蒙古沙冬青AmCAT和AmZF基因的克隆與功能分析.pdf

1、前人研究表明，過氧化氫酶(Catalase，CAT)和鋅指型轉(zhuǎn)錄因子(zinc finger transcription factor，ZF)在植物響應(yīng)和抵抗多種非生物逆境中起重要作用。本論文從強抗逆植物蒙古沙冬青(Ammopiptanthus mongolicus)中克隆到AmCAT和AmZF的cDNA，并對二者在高鹽、低溫和干旱脅迫下的表達進行了動態(tài)分析，然后將它們分別轉(zhuǎn)入擬南芥進行了功能鑒定，主要研究結(jié)果如下：
　　(1)用

2、RT-PCR方法擴增到AmCAT的編碼區(qū)cDNA，由1479bp組成，推測其編碼蛋白含493個氨基酸殘基，分子量為56.86 KDa，等電點為7.25，可能為親水性蛋白，定位在過氧化物酶體中。
　　(2) AmCAT的表達受高鹽、低溫和干旱脅迫的顯著誘導(dǎo)，尤其在干旱和鹽脅迫下其表達量持續(xù)上調(diào)。
　　(3)將AmCAT編碼區(qū)cDNA片段連接到植物表達載體pCAMBIA3301的35S啟動子之后，利用農(nóng)桿菌介導(dǎo)法轉(zhuǎn)化擬南芥。通過

3、對轉(zhuǎn)基因株系在干旱、高鹽和外源ABA等處理下進行表型鑒定，發(fā)現(xiàn)AmCAT在耐旱和耐鹽性中起正調(diào)節(jié)作用，而對外源ABA敏感性起負調(diào)節(jié)作用。
　　(4)用RT-PCR方法擴增到AmZF的編碼區(qū)cDNA，由441bp組成，預(yù)測其編碼蛋白含146個氨基酸殘基，分子量為16.31KDa，等電點為9.14，可能為親水性蛋白，主要定位在細胞質(zhì)中。
　　(5) AmZF的表達受干旱、低溫和高鹽脅迫的顯著誘導(dǎo)，尤其在干旱、低溫脅迫下其表達量持