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1、骨形態(tài)發(fā)生蛋白4(bonemorphogeneticproteins-4)屬于轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子超家族(TGF-β)的重要成員之一,是動(dòng)物機(jī)體生長(zhǎng)發(fā)育的必需生長(zhǎng)因子,其生物學(xué)作用幾乎涉及全身所有系統(tǒng),尤其是在動(dòng)物骨組織的形成、生長(zhǎng)方面具有重要的調(diào)控作用。鑒于BMP-4具有的這些重要功能,本試驗(yàn)以BMP-4基因作為影響家兔生產(chǎn)性狀的候選基因,通過(guò)檢測(cè)BMP-4基因的多態(tài)性及其啟動(dòng)子區(qū)域的甲基化水平,并與生產(chǎn)性狀進(jìn)行關(guān)聯(lián)分析,探討B(tài)MP-4啟動(dòng)子
2、甲基化水平與雜種優(yōu)勢(shì)的關(guān)系,對(duì)BMP-4是否可以作為家兔生產(chǎn)性狀的標(biāo)記基因提供一定的依據(jù)。
1.本研究擴(kuò)增了家兔BMP-4基因全長(zhǎng)CDS序列,通過(guò)與GenBank中人、小鼠、大鼠、牛、山羊、野豬序列的比對(duì),發(fā)現(xiàn)其同源性分別為94.5%、91.2%、91.2%、93.7%、93.9%、93.7%,說(shuō)明BMP-4雖然在進(jìn)化過(guò)程中序列高度保守,但也存在種屬特異性。
本研究對(duì)不同家兔群體BMP-4基因全長(zhǎng)CDS區(qū)域進(jìn)
3、行了多態(tài)性檢測(cè),于BMP4.2-1座位上發(fā)現(xiàn)G229C突變,該位點(diǎn)位于編碼區(qū)內(nèi),但并未造成氨基酸的改變(均為丙氨酸)。本研究中僅檢測(cè)到2種基因型(野生型和雜合型),且雜合型僅檢測(cè)到3個(gè)樣本,說(shuō)明該座位多態(tài)信息含量很低,群體整齊度很高。其他座位未檢測(cè)出多態(tài)位點(diǎn)。這可能是由于BMP-4基因在進(jìn)化過(guò)程中高度保守,長(zhǎng)期的選育工作對(duì)其影響不大。
2.本研究采用MSP方法檢測(cè)、統(tǒng)計(jì)并分析了新西蘭白兔、福建黃兔以及這兩個(gè)品種的正反交群體
4、4個(gè)群體共80個(gè)個(gè)體BMP-4基因啟動(dòng)子部分CpG甲基化情況及其與屠宰性狀的關(guān)系,發(fā)現(xiàn)該基因啟動(dòng)子有甲基化的發(fā)生,但甲基化水平的差異并未在表型上表現(xiàn)出來(lái),甲基化的差異不能與屠宰性狀的測(cè)定結(jié)果完全匹配,推測(cè)可能與特異位點(diǎn)的甲基化狀態(tài)有關(guān)。
在MSP研究的基礎(chǔ)上,采用BSP方法檢測(cè)、統(tǒng)計(jì)并分析了BMP-4基因啟動(dòng)子部分CpG島CpG位點(diǎn)的甲基化狀況,發(fā)現(xiàn)福建黃兔樣本在所擴(kuò)增CpG島上第5個(gè)CpG位點(diǎn)表現(xiàn)為甲基化,而其他3個(gè)群體
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