青海血蜱體內(nèi)牛羊梨形蟲(chóng)PCR檢測(cè)技術(shù)的建立和應(yīng)用.pdf

1、青海血蜱(Haemaphysalisqinghaiensis)是我國(guó)命名的蜱種，研究表明它是羊的尤氏泰勒蟲(chóng)、呂氏泰勒蟲(chóng)、羊巴貝斯蟲(chóng)和牛的中華泰勒蟲(chóng)等四種梨形蟲(chóng)病的傳播媒介，這些病原都直接危害著我國(guó)畜牧業(yè)的發(fā)展。傳統(tǒng)的病原檢測(cè)方法主要以顯微鏡鏡檢查為主，這既費(fèi)時(shí)又不敏感，且很難區(qū)分四種病原。本實(shí)驗(yàn)以四種梨形蟲(chóng)的18SrRNA基因序列為依掘，利用該基因在生物進(jìn)化過(guò)程中形成的保守性區(qū)域和不同蟲(chóng)種間的高變區(qū)域，分別設(shè)計(jì)了梨形蟲(chóng)的通用引物和針對(duì)不

2、同蟲(chóng)種的種特異引物，建立了套式PCR方法，并運(yùn)用所建立的方法對(duì)青海血蜱體內(nèi)梨形蟲(chóng)的感染狀況進(jìn)行了檢測(cè)。結(jié)果表明：該方法對(duì)尤氏泰勒蟲(chóng)、呂氏泰勒蟲(chóng)、中華泰勒蟲(chóng)和羊巴貝斯蟲(chóng)基因組DNA的敏感性分別是0.1pg、1ng、10pg和100pg。通過(guò)對(duì)采自甘肅省甘南臧族自治州臨潭縣的136份青海血蜱樣品(其中雌蜱55份，雄蜱81份)進(jìn)行檢測(cè)，其中感染蜱62份，感染率為45.59﹪；混合感染蜱12份，混合感染率為19.35﹪。尤氏泰勒蟲(chóng)、呂氏泰勒蟲(chóng)和

3、牛中華泰勒蟲(chóng)三種病原混合感染的有2份；羊巴貝斯蟲(chóng)和尤氏泰勒蟲(chóng)兩種病原混合感染的有1份；尤氏泰勒蟲(chóng)和呂氏泰勒蟲(chóng)兩種病原混合感染的有9份。感染的雌蜱27份，占檢查雌蜱總數(shù)的49.1﹪，感染的雄蜱35份，占檢查雄蜱總數(shù)的43.2﹪。帶有尤氏泰勒蟲(chóng)的蜱62份，感染率為45.59﹪，呂氏泰勒蟲(chóng)感染9份，感染率為6.62﹪，中華泰勒蟲(chóng)感染2份，感染率為1.47﹪，2份均為雌蜱；羊巴貝斯蟲(chóng)感染1份為雄蜱，感染率為0.74﹪。檢測(cè)發(fā)現(xiàn)尤氏泰勒蟲(chóng)和呂氏泰