf1對雛雞抗禽致病性大腸桿菌的效果進行了初步研究。具體研究結(jié)果如下:
　　1益生性屎腸球菌HDRsEf1對雛雞盲腸菌群發(fā)育的影響
　　試驗選用1日齡健康白羽肉雛雞共180只隨機分成對照組（玉米-豆粕基礎(chǔ)日糧）、益生組（添加300g屎腸球菌菌粉/1000kg）和抗生素組(添加50mg金霉素/kg)。每組3個重復(fù)，每個重復(fù)20只。分別在7、14、21、28、35、42日齡無菌快速

3、采集盲腸內(nèi)容物，用RT-PCR檢測盲腸中乳酸桿菌和大腸桿菌的數(shù)量，用DGGE技術(shù)檢測盲腸腸道菌群的變化情況。結(jié)果顯示，益生菌的添加可以顯著降低雛雞21日齡盲腸大腸桿菌的數(shù)量（P＜0.05），顯著增加42日齡盲腸乳酸桿菌的數(shù)量(P＜0.05)。DGGE結(jié)果顯示雛雞盲腸菌群從7日齡到14日齡為一個過渡期，從14日齡到42日齡為一個相對穩(wěn)定期。益生菌和抗生素的添加未影響腸道菌群的正常發(fā)育，但益生菌的添加可以促進腸道菌群在過渡期更有效的完成過渡

4、，在穩(wěn)定期維持更穩(wěn)定的狀態(tài)。
　　2早期肉雛雞盲腸菌群變化規(guī)律的研究
　　試驗選用1日齡健康白羽肉雛雞共60只隨機分成3個重復(fù)組，每個重復(fù)20只。使用玉米-豆粕基礎(chǔ)日糧進行飼喂，試驗周期為14天，分別在7、9、10、11、13、14日齡時頸靜脈放血處死6只試驗雞采集盲腸內(nèi)容物，用DGGE技術(shù)檢測盲腸腸道菌群的變化情況。UPGMA聚類分析的結(jié)果顯示肉雞盲腸菌群以10日齡為一個臨界點，在7到9日齡時為一個不停變化的過程，而在10

5、日齡后開始趨于穩(wěn)定。DGGE指紋圖譜分析顯示有5個條帶在此過程中未出現(xiàn)變化，16SrRNA序列分析表明與這些條帶相對應(yīng)的細菌種類分別是Ruminococcuslactari,Azomonasagilis,Propionibacteriumacnes,Streptococcusoralis和Microbacteriumtestaceum。10日齡以后出現(xiàn)了一些特異性條帶，與之對應(yīng)的細菌種類主要是Eubacteriumlimosum,Lac

6、tobacilluscrispatus,Corynebacteriumjeikeium和Brachybacteriumsacelli。
　　3屎腸球菌HDRsEf1對雛雞抗大腸桿菌效果的研究
　　試驗選用1日齡健康白羽肉雛雞共60只隨機分成3個試驗組（對照組、益生組和抗生素組），每個試驗組20只，在雛雞10日齡口服接種107CFU/mL的大腸桿菌O781mL，在攻毒后72h進行載菌量的檢測和組織病變程度的觀察。載菌量檢測結(jié)果