黃參多糖對四氧嘧啶損傷胰島細胞的保護和修復作用.pdf

1、糖尿病是全球范圍內(nèi)嚴重危害人類健康的常見且多發(fā)內(nèi)分泌代謝紊亂性疾病,近年來,全球糖尿病患病率及死亡率都呈現(xiàn)逐步上升的趨勢?；瘜W藥糖尿病有一定的毒副作用且不能有效防止并發(fā)癥,從天然植物中尋找降血糖的有效成分已成為研究治療糖尿病藥物的一條重要的途徑,近年來研究發(fā)現(xiàn)植物多糖是一種具有降血糖作用的天然植物提取物,已被大量研究開發(fā),有望成為新型純天然植物類降糖藥物。迄今為止國內(nèi)外文獻、專利均未報道以黃參多糖為原料的降糖天然產(chǎn)物的應用,本研究首次研

2、究黃參多糖對糖尿病的防治作用,并從糖尿病發(fā)病的核心環(huán)節(jié)——胰島β細胞的數(shù)量不足、β細胞功能障礙方面初步探討黃參多糖的防治糖尿病的作用機理,旨在為進一步研究開發(fā)黃參多糖類降糖天然產(chǎn)物提供了實驗依據(jù)與理論基礎。
　　黃參多糖是由甘肅特色植物黃參中提取。本實驗通過四氧嘧啶損傷體外培養(yǎng)大鼠胰島素瘤細胞RINm5F建立糖尿病β細胞損傷模型,采用比色法檢測胰島細胞的NO、NOS、SOD、MDA指標的變化;MTT法檢測細胞存活率的變化;放射免疫

3、法檢測胰島素分泌量的變化;實時熒光定量反轉(zhuǎn)錄PCR分別檢測caspase-3、bax、bcl-2、pdx-1、insulin mRNA轉(zhuǎn)錄水平的變化;Western-Blot檢測Caspase-3、PDX-1蛋白水平的變化。
　　研究結(jié)果表明:
　　1黃參多糖對胰島β細胞自由基損傷的修復作用
　　黃參多糖對四氧嘧啶致RINm5F細胞自由基損傷有明顯的保護作用,這可能是黃參多糖通過抑制損傷性胰島β細胞NOS的活性,減少N

4、O的生成,顯著提高損傷性胰島β細胞SOD的活性,降低MDA含量,增強損傷性胰島β細胞清除自由基的能力,提高β細胞抗氧化能力。
　　2黃參多糖對損傷性胰島細胞凋亡的拮抗作用
　　黃參多糖能夠增強β細胞的細胞活性,提高β細胞存活率,并隨著黃參多糖濃度的增加而加強,隨著作用時間的增加而減弱。黃參多糖增強β細胞的細胞活性可能是通過激活凋亡抑制基因bcl-2mRNA的轉(zhuǎn)錄并抑制凋亡促進基因bax mRNA的轉(zhuǎn)錄,最終下調(diào)Caspase

5、-3基因的轉(zhuǎn)錄及蛋白的表達,從而抑制四氧嘧啶損傷胰島β細胞的凋亡。
　　3黃參多糖對損傷性胰島細胞分泌功能的影響
　　在2.8 mmol/L、16.7 mmol/L葡萄糖刺激下,黃參多糖劑量依賴性地促進了胰島素分泌,并且在高糖刺激時,胰島素分泌量較低糖刺激更為明顯。黃參多糖能夠刺激β細胞的分泌胰島素的作用可能是通過激活胰島素轉(zhuǎn)錄因子 pdx-1 mRNA的轉(zhuǎn)錄,從而上調(diào)insulin mRNA的轉(zhuǎn)錄,最終提高胰島β細胞的胰島

6、素分泌水平,修復四氧嘧啶損傷胰島β細胞分泌功能。
　　綜上所述,我們的實驗研究表明:
　　黃參多糖對四氧嘧啶損傷的胰島β細胞有一定的保護和修護作用,其機制可能通過提高細胞的總抗氧化能力,降低脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物的生成;激活bcl-2mRNA的轉(zhuǎn)錄并抑制bax mRNA的轉(zhuǎn)錄,最終下調(diào)Caspase-3基因的轉(zhuǎn)錄及蛋白的表達,抑制四氧嘧啶損傷胰島β細胞的凋亡;激活pdx-1、insulin mRNA的轉(zhuǎn)錄,提高胰島β細胞的胰島素分泌