“紫黃散”抗病毒作用及對(duì)雞免疫功能影響的研究.pdf

1、為了研究中藥復(fù)方“紫黃散”抗病毒能力以及對(duì)雞免疫功能的影響，本課題通過檢測(cè)“紫黃散”對(duì)新城疫病毒(NDV)感染雞胚成纖維細(xì)胞(CEF)能力的影響以及其對(duì)免疫疫苗后雞機(jī)體內(nèi)抗體效價(jià)的影響，觀察“紫黃散”的抗病毒能力;通過免疫器官指數(shù)的變化、免疫球蛋白含量的測(cè)定、免疫器官及粘膜免疫組織淋巴細(xì)胞數(shù)量的變化，討論“紫黃散”對(duì)雞機(jī)體免疫功能的影響。
　　本研究中，我們以5000μg/mL為中藥復(fù)方“紫黃散”起始作用濃度，利用2％細(xì)胞維持液(

2、DMEM)將其倍比稀釋至9.8μg/mL，共計(jì)10個(gè)濃度，分別加入到9日齡雞胚中，對(duì)照組只加2％DMEM。72h后，利用MTT法測(cè)細(xì)胞活性以確定細(xì)胞安全濃度。隨后，利用“先藥后毒”、“先毒后藥”、“毒藥同時(shí)”三種不同的方式，將“紫黃散”和NDV加入到已形成致密單層的CEF中，MTT法觀察不同的加藥方式對(duì)NDV感染CEF能力的影響，并檢測(cè)最適的加藥濃度。
　　另外，我們選取健康1日齡海褐蘭雛雞120只，飼喂至8日齡時(shí)隨機(jī)分為四組。其

3、中按照A高劑量組（0.2g/只）、B中劑量組（0.1g/只）、C低劑量組(0.05g/只)將“紫黃散”添加入日糧中，D組設(shè)為對(duì)照組。每10天從各組隨機(jī)選取5只雞剖殺，進(jìn)行NDV和傳染性法氏囊病毒(IBDV)抗體效價(jià)、免疫器官指數(shù)、免疫球蛋白含量的檢測(cè)，利用H.E.染色及免疫組化法觀察免疫器官以及粘膜免疫組織淋巴細(xì)胞數(shù)量的變化。
　　試驗(yàn)結(jié)果表明:
　　1.“紫黃散”的最大藥物安全濃度為625μg/mL。感染NDV的CEF中加

4、入“紫黃散”對(duì)細(xì)胞均具有不同程度的保護(hù)作用，其中先加入“紫黃散”后加入NDV時(shí)，細(xì)胞保護(hù)率最高，以625μg/mL尤為顯著。
　　2.三種劑量的“紫黃散”對(duì)免疫NDV和IBDV疫苗后雞機(jī)體內(nèi)抗體效價(jià)均有顯著的提高作用。
　　3.三種劑量的“紫黃散”均對(duì)免疫器官指數(shù)以及雞機(jī)體內(nèi)免疫球蛋白含量有一定促進(jìn)作用，中劑量組效果最好。
　　4.三種劑量的“紫黃散”均能促進(jìn)雞機(jī)體主要免疫器官以及粘膜免疫組織內(nèi)淋巴細(xì)胞增殖。其中高劑量