基于TAC多基因轉(zhuǎn)化載體的構(gòu)建及其轉(zhuǎn)化水稻的研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、本研究把植物可轉(zhuǎn)化人工染色體(TAC)載體技術(shù)應(yīng)用于水稻四種轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白基因蔗糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白基因(ossut5z)、細(xì)胞壁轉(zhuǎn)化酶基因(oscin3)、單糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白基因(osmst4)和ATP/ADP轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白基因(oaat)的多基因載體構(gòu)建和遺傳轉(zhuǎn)化。載體構(gòu)建是通過以pYLTAC為骨架載體，將OsSUT5Z、OsMST4、OsCIN3和OAAT等4個控制同化產(chǎn)物運(yùn)輸相關(guān)的基因構(gòu)建在同一個表達(dá)載體上，分別構(gòu)建了載體pTAC747H-CIN3-MST

2、4、pTAC747H-OAAT-SUT5和 pTAC747H-OAAT-SUT5-CIN3-MST4，總插入片段大小為30kb左右。以實(shí)驗(yàn)室原有的轉(zhuǎn)化體系為基礎(chǔ)，初步探索通過根農(nóng)桿菌介導(dǎo)轉(zhuǎn)化大片段多基因載體的轉(zhuǎn)化效率的影響因素，包括不同水稻基因型、不同植物培養(yǎng)基、不同的農(nóng)桿菌感染愈傷組織的方式等因素，從而有效的提高大片段轉(zhuǎn)化效率。通過根農(nóng)桿菌介導(dǎo)轉(zhuǎn)化將三個表達(dá)載體轉(zhuǎn)入明恢86和日本晴成熟胚誘導(dǎo)的愈傷組織中，其中轉(zhuǎn)明恢86的轉(zhuǎn)化率分別為1

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