小鼠肝炎病毒(MHV)金標(biāo)快速檢測(cè)方法的建立.pdf_第1頁(yè)
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文檔簡(jiǎn)介

1、小鼠肝炎病毒(簡(jiǎn)稱MHV)感染是一種嚴(yán)重危害小鼠生產(chǎn)的病毒性傳染病,可引起小鼠致死性肝炎、腦炎和腸炎,對(duì)小鼠的飼養(yǎng)和發(fā)展造成巨大威脅。鼠群感染MHV多數(shù)情況下呈亞臨床型感染,對(duì)實(shí)驗(yàn)研究產(chǎn)生嚴(yán)重的干擾作用。因此,研制特異、快速、簡(jiǎn)便的診斷試劑盒對(duì)鼠群進(jìn)行MHV的監(jiān)測(cè),將是預(yù)防和控制MHV感染的有效措施。
　　 本試驗(yàn)利用抗MHV(毒株MHV-JHM及MHV-A59)抗體探針建立檢測(cè)MHV的膠體金免疫層析方法。利用檸檬酸三鈉還原法分

2、別制備粒徑約為20 nm和15nm的膠體金；設(shè)計(jì)方陣實(shí)驗(yàn)測(cè)得并測(cè)得穩(wěn)定0.5ml膠體金最低抗體量為5.05μg；選用M135作為本實(shí)驗(yàn)的層析材料;并選用3％BSA作為封閉液；實(shí)驗(yàn)確定檢測(cè)線抗體蛋白最適包被量為640μg/ml左右,質(zhì)控線抗體蛋白包被濃度為800μg/ml左右。我們用均一性好的20 nm的膠體金標(biāo)記抗MHV(毒株MHV-JHM及MHV-A59)混合抗體,同時(shí)用此抗體和羊抗鼠IgG二抗包被M135硝酸纖維素膜分別作為檢測(cè)線和

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