2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、豬流行性腹瀉(PED)由豬流行性腹瀉病毒(PEDV)引起,臨床上以豬的嘔吐、腹瀉和脫水為主要特征的急性接觸性腸道傳染病,對哺乳仔豬的致死率可達(dá)100%,給當(dāng)前我國養(yǎng)豬業(yè)造成了巨大的經(jīng)濟(jì)損失。2010年以來,該病的發(fā)病率明顯升高,在免疫豬場也有發(fā)病報道,發(fā)病仔豬以腹瀉、嘔吐和脫水為主要特征,死亡率達(dá)80%以上,嚴(yán)重影響我國養(yǎng)豬業(yè)的健康發(fā)展。為了解我國新發(fā)疾病的病原及其主要基因的特征,作者對我國華中、華南和西南等地區(qū)12個省市的13個流行毒

2、株的主要基因即S基因、M基因和ORF3基因進(jìn)行了測序和序列分析。其中,S蛋白介導(dǎo)病毒與細(xì)胞的吸附和融合,并能誘導(dǎo)宿主產(chǎn)生中和抗體;M蛋白是病毒含量最高的蛋白,是跨膜蛋白,在病毒裝配及出芽過程中發(fā)揮重要的作用,該蛋白也是PEDV刺激機(jī)體產(chǎn)生抗體保護(hù)的重要結(jié)構(gòu)蛋白之一;ORF3基因所編碼的蛋白為一種跨膜蛋白,該蛋白具有離子通道活性,并與病毒毒力相關(guān)。
   參考GenBank中登錄的CV777全基因組序列(AF353511.1),本

3、研究設(shè)計擴(kuò)增PEDV S基因、ORF3基因和M基因的引物。通過優(yōu)化反應(yīng)條件,分別建立了S基因、ORF3基因和M基因全長擴(kuò)增的RT-PCR方法,用其擴(kuò)增PEDV的目的基因,并進(jìn)行連接、轉(zhuǎn)化、克隆和測序,成功克隆并測定了13個毒株的S基因、ORF3基因和M基因的序列。測序結(jié)果表明,13個毒株之間的S基因核酸序列同源性為93.2%-99.9%,ORF3基因的核酸序列同源性為89.9%-100%,M基因的核酸序列同源性為97.7%-100%,與

4、毒株CV777相比,S基因、ORF3基因和M基因的核酸序列同源性分別為:93.8%-96.8%、90.8%-97.2%和98.1%-99.1%,氨基酸序列同源性分別為:92.3%-95.8%、86.8%-100%和98.2%-99.6%。其中毒株CH3和CH4與韓國疫苗毒株atenuated DR13 ORF3相比較,氨基酸序列同源性分別為100%和99.6%,均有138個氨基酸的缺失,說明這兩個毒株可能來源于疫苗毒株DR13。毒株CH

5、1,CH8,CH17和CH18,與經(jīng)典毒株CV777相比,S基因具有共同的序列特征,其中包括53個點突變、2處共5個氨基酸插入(包括第59-62位氨基酸中4個氨基酸的插入和第141位氨基酸的插入)和第164-165位2個氨基酸的缺失。由于它們具有共同的氨基酸變異,與國內(nèi)2010年以前的毒株測序的同源性較低,在免疫豬場和非免疫豬場中均致病,并且具有高死亡率,我們將其定義為變異毒株。除了4個變異毒株外,同時發(fā)現(xiàn)9個經(jīng)典毒株,結(jié)果表明,臨床上

6、變異毒株和經(jīng)典毒株共存,提示豬流行性腹瀉在中國流行情況非常復(fù)雜。另外,2010年以后所測定的毒株序列,在ORF3和M基因分別有7處和3處點突變,至于點突變所引起毒株生物學(xué)特性的變化有待于進(jìn)一步研究。
   通過分析發(fā)現(xiàn)變異毒株的S基因具有相似的變異特征,S基因存在插入、缺失和突變,可能導(dǎo)致現(xiàn)有基于CV777的疫苗不能提供良好的抗體保護(hù),同時,我們發(fā)現(xiàn)與韓國疫苗毒株DR13類似的毒株在臨床上存在,進(jìn)一步增加了臨床控制PED的難度;

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