催乳素、雌激素和胰島素對奶牛乳腺上皮細胞中瘦素及其受體的影響.pdf

1、乳腺的泌乳是乳腺發(fā)育和激素共同作用的結果，激素在泌乳過程中起著重要的作用。本實驗以荷斯坦奶牛為實驗材料，通過體外培養(yǎng)奶牛乳腺上皮細胞，添加催乳素、雌激素、胰島素并采用激光掃描共聚焦顯微技術、Western blotting、Real-Time PCR等來觀察乳腺上皮細胞中瘦素及其受體表達和泌乳功能的變化規(guī)律，旨在了解外源激素與瘦素的關系，尋求人工調控乳產量和乳質量的新方法、新技術和新途徑，為奶牛乳腺發(fā)育和泌乳功能調控提供理論基礎和試驗根

2、據。
　　 本研究表明，用組織塊培養(yǎng)法成功獲取了泌乳期奶牛乳腺上皮細胞。采用激光掃描共聚焦顯微技術對泌乳期奶牛乳腺上皮細胞中瘦素和瘦素受體的表達定位進行檢測，結果顯示：瘦素在奶牛乳腺上皮細胞中表達，瘦素受體在乳腺上皮細胞中被檢測到，但表達水平很低。三種激素處理細胞后，應用Western blotting對奶牛乳腺上皮細胞中瘦素和瘦素受體的蛋白表達量進行研究，結果顯示：催乳素、雌激素能顯著提高瘦素及其受體的表達(P<0.05)，且

3、催乳素高于雌激素，胰島素影響不顯著(P>0.05)。熒光定量RT-PCR結果表明，催乳素和雌激素能提高瘦素及其受體mRNA表達量(P<0.05)，胰島素沒有顯著影響(P>0.05)。采用高效液相色譜技術及甘油三酯試劑盒研究激素對奶牛乳腺上皮細胞泌乳的作用，結果表明：催乳素、雌激素和胰島素處理乳腺上皮細胞培養(yǎng)液中β-酪蛋白升高均較顯著(P<0.05)。催乳素和雌激素處理乳腺上皮細胞培養(yǎng)液中乳糖升高較顯著(P<0.05)，胰島素處理組中乳糖