小麥與山羊草原生質體融合及外源物質對小麥的影響.pdf

1、小麥(Triticum aestivu)是一種重要的糧食作物。為了適應多種非生物和生物脅迫對小麥產(chǎn)量的影響,多種多樣的新品種應運而生。增加小麥的遺傳變異的方法之一是體細胞雜交。它可以從其他的種或屬引入新的特性。山羊草是小麥遠緣族植物,它有一些可能對小麥有益的性狀,特別是在抗病方面引起注意的農(nóng)藝學特性。由于屬間是雜交不相容的,獲得這些屬間雜種的唯一途徑是原生質體融合和細胞雜交。本試驗以小麥幼胚和山羊草的葉片為研究材料,選用了三種染料:用中

2、性紅,FDA和羅丹明B分別對其酶解出的原生質體進行染色,并分別觀察1×106、5×106、1×107、5×107個／mL四個密度下原生質體染色后的融合率,最終確定最佳的處理組合。應用正交試驗設計法研究了不同種類及濃度的滲透調節(jié)物質的PEG融合方法誘導屬間原生質體的融合,測定不同水平的融合率,以得到最佳融合條件組合。結果表明:
　　 FDA染色小麥的胚,羅丹明B染色山羊草的葉片,最適酶解時間為4h,最融合適密度為1×107個／mL

3、。最佳融合液為:PEG6000體積分數(shù)(w／v)為25％,0.50M的蔗糖,pH值為5.8。最佳洗液為5.5mM CaCl2。
　　 5-氮雜胞苷(5-azaC)是一種DNA甲基化抑制劑,已廣泛用于DNA去甲基化引起的植物表觀遺傳研究中,一些與甲基化水平低的相關穩(wěn)定遺傳的有益表觀性狀有其潛在的育種價值。CPPU是細胞分裂素類的一種非常重要的植物生長調節(jié)物質,具有促進細胞分裂、細胞擴大、延緩植物衰老等作用。目前CPPU已廣泛應用于

4、果樹、瓜類蔬菜生產(chǎn),但在小麥生產(chǎn)上應用的研究較少。為了探討5-azaC和CPPU對不同時期小麥的影響,通過種子處理和葉面噴施的方式,并利用高效液相色譜等多種分析手段,全面研究了不同處理對衰老指標、小麥產(chǎn)量的影響,并從DNA甲基化的角度,進一步對5-azaC和CPPU提高小麥產(chǎn)量的機理作出了研究,主要研究結果如下:
　　 小麥種子經(jīng)低濃度(5-500μM)5-azaC處理后,降低了DNA甲基化水平,均能誘導paksaylabgg、

5、Taichung29和Taichung29*6／CarstensV三種小麥開花。1000μM的5-azaC處理使小麥幼苗在20d后死亡。
　　 在開花期葉面噴施5-azaC后,能延緩衰老,使旗葉的DNA甲基化水平降低,提高了莖葉對籽粒的貢獻率,使小麥籽粒中的蛋白質含量和面筋含量略有增加。
　　 CPPU可延緩旗葉的衰老,使旗葉的DNA甲基化水平降低,增加了單莖穗重,促進了有機物質向庫的轉運,使小麥籽粒中的蛋白質含量和面筋