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文檔簡介
1、為了研究中藥復方“紫黃散”抗病毒能力以及對雞免疫功能的影響,本課題通過檢測“紫黃散”對新城疫病毒(NDV)感染雞胚成纖維細胞(CEF)能力的影響以及其對免疫疫苗后雞機體內(nèi)抗體效價的影響,觀察“紫黃散”的抗病毒能力;通過免疫器官指數(shù)的變化、免疫球蛋白含量的測定、免疫器官及粘膜免疫組織淋巴細胞數(shù)量的變化,討論“紫黃散”對雞機體免疫功能的影響。
本研究中,我們以5000μg/mL為中藥復方“紫黃散”起始作用濃度,利用2%細胞維持液(
2、DMEM)將其倍比稀釋至9.8μg/mL,共計10個濃度,分別加入到9日齡雞胚中,對照組只加2%DMEM。72h后,利用MTT法測細胞活性以確定細胞安全濃度。隨后,利用“先藥后毒”、“先毒后藥”、“毒藥同時”三種不同的方式,將“紫黃散”和NDV加入到已形成致密單層的CEF中,MTT法觀察不同的加藥方式對NDV感染CEF能力的影響,并檢測最適的加藥濃度。
另外,我們選取健康1日齡海褐蘭雛雞120只,飼喂至8日齡時隨機分為四組。其
3、中按照A高劑量組(0.2g/只)、B中劑量組(0.1g/只)、C低劑量組(0.05g/只)將“紫黃散”添加入日糧中,D組設為對照組。每10天從各組隨機選取5只雞剖殺,進行NDV和傳染性法氏囊病毒(IBDV)抗體效價、免疫器官指數(shù)、免疫球蛋白含量的檢測,利用H.E.染色及免疫組化法觀察免疫器官以及粘膜免疫組織淋巴細胞數(shù)量的變化。
試驗結(jié)果表明:
1.“紫黃散”的最大藥物安全濃度為625μg/mL。感染NDV的CEF中加
4、入“紫黃散”對細胞均具有不同程度的保護作用,其中先加入“紫黃散”后加入NDV時,細胞保護率最高,以625μg/mL尤為顯著。
2.三種劑量的“紫黃散”對免疫NDV和IBDV疫苗后雞機體內(nèi)抗體效價均有顯著的提高作用。
3.三種劑量的“紫黃散”均對免疫器官指數(shù)以及雞機體內(nèi)免疫球蛋白含量有一定促進作用,中劑量組效果最好。
4.三種劑量的“紫黃散”均能促進雞機體主要免疫器官以及粘膜免疫組織內(nèi)淋巴細胞增殖。其中高劑量
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