家蠶后部絲腺生物反應器生產人血清白蛋白和蜂王漿主蛋白1的研究.pdf

1、家蠶絲腺具有高效合成分泌蛋白的能力，并且絲腺內蛋白能夠隨著吐絲行為進入繭層，是一種理想的生物反應器。
　　人血清白蛋白(Human serum albumin，HSA)占血漿蛋白50％以上，是維持血液滲透壓的重要組成部分，而且還具有運輸功能，是重要的生物學制劑。本研究將piggyBac轉座酶或TALE-piggyBac融合轉座酶分別與人血清白蛋白表達質粒pBHSA共同注射到蠶卵內，經熒光篩選和目的基因PCR擴增鑒定證實，成功獲得了

2、77個穩(wěn)定遺傳和表達分泌人血清白蛋白轉基因家蠶家系。通過熒光定量PCR檢測，篩選到HSA mRNA表達量較高的轉基因家蠶家系A2。用磷酸鹽緩沖液(Phosphate buffer saline，PBS)提取繭層可溶性蛋白，經SDS-PAGE電泳和Western blot證實轉基因家蠶繭層中含有人血清白蛋白?；叶确治鲲@示，轉基因家蠶家系A2的繭層中人血清白蛋白占總可溶蛋白的29.1％，占繭層重的1.74％。
　　蜂王漿主蛋白1（Ma

3、jor royal jolly protein1，MRJP1）具有抗腫瘤和降血壓等多種生物學功能，還是決定蜜蜂級型分化的關鍵因子。本研究將TALE-piggyBac融合轉座酶與中華蜜蜂蜂王漿主蛋白1表達質粒pBMRJP1共同注射到蠶卵內，經熒光篩選和目的基因PCR擴增鑒定證實，成功獲得3個穩(wěn)定遺傳和表達分泌中蜂MRJP1轉基因家蠶家系。通過熒光定量PCR檢測，篩選到MRJP1 mRNA表達量較高的轉基因家蠶家系Q4。用PBS提取繭層蛋白