雌激素受體α基因多態(tài)性及啟動子區(qū)甲基化對兒童氟斑牙的影響.pdf

1、目的：
　　氟斑牙作為地方性氟中毒的特征性表現(xiàn)之一，對兒童危害深遠，研究發(fā)現(xiàn)并不是所有氟病區(qū)的兒童都罹患氟斑牙，可能存在遺傳易感性。本次研究通過分析ER基因多態(tài)性及啟動子區(qū)甲基化與兒童氟斑牙之間的關(guān)系，從遺傳學(xué)和表觀遺傳學(xué)方面探討氟斑牙發(fā)生機制，為從分子水平探討氟斑牙發(fā)生機制提供基本依據(jù)。
　　研究對象和方法：
　　1.研究對象的選擇:分別在河南省開封、通許兩地選擇高氟村和對照村作為調(diào)查點，高氟村平均水氟濃度為2.44

2、mg/L，對照村平均水氟濃度為0.37mg/L;隨機抽取所選調(diào)查點本地生長的8～12歲兒童作為調(diào)查對象，分別為高氟組和對照組，依據(jù)氟斑牙檢查結(jié)果將病區(qū)組又分為氟斑牙組和高氟區(qū)非患者組。其中氟斑牙組107人、高氟區(qū)非患者組100人及對照組78人，共285人。
　　2.氟斑牙的判定:由公共衛(wèi)生執(zhí)業(yè)醫(yī)師和口腔執(zhí)業(yè)醫(yī)師按照Dean's分級法判定。
　　3.血清鈣的測定采用火焰原子分光光度計法;尿氟檢測采用氟離子選擇電極法。
　

3、　4.雌激素受體α(ERα)基因rs3798577基因型分型采用Taqman探針法，Real-timePCR測定。
　　5.ER基因啟動子甲基化水平檢測采用Real-timePCR測定
　　6.本次實驗數(shù)據(jù)的錄入和分析均采用SPSS12.0統(tǒng)計軟件，甲基化率經(jīng)對數(shù)轉(zhuǎn)換之后符合正態(tài)分布，尿氟、血鈣經(jīng)對數(shù)轉(zhuǎn)換后的甲基化率的分析均應(yīng)用單因素方差分析和獨立樣本t檢驗;ERαrs3798577基因型和等位基因頻率在不同組別兒童中的分布

4、差異采用列聯(lián)表x2檢驗，OR值（比值比）和OR值的95％置信區(qū)間的計算采用Logistic回歸，所有檢驗都以α=0.05為檢驗水準(zhǔn)，Hardy-Weinberg平衡狀況應(yīng)用x2檢驗判定。
　　結(jié)果：
　　1.在外環(huán)境的檢測中，水氟濃度在兩組中分布差異有統(tǒng)計學(xué)意義。高氟組水氟濃度明顯高于對照組（t=-4.379，P＜0.05）。高氟組土壤中耕作層溶解氟和全氟明顯高于對照組，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（分別P＜0.05）。其他氟含量指標(biāo)

5、如空氣中氟含量（未檢出），糧食中及蔬菜中氟含量，兩組之間差異無統(tǒng)計學(xué)意義(分別P＞0.05)，水中鈣含量，兩組之間差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。
　　2.高氟組兒童尿氟水平明顯高于對照組（F=-52.117，P＜0.001），高氟組尿氟超標(biāo)兒童分布(71.0％)明顯高于對照組兒童(11.5％)（P＜0.05）;血鈣水平高氟組明顯低于對照組兒童(F=8.503，P＜0.001)。
　　3.ERαrs3798577基因型在不

6、同組別，不同性別和不同尿氟水平兒童間分布差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（分別P＞0.05）。攜帶相同基因型不同組別兒童間血清鈣水平，高氟組明顯低于對照組（分別P＞0.05）。
　　4.不同組別、不同性別，不同氟斑牙分度，不同尿氟水平兒童間ERα基因啟動子甲基化率差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（分別P＞0.05）;隨著氟斑牙嚴(yán)重程度的增高，兒童ERα基因啟動子甲基化率有逐漸增高的趨勢，在控制了尿氟變量之后，ERα基因啟動子甲基化率與血清鈣之間成負相關(guān)（r=

7、-0.162，P=0.034）。
　　結(jié)論：
　　1.研究未觀察到兒童氟斑牙與ERαrs3798577基因多態(tài)性有關(guān)。
　　2.氟病區(qū)兒童血清Ca水平的改變與氟暴露關(guān)系更為密切，而與ERα基因rs3798577多態(tài)性和該基因啟動子區(qū)甲基化聯(lián)系不密切。
　　3.ERα基因啟動子甲基化水平可能影響鈣的代謝，從而對兒童氟斑牙產(chǎn)生影響。
　　4.未發(fā)現(xiàn)ERα基因rs3798577多態(tài)性與該基因啟動子區(qū)甲基化交互作用