第四課腫瘤模型ljl分析

1、第四課 腫瘤疾病動物模型,分類,1. 自發(fā)性腫瘤（spontaneous tumor）動物模型： 指實驗動物未經任何有意識的人工處置，在自然情況下發(fā)生的腫瘤所形成的模型。2. 誘發(fā)性腫瘤（induced tumor）動物模型： 是使用致癌因素在實驗條件下誘發(fā)動物發(fā)生腫瘤的動物模型。3. 移植性腫瘤（transplant tumor）動物模型： 指將動物或人體腫瘤移植同種或

2、異種動物連續(xù)傳代而培養(yǎng)出的模型。,分類：1. 皮下腫瘤模型2. 原位腫瘤模型,,,實驗動物種群中不經有意識的人工實驗處置而自然發(fā)生的一類腫瘤稱之為自發(fā)性腫瘤。自發(fā)性腫瘤發(fā)生的類型和發(fā)病率可隨實驗動物的種屬、品系及類型的不同而各有差異。某些近交品系動物在一定年齡內，可以發(fā)生一定比率的某種自發(fā)性腫瘤。腫瘤實驗研究中，選用高發(fā)病率的實驗動物腫瘤模型作為研究對象，否則就無法進行研究。 目前已培育了許多種小鼠自發(fā)腫瘤，

3、從腫瘤發(fā)生學上看，這些自發(fā)瘤與人體腫瘤相似，進行腫瘤發(fā)病學和藥物篩選等實驗應屬理想。但由于不易同時獲得大批病程相似的自發(fā)瘤動物，又因這種腫瘤生長較慢，實驗周期相對較長，所以一般很少用于篩藥。,自發(fā)性腫瘤動物模型,自發(fā)性腫瘤模型優(yōu)缺點,自發(fā)性腫瘤通常比用實驗方法誘發(fā)的腫瘤與人類所患的腫瘤更為相似，有利于將動物實驗結果推用到人；這一類腫瘤發(fā)生的條件比較自然，有可能通過細致觀察和統(tǒng)計分析而發(fā)現原來沒有發(fā)現的環(huán)境的或其它的致癌因素，可以著

4、重觀察遺傳因素在腫瘤發(fā)生上的作用。腫瘤的發(fā)生情況可能參差不齊，不可能在短時間內獲得大量腫瘤學材料，觀察時間可能較長，實驗耗費較大。,應用舉例1－AKR小鼠,應用AKR自發(fā)白血病小鼠進行研究，該小鼠出生后一年半內有高于90%的發(fā)病率，曾作為研究人體白血病和淋巴瘤的模型，它對藥物的治療反應類似兒童急性淋巴性白血病。由于病程較長，已用于綜合化療研究藥物誘導緩解和維持緩解的最適治療方案。此腫瘤可用強的松和長春新堿誘導緩解，也可以環(huán)磷酰胺

5、和甲基-CCNU誘導緩解，再用阿糖胞苷維持緩解，后者療效最好。,,,AKR白血病的生長規(guī)律研究提示，該鼠出生時即帶有致癌的RNA病毒，于鼠齡6~13月內，每月小鼠自發(fā)瘤的死亡率為15~20%，而伴有增殖能力的瘤細胞常于診斷前一個月在小鼠胸腺中出現，診斷后中等生存期為16天，以上規(guī)律的闡明為化療提供了基礎知識。,應用舉例2－C3H小鼠,C3H小鼠出生后有高的乳腺癌發(fā)生率，A系小鼠出生后18個月內有90%的肺癌發(fā)生率，AK和C57小鼠有高的

6、白血病發(fā)生率等等，這些腫瘤多發(fā)生于體表部位或易為目前體檢新發(fā)現的部位。 當前新藥研究中自發(fā)瘤模型應用最多的小鼠自發(fā)乳癌，常用高自發(fā)率的C3H小鼠或BALB/C雌鼠與DBA/2雄鼠雜交的第一代CD2F1小鼠（自發(fā)乳癌），它們于生后10個半月可摸到腫瘤，而后生存20~35天死亡，大量繁殖此類小鼠，自發(fā)瘤可高達70%。一般于摸到腫瘤塊后分組給藥，觀察其平均生存時間的延長率來評價藥物的療效。,方法：原位誘發(fā)：指將致癌物直接與動物靶組織或靶器

7、官接觸而誘發(fā)該組織或器官發(fā)生腫瘤，接觸方法可通過涂抹、灌注、喂養(yǎng)或埋置等 。異位誘發(fā)：將與致癌物接觸后的動物組織或器官埋置于該動物或另一正常動物皮下而產生的該組織或器官的腫瘤。異位誘發(fā)腫瘤具有易于觀察和取材的優(yōu)點。誘癌物： 放射線局部照射、化學致癌物（烷化劑、亞硝胺類、芳香胺類）、生物毒素（黃曲酶毒素）、細菌（幽門螺桿菌）、腫瘤病毒感染。,2 誘發(fā)性腫瘤模型,致癌物的誘癌過程需時較長，成功率多數達不到10

8、0%，腫瘤發(fā)生的潛伏期個體變異較大，不易同時獲得病程或癌塊大小較均一的動物供實驗治療之用，再加之腫瘤細胞的形態(tài)學特征常是多種多樣，且致癌多瘤病毒常誘發(fā)多部位腫瘤，故不常用于藥物篩選，但從病因學角度分析，它與人體腫瘤較為近似，故此模型常用于特定的深入研究。由于該類型腫瘤生長較慢，瘤細胞增殖比率低，倍增時間長，更類似于人腫瘤細胞動力學特征，常用于綜合化療或腫瘤預防方面的研究。,2 誘發(fā)性腫瘤模型,1. 二乙基亞硝胺(DEN)誘發(fā)小

9、鼠肺癌： 采用小鼠皮下注射1％DEN水溶液，每周一次，(每次劑量為56mg/kg體重，總劑量為868mg)。觀察時間為100d左右。此模型誘發(fā)率約40%。若將DEN總劑量增到1176mg時，半年誘發(fā)率可達90％以上。2. 亞胺基偶氮甲苯(OAAT)誘發(fā)小鼠肝癌： 用l％OAAT苯溶液涂于動物兩肩胛間皮膚上，隔日1次，每次2—3滴、一般涂100次。7個月以上誘發(fā)肝腫瘤約55％。3. 黃曲霉素誘發(fā)

10、大鼠肝癌： 在大鼠飼料中加入黃曲霉素，含0.011-0.015ppm，喂養(yǎng)6個月，誘發(fā)率達80％。,舉例：,1. 必須適當選擇：致瘤方法、動物種系、致癌物種類與溶劑、給藥劑量與途徑及觀察時間等盡量簡便可行，有較好的重復性，并有利于與人腫瘤比較。2. 方法和種系應對所用致瘤物敏感。3. 致癌物的劑量應能保證動物存活率較高、誘發(fā)期較短而又可誘發(fā)較高頻率的腫瘤．,注意事項,各類化學致癌劑對動物致癌的特點,芳香胺及

11、偶氮染料類致癌物的特點 ①通常需要長期、大量給藥才能致癌；②腫瘤多發(fā)生于遠隔作用部位的器官如膀胱、肝等；③有明顯的種屬差異；④其本身不是直接致癌物，致癌是由于其某種代謝產物的作用；⑤其致癌作用往往受營養(yǎng)或激素的影響，例如，奶黃僅在以缺少蛋白質和核黃素的飼料喂飼大鼠時才引起肝癌，而且雄性大鼠較敏感，鄰位氨基偶氮甲苯則易起雌性大鼠的肝癌。,,亞硝胺類的致癌特點是： ①致癌性強，小劑量一次給藥即可致癌； ②對多種動物（包

12、括猴、豚鼠等不易誘發(fā)腫瘤的動物）的許多器官（包括食管、腦、鼻竇等不易引起癌的器官）能致癌，甚至可以通過胎盤致癌，如給懷孕大鼠以二乙基亞硝胺（Diethy lnitrosamine，DEN）可比較快地引起仔鼠的神經膠質細胞瘤； ③具有不同結構的亞硝胺有明顯的器官親和性，例如二甲基亞硝胺等對稱的衍生物常引起肝癌，不對稱的亞硝胺如甲基芐基亞硝胺常誘發(fā)食管癌；在大鼠，二丁基亞硝胺能引起膀胱癌，二戊基亞硝胺能誘發(fā)肺癌，而N-甲基-N-硝基-

13、N1-亞硝基胍則能引起胃腸癌。,黃曲霉毒素,黃曲霉毒素的毒性很強，很小劑量（1mg/kg體重）即可使狗、幼齡大鼠、火雞或小鴨致死；其致癌性也極強，最小致癌劑量比亞硝胺還要小數十倍，是已知化學致癌物中作用最強者。它能誘發(fā)多種動物（從魚到猴）的肝癌，也可引起腎、胃及結腸的腺癌，滴入氣管內可引起肺鱗狀細胞癌；注入皮下可引起局部的肉瘤，還有報告認為，它可引起淚腺、乳腺、卵巢等其它部位的腫瘤。,方法：1. 實體瘤移植：

14、 腫瘤細胞皮下接種——7-10d處死荷瘤動物——選擇生長良好、無壞死液化的瘤組織——2-3mm3+生理鹽水或其它營養(yǎng)液——無菌套管針抽吸——接種同種受體動物右前腋窩皮下。2. 腹水瘤移植： 腫瘤細胞皮下接種——7-10d處死荷瘤動物——取腹水——含葡萄糖平衡鹽水稀釋至適當濃度——腹腔注射（腹水瘤）或皮下注射（實體瘤）。,移植性腫瘤模型：,,目前腫瘤化療所應用的大多數藥物，都經動物移植性腫瘤試驗而被發(fā)

15、現，因此它是篩選抗腫瘤新藥中最常用的模型。 其優(yōu)點是接種一定量瘤細胞或無細胞濾液（病毒性腫瘤）后，可以使一群動物帶有同樣的腫瘤，生長速率較一致，個體差異較小，接種存活率近100%。對宿主的影響也類似，易于客觀判斷療效，且可在同種或同品系動物中連續(xù)移植，長期保留供試驗之用，試驗周期一般均較短，,1. 同時接種同樣量的瘤細胞，生長速度較一致，個體差異較小。2. 接種成活率近100%。3. 對宿主影響相類似。4.