缺氧實(shí)驗(yàn)

1、小白鼠實(shí)驗(yàn)性缺氧,武漢科技大學(xué)醫(yī)學(xué)院病理生理學(xué)教研室實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)教師：劉亞昆,實(shí)驗(yàn)?zāi)康?復(fù)制低張性與血液性缺氧的動(dòng)物模型。觀察低張性缺氧時(shí)，不同神經(jīng)機(jī)能狀態(tài)對機(jī)體缺氧耐受性的影響。觀察一氧化碳及亞硝酸鹽中毒對機(jī)體的影響，并了解相關(guān)急救知識。 掌握缺氧的分類及不同類型缺氧的特征。,氧代謝四大環(huán)節(jié)：外界氧氣的含量與肺組織的攝取氧；血液系統(tǒng)的攜帶氧；循環(huán)系統(tǒng)的運(yùn)輸氧；組織細(xì)胞的利用氧；缺氧：由于組織氧的供應(yīng)減少或?qū)ρ醯睦谜系K

2、， 而引起機(jī)體代謝、功能和形態(tài)結(jié)構(gòu)異常變化的病理過程。,理論基礎(chǔ),吸入氣中氧分壓降低 低張性缺氧 肺通氣、換氣功能障礙 靜脈血分流入動(dòng)脈 血液性缺氧 血紅蛋白含量減少、供氧不足 血紅蛋白結(jié)構(gòu)、功能異常 循環(huán)性缺氧 全身循環(huán)

3、功能障礙 局部循環(huán)功能障礙 線粒體功能受抑制用氧障礙 組織性缺氧 呼吸酶合成減少 線粒體損傷,,,,,缺氧的分類,缺氧時(shí)體征及血氧改變,呼吸運(yùn)動(dòng)的變化規(guī)律（頻率、幅度、節(jié)律）；循環(huán)系統(tǒng)的變化規(guī)律（心率、心肌收縮力、

4、 心輸出量）；皮膚粘膜顏色的變化規(guī)律（紫紺、蒼白等）；存活時(shí)間的變化；中樞神經(jīng)系統(tǒng)的變化規(guī)律；血氧變化。,血氧分壓（PO2):溶解于血液的氧分子所產(chǎn)生的張力；血氧容量（CO2max）:100ml血液中的血紅蛋白，在氧分壓為13.3kPa（100mmHg）,溫度為38℃時(shí)，所能結(jié)合氧的最大毫升數(shù)；血氧含量(CO2): 標(biāo)準(zhǔn)狀態(tài)下，100ml血液中實(shí)際含有的氧量（毫升數(shù)）；血

5、氧飽和度(SO2) :Hb的氧飽和度，即Hb結(jié)合氧的百分?jǐn)?shù)，約等于血氧含量和血氧容量的比值。,常用血氧指標(biāo),,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,各種類型缺氧的血氧特點(diǎn),,,,,,,,,,,,,實(shí)驗(yàn)動(dòng)物與藥品器材,成年小鼠，雌雄不拘；鈉石灰、甲酸、濃硫酸、5％亞硝酸鈉、1％亞甲藍(lán)、生理鹽水 ；密封廣口瓶、一氧化碳發(fā)生裝置、刻度吸管、1ml注射器及針頭、酒精燈等。,觀察指標(biāo),動(dòng)物一般狀況 呼吸頻率和深度 存活時(shí)間 皮

6、膚粘膜顏色改變,乏氧性缺氧 （1）選取體重相近的小鼠3只。 分別做 紅（甲）、 藍(lán)（乙）、 無（丙）標(biāo)記 分別腹腔注射 1%咖啡因、 2%烏拉坦、生理鹽水 （注射劑量：0.1ml/10g） （2）安靜15分鐘，放入廣口瓶中（已加鈉石灰少許） 觀察記錄小鼠 缺氧前呼吸次數(shù)、深度和粘膜顏色等指標(biāo) 塞緊瓶塞，開始記錄存活時(shí)間，并每

7、 3min重復(fù)觀察其他指標(biāo)1次，如有其他變化，隨時(shí)記錄，直至動(dòng)物死亡。 （3）動(dòng)物死亡后立即檢測耗氧量，并計(jì)算耗氧率： 耗氧率（R）=總耗氧量（A）/體重（W）/存活時(shí)間（T）,,,實(shí)驗(yàn)方法,血液性缺氧 1. 一氧化碳中毒性缺氧 CO與血紅蛋白的親和力>O2與血紅蛋白的親和力,碳氧血紅蛋白（HbCO）不能與O2結(jié)合，還可抑制紅細(xì)胞的糖酵解，使2，3-DPG生成減少，氧離曲線左

8、移，HbO2中的O2不易釋放。 （1）準(zhǔn)備一氧化碳發(fā)生裝置 將1只小鼠放入廣口瓶中，觀察其正常表現(xiàn)后與一氧化碳發(fā)生裝置連接 用刻度吸管取甲酸3 ml放于試管內(nèi)，沿試管壁緩慢加入濃硫酸2 ml，塞緊瓶口（間斷加熱） 觀察各項(xiàng)指標(biāo)。 （2）當(dāng)小白鼠出現(xiàn)中毒表現(xiàn)（痙攣、跌倒）時(shí)，立即關(guān)閉CO發(fā)生裝置，迅速將小白鼠放入通風(fēng)處進(jìn)行搶救。待小白鼠恢復(fù)正常后，再重復(fù)上述實(shí)驗(yàn)步

9、驟直至死亡，并記錄存活時(shí)間。,實(shí)驗(yàn)方法,,,,2. 亞硝酸鈉中毒性缺氧 亞硝酸鹽可使血紅素中的二價(jià)鐵氧化成三價(jià)鐵，形成高鐵血紅蛋白，與羥基結(jié)合牢固，失去結(jié)合氧的能力。 選取體重相近的小鼠2只，觀察正常指標(biāo) 腹腔注射5％亞硝酸鈉0.3 ml 立即取其中 1只動(dòng)物腹腔內(nèi)注入l％亞甲藍(lán)溶液0.3 ml；另 1只立即注入生理鹽水 0.3 ml 觀察各項(xiàng)指標(biāo)，比較2只小鼠的表現(xiàn)及死亡時(shí)間。,,,,

10、實(shí)驗(yàn)方法,注意事項(xiàng),廣口瓶一定要密閉。進(jìn)行亞硝酸鈉中毒實(shí)驗(yàn)時(shí)，要事先用注射器準(zhǔn)備好搶救藥品，以便及時(shí)解毒。亞甲蘭勿污染環(huán)境。濃硫酸是強(qiáng)腐蝕藥品，加液時(shí)要小心。給小鼠腹腔注射時(shí)，應(yīng)稍靠左下腹，勿損傷肝臟，但也應(yīng)避免將藥液注入腸腔或膀胱。,實(shí)驗(yàn)動(dòng)物和器材,實(shí)驗(yàn)動(dòng)物,小白鼠,●捉拿小鼠的方法,●腹腔注射方法,（一）低張性缺氧動(dòng)物實(shí)驗(yàn) 【基本體征】,?注射烏拉坦的小白鼠對缺氧的耐受性最強(qiáng)。,?注射咖啡因的小白鼠對缺氧的耐受性最差。,?