板藍(lán)根多糖抗小鵝瘟病毒作用的研究.pdf

1、小鵝瘟是雛鵝和雛番鴨的一種急性或亞急性傳染病，由鵝細(xì)小病毒即小鵝瘟病毒(GPV)引起。本病主要侵害4-30日齡雛鵝，具有傳染快，死亡率高，危害大的特點(diǎn)。生產(chǎn)上主要依靠免疫種鵝以提高雛鵝母源抗體水平，或1日齡雛鵝注射高免血清來控制本病的大規(guī)模流行，但臨床上每年仍有約20％雛鵝發(fā)病，主要用抗小鵝瘟血清等治療，雖有較好療效，但易傳播其他傳染性疾病且生產(chǎn)成本巨大。有科研人員探索用含板藍(lán)根的中藥復(fù)方防治本病，亦取得了較好效果。而眾多文獻(xiàn)則報(bào)道板藍(lán)

2、根及其多糖在細(xì)胞或胚內(nèi)，對流感病毒、豬細(xì)小病毒和新城疫病毒等十多種病毒均有擷抗作用。鑒此，課題組提出了板藍(lán)根多糖抗小鵝瘟病毒的作用研究。 本項(xiàng)研究以板藍(lán)根多糖(IRPS)和板藍(lán)根煎液為研究對象，在鵝胚、鵝胚成纖維細(xì)胞和人工感染雛鵝3個(gè)水平上，研究其抗GPV的作用效果及機(jī)理，為探尋IRPS抗GPV的作用積累科學(xué)的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。具體試驗(yàn)研究分以下三個(gè)方面： 試驗(yàn)一、IRPS對GPV在鵝胚中繁殖的影響在鵝胚內(nèi)作IRPS直接殺毒和阻

3、斷感染試驗(yàn)，對鵝胚尿囊液中GPV含量、鵝胚存活時(shí)間、存活率、病變和病毒含量進(jìn)行測定。結(jié)果顯示：40μg/胚IRPS阻斷感染組，GPV接種72 h后ELISA檢測為陽性的尿囊液最高稀釋倍數(shù)是23；鵝胚平均存活時(shí)間為192 h；存活率為6/6；胚體肉眼觀察未見病變；切片鏡檢：肝、腎輕度淤血和細(xì)胞變性，心、腦輕度淤血和水腫；免疫組化檢測：肝、腎內(nèi)GPV表達(dá)抗原為弱陽性，心、腦內(nèi)為陰性。而攻毒對照組尿囊液GPV陽性的最高稀釋倍數(shù)為28；鵝胚存活

4、時(shí)間138 h；存活率0/6；胚體嚴(yán)重萎縮、出血、水腫，心、肝、腦、腎等組織均呈現(xiàn)細(xì)胞碎裂、壞死，組織內(nèi)GPV表達(dá)抗原全為強(qiáng)陽性。兩者比較，各指標(biāo)具有極顯著差異。表明在鵝胚內(nèi)IRPS具有極強(qiáng)的阻斷GPV感染、增殖和保護(hù)胚體組織器官免受其損傷的作用。 試驗(yàn)二、IRPS抗GPV的體外作用研究為了探索IRPS在GEF上的抗GPV的作用，在培育GPV細(xì)胞適應(yīng)株和測定IRPS對GEF生長影響的基礎(chǔ)上，采用MTT法研究IRPS對GPV的阻斷

5、感染、抑制增殖及直接殺滅作用。結(jié)果表明：培育的細(xì)胞適應(yīng)株GPVy06-11病毒能引起GEF明顯病變；100～1000μg/mL的IRPS能促進(jìn)GEF增殖；100～750μg/mL的IRPS對GPV有顯著的阻斷感染和直接殺滅作用，400～750μg/mL的IRPS有抑制病毒增殖的作用。 試驗(yàn)三、板藍(lán)根及其多糖防治實(shí)驗(yàn)性小鵝瘟病的研究為了探討板藍(lán)根水煎液及其多糖溶液在雛鵝體內(nèi)是否具有抗GPV的作用，在板藍(lán)根水提液多糖含量測定、鵝胚源

6、GPVyz株對雛鵝的LD50毒力測定的基礎(chǔ)上，進(jìn)行人工感染小鵝瘟病毒的分組防治試驗(yàn)，觀察其存活時(shí)間、存活率、組織病變和病毒含量等指標(biāo)。結(jié)果顯示：僅在死亡鵝的平均存活時(shí)間方面，IRPS防治組為130.7 h、板藍(lán)根煎液組為150.0 h，與陰性藥物組的118.8 h有顯著差異。表明在人工攻毒的雛鵝體內(nèi)，板藍(lán)根煎液或IRPS溶液僅能減慢GPV在病雛體內(nèi)的復(fù)制和各組織間的轉(zhuǎn)移速度，但不能完全抑制病毒的復(fù)制和致病性。 綜上所述，本研究結(jié)