濟(jì)寧青山羊皮膚毛囊的發(fā)育性變化與MTR-1A、IGF-1和TYR基因的差異表達(dá)研究.pdf

1、為揭示濟(jì)寧青山羊皮膚毛囊的發(fā)育性變化規(guī)律及其候選基因的差異表達(dá)對(duì)皮膚毛囊生長(zhǎng)和發(fā)育的影響，本研究采用組織學(xué)和實(shí)時(shí)熒光定量PCR等分子細(xì)胞生物學(xué)技術(shù)，對(duì)青山羊不同發(fā)育階段皮膚毛囊的組織結(jié)構(gòu)及其發(fā)育性變化規(guī)律和皮膚組織中褪黑素受體1A（MTR-1A）、類胰島素生長(zhǎng)因子1（IGF-1）和酪氨酸酶（TYR）基因的mRNA差異表達(dá)量進(jìn)行了比較研究。主要研究結(jié)果如下：
　　 一、采用組織學(xué)與顯微觀測(cè)技術(shù)，比較研究了濟(jì)寧青山羊胎兒羊（妊娠80

2、-85d）、小猾皮（出生后3d）、大猾皮（出生后30d）和1齡成年羊皮膚毛囊的組織學(xué)結(jié)構(gòu)，以及成年羊皮膚不同部位的組織學(xué)差異，結(jié)果表明：
　　 （1）胎兒羊（妊娠80-85d）胚胎性表皮分化為三層并增厚，真皮分化為兩層，交織分布著成纖維細(xì)胞。在表皮區(qū)可以發(fā)現(xiàn)次級(jí)毛囊毛基的發(fā)生。
　　 （2）小猾皮毛囊層中的膠原纖維平行縱橫交錯(cuò)，與網(wǎng)狀層相比排列較為緊密；而網(wǎng)狀層中的膠原纖維呈水平走向，為平行交織狀排列。毛囊層內(nèi)的彈性纖維

3、細(xì)而彎曲，相互交織，縱橫排列。網(wǎng)狀層內(nèi)無彈性纖維的分布。小猾皮的毛囊組織間隙較大，密度較稀，初級(jí)毛囊發(fā)達(dá)，次級(jí)毛囊較少。小猾皮每個(gè)毛囊群僅由2-3個(gè)初級(jí)毛囊和1-2個(gè)次級(jí)毛囊組成。
　　 （3）大猾皮毛囊層和網(wǎng)狀層明顯增厚，有粗大的膠原纖維束分布其中。大猾皮的毛囊密度和毛囊群直徑極顯著地大于小猾皮。次級(jí)毛囊密集排列在初級(jí)毛囊的周圍。大猾皮毛囊群由1-5個(gè)初級(jí)毛囊和若干個(gè)次級(jí)毛囊組成，其中3毛囊群最多，發(fā)達(dá)的毛囊群使大猾皮表面粗糙

4、。
　　 （4）成年羊皮膚毛囊層的厚度超過網(wǎng)狀層，毛囊層內(nèi)含有較多的結(jié)締組織、膠原纖維和彈性纖維，形成致密的彈性纖維網(wǎng)。網(wǎng)狀層中的膠原纖維粗大，膠原纖維呈平行疏松排列。成年羊皮膚初級(jí)毛囊較粗長(zhǎng)，具有皮脂腺等附屬結(jié)構(gòu)，毛干有髓質(zhì)；次級(jí)毛囊沒有髓質(zhì)且毛球較小，皮脂腺不發(fā)達(dá)或缺如。成年羊毛囊群和大猾皮相似，3毛囊群最多，占81.32％。
　　 （5）成年羊頸、背、腹和臀四個(gè)部位的皮膚厚度、表皮厚、真皮各層厚均以頸部最厚，背部次

5、之，腹部最薄，頸部與背部、腹部差異極顯著，背部與臀部差異不顯著：四個(gè)部位的羊毛密度，以背部最密，腹部最稀（P>0.05）。羊毛細(xì)度在各個(gè)部位的差異不顯著。毛囊群直徑，以腹部最粗，背部次之，臀部最細(xì)（P<0.01）。初級(jí)毛囊和次級(jí)毛囊的深度，均以頸部最深，背部次之，臀部最淺（P<0.01）。
　　 二、采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)，研究了MTR-1A、IGF-1和TYR基因在濟(jì)寧青山羊胎兒羊、小猾皮、大猾皮和1齡成年羊背部皮膚組織中

6、mRNA的差異表達(dá)量，結(jié)果表明：
　　 （1）MTR-1A在大猾皮的表達(dá)量極顯著地高于其他三個(gè)時(shí)期（P<0.01），為胎兒期的19.5倍，為小猾皮的14.98倍，為1齡成年羊的8.87倍：IGF-1在大猾皮的表達(dá)量極顯著地高于其他三個(gè)時(shí)期（P<0.01），為胎兒期的39.26倍，為小猾皮的24.61倍，為1齡成年羊的19.52倍；表明，MT和IGF-1參與調(diào)控次級(jí)毛囊的分化與發(fā)育。在大猾皮時(shí)期，MTR-1A和IGF-1的高表達(dá)說

7、明，在此時(shí)期大量初級(jí)毛囊的毛纖維生長(zhǎng)和次級(jí)毛囊毛基的發(fā)育啟動(dòng)了次級(jí)毛囊的毛纖維的發(fā)生和生長(zhǎng)。
　　 （2）MTR-1A在1齡成年羊皮膚頸部和背部的表達(dá)量與臀部的表達(dá)量差異顯著（P<0.05）；IGF1在1齡成年羊皮膚頸部、背部和臀部的表達(dá)量與腹部的表達(dá)量差異顯著（P<0.05）。成年羊皮膚組織中MTR-1A和IGF-1的差異表達(dá)以及毛囊群分布提示MT對(duì)初級(jí)毛囊的作用大于IGF-1。
　　 （3）MTR-1A和IGF-1的

8、表達(dá)量與成年羊的羊毛細(xì)度存在一定的相關(guān)性（P>0.05），說明MT和IGF-1是影響羊毛細(xì)度的重要候選基因。
　　 （4）TYR在小猾皮和成年羊皮膚組織的表達(dá)量極顯著地高于胎兒期和大猾皮階段（P<0.01），其在小猾皮和成年羊背部皮膚中的表達(dá)量分別為胎兒期的14.4倍和10.89倍。TYR在小猾皮中的高表達(dá)說明，胎兒出生后，由于光照等環(huán)境因素的影響，位于毛囊乳頭頂部的黑素細(xì)胞活化，皮膚組織中有大量黑素顆粒生成，在毛干堆積影響毛纖