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文檔簡介
1、小鼠肝炎病毒(簡稱MHV)感染是一種嚴重危害小鼠生產(chǎn)的病毒性傳染病,可引起小鼠致死性肝炎、腦炎和腸炎,對小鼠的飼養(yǎng)和發(fā)展造成巨大威脅。鼠群感染MHV多數(shù)情況下呈亞臨床型感染,對實驗研究產(chǎn)生嚴重的干擾作用。因此,研制特異、快速、簡便的診斷試劑盒對鼠群進行MHV的監(jiān)測,將是預(yù)防和控制MHV感染的有效措施。
本試驗利用抗MHV(毒株MHV-JHM及MHV-A59)抗體探針建立檢測MHV的膠體金免疫層析方法。利用檸檬酸三鈉還原法分
2、別制備粒徑約為20 nm和15nm的膠體金；設(shè)計方陣實驗測得并測得穩(wěn)定0.5ml膠體金最低抗體量為5.05μg；選用M135作為本實驗的層析材料;并選用3％BSA作為封閉液；實驗確定檢測線抗體蛋白最適包被量為640μg/ml左右,質(zhì)控線抗體蛋白包被濃度為800μg/ml左右。我們用均一性好的20 nm的膠體金標記抗MHV(毒株MHV-JHM及MHV-A59)混合抗體,同時用此抗體和羊抗鼠IgG二抗包被M135硝酸纖維素膜分別作為檢測線和
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