粗腳粉螨居群遺傳多樣性的ISSR分析.pdf

1、粗腳粉螨是我國常見的粉螨，是倉儲糧食、經(jīng)濟作物和食用菌的重要害螨，其經(jīng)濟重要性受到國內(nèi)外的廣泛重視。本研究采用ISSR分子標(biāo)記探討了不同居群粗腳粉螨的遺傳多樣性及其居群遺傳結(jié)構(gòu)。主要研究內(nèi)容及結(jié)果如下。 (1)探索并確定了粗腳粉螨基因組DNA提取的最佳方案。SDS(10％m/v)40μl，蛋白酶K(10mg/mL)6μl，STE204μl：消化溫度：45℃；消化時間：10-12h：粗腳粉螨個體數(shù)：50只；總體積250μl。

2、 (2)建立了ISSR-PCR最佳反應(yīng)體系。通過正交實驗方法，建立了粗腳粉螨ISSR-PCR最佳反應(yīng)體系：Mg2+濃度2.0mmol/L、TaqDNA聚合酶0.75U、dNTPs濃度0.25gmol/L、引物濃度0.3μmol/L、模版DNA量20ng，總體積為25μl。 (3)ISSR-PCR.擴增結(jié)果：共篩選出18條條帶清晰、擴增穩(wěn)定、多態(tài)性高的引物，分別對江西南昌(NC)、九江(JJ)及安徽巢湖兩個不同寄主(AH-1、A

3、H-2)共4個不同居群進行：ISSR-PCR擴增，共獲得136條帶，其中多態(tài)性條帶107條，多態(tài)帶百分比(PPB)為78.68％。 (4)遺傳多樣性分析：在居群水平上，平均期望雜合度(He)，Shannon信息指數(shù)(I)和多念帶百分比分別為0.1302，0.1875和30.15％；在物種水平上，期望雜合度(He)，Shannon指數(shù)(I)和多態(tài)帶百分率(PPB)分別為0.3586，0.5314和78.68％。4個居群的遺傳多樣性

4、山高到低為：JJ>NC>AH-1>AH-2，九江居群遺傳多樣性豐富度最高。 (5)群體間遺傳變異分析：各居群間的基因分化系數(shù)Gst為0.6283，說明四個居群間表現(xiàn)出較高水平的遺傳分化，這與AMOVA分析結(jié)果(FST=0.5824，P<0.001)接近。遺傳結(jié)構(gòu)分析表明居群間基因流(Nm=0.2957)水平較低?；谶z傳距離的UPMGA聚類分析顯示安徽粗腳粉螨兩居群親緣關(guān)系最為緊密，九江居群與其他居群親緣關(guān)系較遠。分析結(jié)果可得：