平菇主栽品種DNA甲基化敏感擴增多態(tài)性(MSAP)分析.pdf

1、我國為世界食用菌第一生產(chǎn)大國，食用菌產(chǎn)業(yè)已成為我國僅次于糧、油、果、菜的第五大產(chǎn)業(yè)。平菇(Pleurotus ostreatus)是我國產(chǎn)量居第一位的人工栽培食用菌，味道鮮美，營養(yǎng)豐富，具有重要的食藥用價值。平菇的生長發(fā)育機制復雜，并易受環(huán)境因子影響，在育種、菌種保藏及栽培等方面有許多問題亟待解決。
　　 DNA甲基化參與生物體生長、分化、衰老、死亡以及抗脅迫能力等幾乎所有的代謝調(diào)節(jié)，對生物體正常的生長發(fā)育有重要的調(diào)控作用，是表

2、觀遺傳學的重點研究內(nèi)容。
　　 本研究以通過國家認定的平菇9個栽培品種為材料，采用甲基化敏感擴增多態(tài)性（Methylation Sensitive Amplification Polymorphism，MSAP）技術對供試材料基因組DNA進行甲基化分析，旨在探究自然狀態(tài)下平菇基因組DNA甲基化的水平和模式，以及溫度脅迫對DNA甲基化水平及模式的影響，并優(yōu)化和篩選MSAP技術應用于平菇DNA甲基化研究的最適條件與參數(shù)，為后續(xù)深入研

3、究DNA甲基化在食用菌生長與發(fā)育中，以及食用菌在環(huán)境脅迫響應過程中所起到的作用奠定基礎。試驗的主要結果如下:
　　 1.對文獻中介紹的MSAP技術的試驗條件與參數(shù)進行調(diào)節(jié)和優(yōu)化，篩選得到MSAP技術應用于平菇DNA甲基化研究的最適試驗條件與參數(shù)，可為后續(xù)食用菌DNA甲基化研究提供依據(jù);
　　 2.采用MSAP技術對自然狀態(tài)下9個品種基因組DNA甲基化水平及模式進行分析，發(fā)現(xiàn)9個材料基因組DNA甲基化水平為1.9％～17.

4、2％，平均甲基化比率(P)為8.9％，甲基化在平菇中發(fā)生普遍，品種之間差異明顯。同時，全甲基化即雙鏈甲基化為平菇基因組DNA甲基化的主要模式;
　　 3.以4℃和40℃為低溫及高溫脅迫條件處理供試材料24h，以25℃為對照條件，用MSAP技術分析溫度脅迫對基因組DNA甲基化水平及模式的影響，發(fā)現(xiàn)溫度脅迫能夠造成基因組DNA發(fā)生甲基化和去甲基化，但突變位點不多。這種甲基化水平及模式的變化是否參與平菇在響應溫度脅迫過程中的代謝調(diào)節(jié)還