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文檔簡介
1、龍眼(Phyllanthus reticulatus Pior)采后貯藏期真菌性病害主要是由于幾種病原真菌的潛伏侵染造成的,其中龍眼焦腐病菌[Lasiodiplodia theobromae(Pat.)Griff.&Maubl.]分離頻率最高(46%)。為進(jìn)一步研究龍眼焦腐病菌致病的分子機(jī)制,本文致力于該菌遺傳轉(zhuǎn)化系統(tǒng)的建立。 首先,為獲得大量分生孢子以培養(yǎng)細(xì)嫩菌絲用于原生質(zhì)體制備,比較了龍眼焦腐病菌在不同培養(yǎng)條件下產(chǎn)生子座的能
2、力,結(jié)果表明燕麥和米糠培養(yǎng)基最適于該菌產(chǎn)生子座;培養(yǎng)基pH6.0,連續(xù)光照15d,子座產(chǎn)生量最大。 其次,對(duì)龍眼焦腐病菌原生質(zhì)體的制備和再生條件進(jìn)行了的研究,結(jié)果是新鮮的分生孢子在CM液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)30h左右的菌絲,采用Sorbital(1M,pH5.5~6)作為酶液穩(wěn)滲劑,用組合酶:1%纖維素酶+1%溶壁酶+1%蝸牛酶+1%崩潰酶作為裂解酶,30℃裂解3~3.5h,原生質(zhì)體生成量最大,其再生率也最高,達(dá)到40%。 最
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