乳酸恩諾沙星可溶性粉在雞的藥動學及不同恩諾沙星鹽制劑在雞的殘留消除規(guī)律研究.pdf

1、恩諾沙星(enrofloxacin)為動物專用的第三代氟喹諾酮類抗菌藥。具有抗菌譜廣,殺菌活性強,且與其他抗菌藥物無交叉耐藥性以及生物利用度高,體內(nèi)分布廣泛等良好的藥動學特征,己廣泛用于國內(nèi)外獸醫(yī)臨床。由于恩諾沙星在水中極微溶解,因此人們試圖將恩諾沙星制成各種鹽以改變其溶解性能,進而制成可溶性粉劑以方便臨床用藥。乳酸恩諾沙星、恩諾沙星鈉和鹽酸恩諾沙星正是這一努力的結(jié)果。本研究通過對乳酸恩諾沙星可溶性粉藥動學的研究,了解乳酸恩諾沙星在雞體

2、內(nèi)的過程和生物利用度,為制定臨床合理給藥方案提供依據(jù);通過對恩諾沙星的不同鹽制劑在雞體內(nèi)的殘留消除規(guī)律研究,為制定其休藥期提供依據(jù),這對確保動物性食品安全和消費者的健康具有重要意義。
　　 1乳酸恩諾沙星可溶性粉在雞體內(nèi)的藥動學研究
　　 對24只蘇禽黃羽肉雞分別靜注和內(nèi)服乳酸恩諾沙星10 mg/kg b.w.后進行藥動學和生物利用度研究。血漿藥物濃度采用高效液相色譜法測定(HPLC),所得恩諾沙星血藥濃度數(shù)據(jù)用3p87

3、計算機軟件處理。靜注乳酸恩諾沙星后的血藥濃度—時間數(shù)據(jù)符合二室開放模型,主要動力學參數(shù):t1/2α(0.45±0.16)h,t1/2β(7.02±1.42)h,CL(s)(0.38±0.10)L/kg/h,AUC(23.69±5.56)(mg/L)×h。內(nèi)服乳酸恩諾沙星的血藥濃度時間數(shù)據(jù),符合有吸收因素二室模型,主要動力學參數(shù):t1/2ka(0.60±0.01)h,t1/2ke(8.25±1.73)h,tpeak(2.44±0.17)h

4、,Cmax(1.44±0.30)mg/L,AUC(20.74±3.80)(mg/L)×h,F87.54％。結(jié)果表明,乳酸恩諾沙星可溶性粉在雞體內(nèi)具有吸收快、分布廣、消除較慢以及內(nèi)服生物利用度高的藥動學特征。
　　 2雞組織中恩諾沙星殘留的HPLC檢測方法的建立
　　 取肌肉、肝臟和腎臟等樣品絞碎后加入適量磷酸鹽緩沖液勻漿,加入定量的標準工作液,混勻,離心,取上清液,C18固相萃取柱凈化。收集的洗脫液經(jīng)濾膜過濾后供高效液相

5、色譜分析。色譜條件:色譜柱為Thermo ODS-2HYPERSIL C18(5.0μm,250×4.6mm),流動相為0.05mol/L磷酸溶液/三乙胺和乙腈,流速:1 mL/min。高效液相色譜熒光檢測器檢測,發(fā)射波長和激發(fā)波長分別為450nm和280nm。結(jié)果顯示,在本實驗室條件下,恩諾沙星和環(huán)丙沙星在0.01～1.0μg/mL,呈線性相關,相關系數(shù)大于0.999。檢測限為0.01 mg/kg。對空白試樣進行3個水平(0.05、0

6、.1、1 mg/kg)加標回收率測定,回收率為74.1％～86.8％,批內(nèi)和批間變異系數(shù)分別小于10％和7.5％。上述方法符合中華人民共和國農(nóng)業(yè)部公布的《動物性食品中氟喹諾酮類藥物殘留檢測——高效液相色譜法》國家標準,獲得的技術參數(shù)能滿足本次雞組織中恩諾沙星殘留試驗的檢測要求。
　　 3三種恩諾沙星可溶性粉在雞的殘留消除規(guī)律研究
　　 將乳酸恩諾沙星、恩諾沙星鈉和鹽酸恩諾沙星三種可溶性粉劑分別以臨床推薦劑量,即100 m

7、g/L(以恩諾沙星計)給35只40日齡健康蘇禽黃羽肉雞混飲,連續(xù)給藥7 d。然后分別于停藥后4 h(即0休藥期)、1 d、3 d、5 d、7 d、9d、11d共7個時間點進行采樣,每個時間點宰殺5只雞,及時取肌肉、肝臟和腎臟等組織樣品。樣品經(jīng)絞碎后加入適量磷酸鹽緩沖液勻漿,離心,取上清液,C18固相萃取柱凈化。收集的洗脫液經(jīng)濾膜過濾后供高效液相色譜分析。結(jié)果如下:
　　 3.1乳酸恩諾沙星可溶性粉在雞的殘留消除規(guī)律:在0休藥期時

8、,測得的肌肉、肝臟和腎臟中的恩諾沙星標志殘留物的殘留量分別為(1.899±0.922)mg/kg、(2.574±1.171)mg/kg和(0.967±0.624)mg/kg;肌肉、肝臟、腎臟組織中的恩諾沙星標志殘留物的殘留量分別在停藥5 d、7d和3 d時降至相應的最高殘留限量(MRL)以下。恩諾沙星標志殘留物平均殘留量以實測數(shù)據(jù)用WT1.4計算軟件擬合,肌肉、肝臟和腎臟的休藥期結(jié)果分別為7.689d、7.339d和4.529d。雞按推

9、薦劑量飲水給藥,建議休藥期至少為8d。
　　 3.2恩諾沙星鈉可溶性粉在雞的殘留消除規(guī)律:在0休藥期時,測得的肌肉、肝臟和腎臟中的恩諾沙星標志殘留物的殘留量分別為(1.253±0.319)mg/kg、(2.024±0.902)mg/kg和(0.576±0.099)mg/kg;肌肉、肝臟、腎臟組織中的恩諾沙星標志殘留物的殘留量分別在停藥3 d、5 d和1d時降至相應的MRL以下。實測數(shù)據(jù)用WT1.4計算軟件擬合,肌肉、肝臟和腎臟的

10、休藥期結(jié)果分別為4.919d、4.759d和3.369d。雞按推薦劑量飲水給藥,建議恩諾沙星鈉可溶性粉的休藥期至少為5d。
　　 3.3鹽酸恩諾沙星可溶性粉在雞的殘留消除規(guī)律:在0休藥期時,測得的肌肉、肝臟和腎臟中的恩諾沙星標志殘留物的殘留量分別為(8.038±2.074)mg/kg、(12.678±3.667)mg/kg和(3.273±0.879)mg/kg;肌肉、肝臟、腎臟組織中的恩諾沙星標志殘留物的殘留量在停藥第9 d時降

11、均至相應的MRL以下。實測數(shù)據(jù)用WT1.4計算軟件擬合,肌肉、肝臟和腎臟的休藥期結(jié)果分別為9.739d、9.549d和7.119d。雞按推薦劑量飲水給藥,建議鹽酸恩諾沙星可溶性粉的休藥期至少為10d。
　　 結(jié)果表明,三種恩諾沙星可溶性粉劑按推薦劑量飲水給藥,在0休藥期時,均顯示殘留量肝臟最高,肌肉其次,腎臟最低,肝臟消除亦最慢。三種藥物殘留消除存在差異,乳酸恩諾沙星可溶性粉休藥期至少為8d;恩諾沙星鈉可溶性粉休藥期至少為5d;