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1、研究目的由于直接從血吸蟲(chóng)蟲(chóng)體中分離純化組織蛋白酶L難度較大,因此該研究采用基因克隆和重組表達(dá)技術(shù),構(gòu)建表達(dá)日本血吸蟲(chóng)組織蛋白酶L二個(gè)亞型:SjCL1和SjCL2基因的原核表達(dá)系統(tǒng)和甲醇酵母表達(dá)系統(tǒng),優(yōu)化表達(dá)條件,以期獲得具有生物學(xué)活性的重組組織蛋白酶L的高效表達(dá),為進(jìn)一步研究組織蛋白酶L的生化特性和生物學(xué)功能提供重組蛋白,并為今后的藥物高通量篩選提供一個(gè)新的研究系統(tǒng).結(jié)論①獲得了可以表達(dá)具有一定組織蛋白酶L樣活性的重組蛋白酶的大腸桿菌工
2、程菌株:pGEX-SjCL1D/BL21、pGEX-SjCL2D/BL21以及酵母菌工程菌株:pPICZ α B-SjCL1/X-33、pPICZ α B-SjCL2/X-33.②分別由上述菌株表達(dá)的SjCL1和SjCL2重組蛋白的酶活性適宜的pH范圍不同,提示它們的空間構(gòu)象和生物學(xué)功能存在差異.③該研究新分離獲得的SjCL2基因與GeneBank所報(bào)道的SjCL2基因在核酸序列上存在一定程度上的差異,由此引起的推導(dǎo)氨基酸序列的差別將可
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