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文檔簡介
1、硬蜱為羊群間病原傳播的重要媒介,據(jù)報(bào)道約10%的蜱類攜帶病原體,不同硬蜱種類傳播病原體種類不同,可致使多種疾病在羊群中暴發(fā),對(duì)羊群危害極大,嚴(yán)重影響畜牧業(yè)的健康發(fā)展。因此研究清楚當(dāng)?shù)亓餍杏豺绶N類及其病原攜帶情況具有重要的意義。無漿體Anaplasma和梨形蟲Piroplasm病為羊群間常見的血液原蟲病,本研究初次對(duì)河南省流行硬蜱中前述2種病原的攜帶情況進(jìn)行凋查,為蜱傳病研究提供參考依據(jù)及理論基礎(chǔ)。
本試驗(yàn)從2011年7月-20
2、12年9月對(duì)河南省鄭州、洛陽、南陽等20個(gè)縣市的386只羊體表寄生硬蜱進(jìn)行種類鑒定,在光學(xué)顯微鏡下對(duì)其進(jìn)行形態(tài)學(xué)描述,參考?xì)v史資料初步確定硬蜱種類;利用常規(guī)PCR技術(shù)對(duì)羊源硬蜱進(jìn)行基于核糖體小亞基(16S rDNA)和ITS-2兩個(gè)基因位點(diǎn)進(jìn)行序列分析,鑒定河南省羊源硬蜱流行種類及其基因型,確定河南省羊源硬蜱和我國已報(bào)道同種類硬蜱之間的分子種系進(jìn)化關(guān)系;并使用MEGA等序列分析軟件對(duì)河南省不同地區(qū)所測(cè)得硬蜱序列進(jìn)行差異比對(duì),以此來分析河
3、南省不同地區(qū)間流行硬蜱種類的血緣關(guān)系,結(jié)果發(fā)現(xiàn)采自河南省20個(gè)縣市羊體表感染蜱類均為長角血蜱H.longicornis,16S rDNA基因序列B(l)AST結(jié)果顯示均與蘭州株長角血蜱(FJ712721.1)同源性達(dá)99%,與四川(JF979373.1)、河北株(JF979374.1)長角血蜱相似性99.9%,E值均為0;ITS-2基因序列BLAST結(jié)果顯示均與河北株(JQ346683)相似性99%,E值均為0;對(duì)測(cè)序結(jié)果中26條(每個(gè)
4、地區(qū)選1-2條)16S rDNA序列進(jìn)行序列差異性及同源性分析,26條序列間差異性小,僅存在少數(shù)堿基的替換或缺失。序列間同源性分析結(jié)果顯示同源性最大的數(shù)值為100%,最小數(shù)值為82.7。為蜱類系統(tǒng)研究及蜱傳病防控奠定了基礎(chǔ)。
為了解河南省硬蜱攜帶無漿體Anaplasma及梨形蟲Piroplasma病原情況,對(duì)上述DNA樣品132份,利用常規(guī)PCR和巢式PCR技術(shù)進(jìn)行了檢測(cè)。對(duì)所有樣品擴(kuò)增后,發(fā)現(xiàn)無漿體陽性34份,陽性率:22.
5、7%,其中A.ovis陽性3份,陽性率:2.3%、A.bovis陽性27份,陽性率:20.4%;A.phagocytophilum陽性4份,陽性率:3.0%;同時(shí)感染2份無漿體種樣品數(shù)為1份,陽性率:0.76%;Theileria luwenshuni陽性率:14.4%,Babesia motasi陽性率:0.75%。
本研究結(jié)果表明,長角血蜱為河南省流行蜱類優(yōu)勢(shì)種群,蟲體攜帶病原情況普遍,尤其是在樣品中檢測(cè)到了人畜共患病原嗜
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