2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、轉(zhuǎn)基因修飾豬可以用于改良物種,促進畜牧業(yè)發(fā)展,也可以作為器官移植中的低免疫原性供體,因此在醫(yī)藥學(xué)及畜牧業(yè)等領(lǐng)域擁有巨大的應(yīng)用潛力。傳統(tǒng)的基因打靶效率非常低。新興技術(shù)鋅指核酸酶(Zinc-finger nuclease,ZFN)能夠有效的介導(dǎo)基因的定點修飾,效率高達1%,這有望從根本上解決體細胞基因組定點修飾效率低的問題。
  本研究主要是通過鋅指核酸酶技術(shù)高效建立了肌肉抑制素基因(Myostatin)和α-1,3-半乳糖苷轉(zhuǎn)移酶(

2、α-1,3-galactosyl-transferase,GGTA1)基因雙等位基因敲除細胞系,比傳統(tǒng)的基因打靶效率提高了10000倍。同時,結(jié)合體細胞核移植技術(shù)產(chǎn)生了Myostatin和GGTA1雙等位基因敲除的轉(zhuǎn)基因克隆豬,為建立瘦肉型豬的新品系,以及為豬-人的異種器官移植打下理論基礎(chǔ)。實驗結(jié)果如下:
  1.產(chǎn)生Myostatin基因敲除的克隆豬。將特異性識別Myostatin的鋅指核酸酶轉(zhuǎn)入大白豬的成纖維細胞LW5中,藥殺

3、篩選后,得到10個單敲細胞系,2個雙敲細胞系,在細胞水平的打靶效率分別為11.6%,2.3%.以兩個雙等位基因敲除的細胞系M11,M100為核供體進行核移植,產(chǎn)生8頭轉(zhuǎn)基因克隆豬。
  2.產(chǎn)生GGTA1基因敲除的克隆豬。將特異性識別GGTA1的鋅指核酸酶轉(zhuǎn)入大白豬的成纖維細胞系LW5中,加藥篩選后,產(chǎn)生了18個單敲細胞系,4個雙敲的細胞系,細胞水平的打靶效率分別為23.4%,5.2%.以雙等位基因敲除的細胞系G3,G56,G65

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