快速生長(zhǎng)甘藍(lán)型油菜的遺傳轉(zhuǎn)化及其T-DNA插入突變體的獲得.pdf_第1頁(yè)
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1、甘藍(lán)型油菜(Brassica napus L.，AACC，2n=38)是異源四倍體，基因組大小(1132Mb)約是擬南芥基因組(125Mb)的9倍，冬性油菜需要春化作用才能正常結(jié)實(shí)，生長(zhǎng)周期長(zhǎng)，這些因素限制了油菜遺傳育種進(jìn)程和功能基因組學(xué)的研究。根癌農(nóng)桿菌介導(dǎo)的T-DNA轉(zhuǎn)移是進(jìn)行大規(guī)模轉(zhuǎn)化的首選方法，廣泛應(yīng)用在模式植物的突變體庫(kù)的構(gòu)建中。
　　 本文通過雙元載體pCambia2031轉(zhuǎn)化快速生長(zhǎng)甘藍(lán)型油菜(Rapid-cycl

2、eBrassica napus)，獲得和鑒定T-DNA插入突變體。通過農(nóng)桿菌介導(dǎo)和蘸花法共獲得T-DNA插入突變植株51株，其中通過農(nóng)桿菌介導(dǎo)的方法獲得28株，通過蘸花法獲得23株，轉(zhuǎn)化率分別為2.69％、1.04％。對(duì)11株T-DNA插入突變體進(jìn)行了TAIL-PCR分析，6株有效擴(kuò)增，以期為油菜功能基因組學(xué)提供有價(jià)值的材料；
　　 此外，為了縮短油菜遺傳轉(zhuǎn)化的時(shí)間，消除選擇標(biāo)記基因帶來的生物安全性問題，構(gòu)建了天麻抗真菌蛋白基因

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