快速生長甘藍型油菜的遺傳轉化及其T-DNA插入突變體的獲得.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、甘藍型油菜(Brassica napus L.,AACC,2n=38)是異源四倍體,基因組大小(1132Mb)約是擬南芥基因組(125Mb)的9倍,冬性油菜需要春化作用才能正常結實,生長周期長,這些因素限制了油菜遺傳育種進程和功能基因組學的研究。根癌農桿菌介導的T-DNA轉移是進行大規(guī)模轉化的首選方法,廣泛應用在模式植物的突變體庫的構建中。
   本文通過雙元載體pCambia2031轉化快速生長甘藍型油菜(Rapid-cycl

2、eBrassica napus),獲得和鑒定T-DNA插入突變體。通過農桿菌介導和蘸花法共獲得T-DNA插入突變植株51株,其中通過農桿菌介導的方法獲得28株,通過蘸花法獲得23株,轉化率分別為2.69%、1.04%。對11株T-DNA插入突變體進行了TAIL-PCR分析,6株有效擴增,以期為油菜功能基因組學提供有價值的材料;
   此外,為了縮短油菜遺傳轉化的時間,消除選擇標記基因帶來的生物安全性問題,構建了天麻抗真菌蛋白基因

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