灰莉的殺螨活性研究.pdf

1、本文以采自廣西桂林的灰莉（Fagraea ceilanica Thunb.）作為研究對象，用有機(jī)溶劑冷浸提取法提取植物成分，采用浸葉法和噴霧法測定灰莉植株不同部位提取物對柑橘紅蜘蛛的觸殺毒力，確定其殺螨活性部位。進(jìn)一步對活性部位提取物采用液-液萃取、硅膠柱層析等分離純化技術(shù)，將殺螨活性物質(zhì)分離純化，并用波譜分析技術(shù)鑒定殺螨活性成分的結(jié)構(gòu)。研究了殺螨活性物質(zhì)對柑橘紅蜘蛛的生物活性，以及對柑橘紅蜘蛛雌成螨體內(nèi)蛋白質(zhì)含量、2種解毒酶和3種保護(hù)

2、酶活性的影響，初步探究了活性物質(zhì)的殺螨作用機(jī)理。
　　采用浸葉法和噴霧法分別測定了灰莉枝條、葉片甲醇提取物對柑橘紅蜘蛛雌成螨的觸殺毒力。結(jié)果表明，浸葉法測定的致死中濃度(LC50)分別為3.4298g/L和4.9236g/L，噴霧法測定的LC50分別為3.9682g/L和5.5334g/L，2種測定方法結(jié)果顯示2種甲醇粗提物具有較好的殺螨活性。用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇和水分別將這2個(gè)粗提物進(jìn)行萃取，并測定了8個(gè)萃取層的殺螨活性，

3、結(jié)果顯示灰莉枝條石油醚層、灰莉葉水層的殺螨活性較好，濃度為2.5g/L時(shí)，浸葉法測定這2個(gè)活性萃取層對柑橘紅蜘蛛雌成螨48h校正死亡率分別為92.11％和94.33％，噴霧法測定的校正死亡率分別為85.11％和90.8％。噴霧法測定2個(gè)活性萃取層對柑橘紅蜘蛛雌成螨的LC50分別為1.7372g/L和3.2970g/L。2個(gè)活性萃取層對柑橘紅蜘蛛雌成螨還有驅(qū)避活性和產(chǎn)卵忌避活性，最高驅(qū)避率為80.95％，最高產(chǎn)卵忌避率為95.45％。

4、r>　　將2個(gè)活性萃取層分別用硅膠柱層析和薄層層析(TLC)進(jìn)行分離純化，結(jié)合活性跟蹤，從中分離獲得1個(gè)活性化合物。經(jīng)核磁共振(NMR)數(shù)據(jù)分析，初步鑒定為四環(huán)三萜類物質(zhì)。該活性化合物對柑橘紅蜘蛛雌成螨、若螨、幼螨和卵的觸殺LC50分別為1.5742g/L、1.9888g/L、1.4493g/L和2.4618g/L，濃度為2g/L時(shí)，對雌成螨的產(chǎn)卵忌避率為95.34％。
　　初步探究了灰莉殺螨活性物質(zhì)的作用機(jī)理。對柑橘紅蜘蛛雌成螨