駱駝盤尾絲蟲病流行病學及病原rDNA-ITS序列研究.pdf

1、駱駝盤尾絲蟲（Onchocerca of camels）是一種寄生于駱駝體內的白色絲狀線蟲，其成蟲寄生在駱駝的皮下組織、肌腱及韌帶等部位，最終導致宿主寄生部位形成纖維組織結節(jié)，對駝肉的品質、皮革質量以及駱駝的生長和發(fā)育都會產生不利的影響，給養(yǎng)駝業(yè)帶來較大的經(jīng)濟損失。目前，對于該病的病原、傳播媒介以及生前診斷和預防的研究，在國內外幾乎是一片空白，而流行病學調查和蟲種鑒定以及系統(tǒng)發(fā)生研究是駱駝盤尾絲蟲病防控的重要基礎。本研究從內蒙古養(yǎng)駝業(yè)生

2、產實際出發(fā)，主要從以下幾個方面入手，對駱駝盤尾絲蟲病進行了研究。
　　首先采用寄生蟲學剖解技術，調查了內蒙古兩個駱駝主產區(qū)（阿拉善地區(qū)和巴彥淖爾地區(qū)）駱駝盤尾絲蟲病的流行狀況。共剖解駱駝64峰，結果顯示，內蒙古地區(qū)駱駝盤尾絲蟲的平均感染率為92％，最大感染強度為23個蟲結/峰，蟲結平均大小為38×20×9（mm3）。
　　對所檢獲的盤尾絲蟲結節(jié)進行胃蛋白酶消化處理，首次在雙峰駝體內檢獲了完整的盤尾絲蟲雌蟲和雄蟲，并對成蟲和微

3、絲蚴的形態(tài)進行了詳細的描述。且在形態(tài)學鑒定的基礎上，運用PCR方法擴增該盤尾絲蟲的線粒體16S rRNA基因，對其進行克隆與測序，在分子水平上進行了蟲種確認。結果表明，駱駝盤尾絲蟲種類為福斯盤尾絲蟲（Onchocerca fasciata）。
　　隨后，以線蟲通用引物NC5和NC2擴增福斯盤尾絲蟲rDNA的內轉錄間隔區(qū)ITS1和ITS2以及5.8S基因序列。結果顯示，其核苷酸序列片段長度分別為412bp、341bp和157bp。以

4、ITS2為研究對象，比較其與盤尾絲蟲屬其他蟲種的同源性，并構建系統(tǒng)發(fā)育樹，結果表明，在所比較的各盤尾絲蟲蟲種間，同源性在93.2%～97.3%范圍內，而且顯示O.linealis為最原始的進化種，O.fasciata、O.gibsoni和O.gutturosa則進化較慢。
　　根據(jù)福斯盤尾絲蟲rDNA ITS序列，設計了福斯盤尾絲蟲種特異性引物OFIs和OFIas，并對蟲體基因組DNA進行了擴增，產物經(jīng)瓊脂糖凝膠電泳后，可見一條約