河南省發(fā)熱伴血小板減少綜合征流行區(qū)蜱分布及攜帶新布尼亞病毒狀況.pdf

1、目的：調(diào)查河南省發(fā)熱伴血小板減少綜合征流行地區(qū)蜱的種類分布、季節(jié)消長和攜帶新布尼亞病毒狀況。
　　 方法：采用人工布旗法(100cm×100cm,白絨布制成)定時(shí)在草地或灌木叢調(diào)查地段內(nèi),捕捉游離蜱:采用宿主動(dòng)物體表逆毛撿拾法,在家畜如牛、羊、狗等體表采集寄生蜱。將各生境各月份采集的蜱放入同一管內(nèi)編號后,在實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行形態(tài)學(xué)分類鑒定,計(jì)數(shù)各月份不同生境的密度(只/人工布旗·小時(shí)或只/每只(頭)動(dòng)物體)。將采集的蜱在冰上研磨后,進(jìn)行

2、新布尼亞病毒分離的同時(shí),提取核酸進(jìn)行PCR檢測,將PCR反應(yīng)產(chǎn)物經(jīng)純化克隆測序,將測定的核酸序列用DNAStar軟件的SeqMan進(jìn)行人工輔助校對,再利用MegAiign軟件進(jìn)行同源性比較,與GenBank公布序列進(jìn)行比對分析,核酸序列比對分析利用DNASmr7.0完成。
　　 結(jié)果：本次調(diào)查共采集到蜱12388只,其中游離蜱7172只,寄生蜱5216只。經(jīng)形態(tài)學(xué)鑒定隸屬于2科5屬6種。其中硬蜱科(Lxodidae):血蜱屬(H

3、aemaphysalis)長角血蜱(Hacmaphysalis longlcomis)8169只,占65.94％:璃眼蜱屬(Hyalomma)殘緣璃眼蜱(H.detritum)138只,占1.11%,小亞璃眼蜱(H.anatolicum anatolicum)164只,占1.32%:牛蜱屬(Boophilus)微小牛蜱(Boophilus microplus)635只,占5.13%;扇頭蜱屬(Rhipicephalus)血紅扇頭蜱(Rh

4、ipicephalus sanguineus)54只,占0.44%;軟蜱科(Argastdae):鈍緣蜱屬(Ornithodoros)拉哈爾鈍緣蜱(Ornithodoros lahorensis)2只。用人工/小時(shí)布旗法進(jìn)行了86人工/小時(shí)的調(diào)查,捕捉到游離蜱7172只,平均密度為83.40只(人工/小時(shí)),于3～10月活動(dòng),7月份密度最高達(dá)651只(人工/小時(shí))。用宿主動(dòng)物體表逆毛撿拾法,調(diào)查44頭水牛,共獲蜱36只,平均蜱密度為0.

5、8只/牛:39頭黃牛,共獲蜱827只,平均蜱密度為21只/牛;163只羊,共獲蜱3506只,平均蜱密度為21.51只/羊;39只狗,共獲蜱203只,平均蜱密度為5.21只/狗:全年均可在家畜體表撿拾到寄生蜱,6月份密度最高達(dá)27.15只/家畜。對77組蜱研磨液(共825只)進(jìn)行了病毒培養(yǎng)分離和PCR核酸檢測,用Vero細(xì)胞未分離到新布尼亞病毒;PCR核酸檢測11組陽性,將反應(yīng)產(chǎn)物經(jīng)純化克隆測序證實(shí)擴(kuò)增基因片段為600bp,核苷酸序列同源

6、性比對結(jié)果,相似度在93%-100%,其中與布尼亞病毒分離株(HQ419214.1)相似性最大為100%,其次為99%(JF682778.1),與布尼亞病毒分離株(HQ179742.1)最小為93%。證實(shí)本次從蜱中擴(kuò)增的序列屬新布尼亞病毒。
　　 結(jié)論：⑴明確了河南省發(fā)熱伴血小板減少綜合征流行地區(qū)蜱種類及分布,隸屬于2科5屬6種,其中硬蜱科有5種,分別為:長角血蜱,殘緣璃眼蜱、小亞璃眼蜱,微小牛蜱和血紅扇頭蜱;軟蜱科為拉哈爾鈍緣