板藍根多糖抗小鵝瘟病毒作用的研究.pdf

1、小鵝瘟是雛鵝和雛番鴨的一種急性或亞急性傳染病，由鵝細小病毒即小鵝瘟病毒(GPV)引起。本病主要侵害4-30日齡雛鵝，具有傳染快，死亡率高，危害大的特點。生產(chǎn)上主要依靠免疫種鵝以提高雛鵝母源抗體水平，或1日齡雛鵝注射高免血清來控制本病的大規(guī)模流行，但臨床上每年仍有約20％雛鵝發(fā)病，主要用抗小鵝瘟血清等治療，雖有較好療效，但易傳播其他傳染性疾病且生產(chǎn)成本巨大。有科研人員探索用含板藍根的中藥復方防治本病，亦取得了較好效果。而眾多文獻則報道板藍

2、根及其多糖在細胞或胚內(nèi)，對流感病毒、豬細小病毒和新城疫病毒等十多種病毒均有擷抗作用。鑒此，課題組提出了板藍根多糖抗小鵝瘟病毒的作用研究。 本項研究以板藍根多糖(IRPS)和板藍根煎液為研究對象，在鵝胚、鵝胚成纖維細胞和人工感染雛鵝3個水平上，研究其抗GPV的作用效果及機理，為探尋IRPS抗GPV的作用積累科學的實驗數(shù)據(jù)。具體試驗研究分以下三個方面： 試驗一、IRPS對GPV在鵝胚中繁殖的影響在鵝胚內(nèi)作IRPS直接殺毒和阻

3、斷感染試驗，對鵝胚尿囊液中GPV含量、鵝胚存活時間、存活率、病變和病毒含量進行測定。結果顯示：40μg/胚IRPS阻斷感染組，GPV接種72 h后ELISA檢測為陽性的尿囊液最高稀釋倍數(shù)是23；鵝胚平均存活時間為192 h；存活率為6/6；胚體肉眼觀察未見病變；切片鏡檢：肝、腎輕度淤血和細胞變性，心、腦輕度淤血和水腫；免疫組化檢測：肝、腎內(nèi)GPV表達抗原為弱陽性，心、腦內(nèi)為陰性。而攻毒對照組尿囊液GPV陽性的最高稀釋倍數(shù)為28；鵝胚存活

4、時間138 h；存活率0/6；胚體嚴重萎縮、出血、水腫，心、肝、腦、腎等組織均呈現(xiàn)細胞碎裂、壞死，組織內(nèi)GPV表達抗原全為強陽性。兩者比較，各指標具有極顯著差異。表明在鵝胚內(nèi)IRPS具有極強的阻斷GPV感染、增殖和保護胚體組織器官免受其損傷的作用。 試驗二、IRPS抗GPV的體外作用研究為了探索IRPS在GEF上的抗GPV的作用，在培育GPV細胞適應株和測定IRPS對GEF生長影響的基礎上，采用MTT法研究IRPS對GPV的阻斷

5、感染、抑制增殖及直接殺滅作用。結果表明：培育的細胞適應株GPVy06-11病毒能引起GEF明顯病變；100～1000μg/mL的IRPS能促進GEF增殖；100～750μg/mL的IRPS對GPV有顯著的阻斷感染和直接殺滅作用，400～750μg/mL的IRPS有抑制病毒增殖的作用。 試驗三、板藍根及其多糖防治實驗性小鵝瘟病的研究為了探討板藍根水煎液及其多糖溶液在雛鵝體內(nèi)是否具有抗GPV的作用，在板藍根水提液多糖含量測定、鵝胚源

6、GPVyz株對雛鵝的LD50毒力測定的基礎上，進行人工感染小鵝瘟病毒的分組防治試驗，觀察其存活時間、存活率、組織病變和病毒含量等指標。結果顯示：僅在死亡鵝的平均存活時間方面，IRPS防治組為130.7 h、板藍根煎液組為150.0 h，與陰性藥物組的118.8 h有顯著差異。表明在人工攻毒的雛鵝體內(nèi)，板藍根煎液或IRPS溶液僅能減慢GPV在病雛體內(nèi)的復制和各組織間的轉(zhuǎn)移速度，但不能完全抑制病毒的復制和致病性。 綜上所述，本研究結