劉姝潁梅毒實驗室檢測工作概況和要求

1、梅毒實驗室檢測 工作概況和要求,安徽省皮膚病防治所 劉姝穎 2015年11月,主要內(nèi)容,梅毒實驗室檢測概述重要性常用檢測方法工作要求現(xiàn)場督導(dǎo)發(fā)現(xiàn)的問題梅毒實驗室室間質(zhì)評活動,監(jiān)測性病病種,梅毒淋病生殖道沙眼衣原體感染尖銳濕疣生殖器皰疹,性病實驗室在性病防治中的作用,效果評價,臨床服務(wù),疫情監(jiān)測,科學(xué)研究,實驗室診斷,,,,,第十一條 省、市和縣級疾病預(yù)防控制機(jī)構(gòu)職責(zé)組

2、織開展本行政區(qū)域性病實驗室質(zhì)量管理第十三條 開展性病診療業(yè)務(wù)的醫(yī)療機(jī)構(gòu)職責(zé)開展實驗室檢測質(zhì)量控制,5,,《性病防治管理辦法》,梅毒控制相關(guān)政策,衛(wèi)生部于2010年6月3日下發(fā)了關(guān)于《中國預(yù)防與控制梅毒規(guī)劃（2010-2020年）》衛(wèi)生部2011年2月12日下發(fā)《預(yù)防艾滋病、梅毒和乙肝母嬰傳播工作實施方案》國務(wù)院2012年1月13日《中國預(yù)防控制艾滋病五年行動計劃（21011-2015年）》,梅毒控制主要措施：提高梅毒實驗

3、室檢測質(zhì)量加強(qiáng)梅毒篩查力度,主要內(nèi)容,梅毒實驗室檢測概述重要性常用檢測方法工作要求現(xiàn)場督導(dǎo)發(fā)現(xiàn)的問題梅毒實驗室室間質(zhì)評活動,常用梅毒實驗室檢測方法,病原學(xué)檢測血清學(xué)檢測,病原學(xué)檢測,原理：一期、二期梅毒時，取硬下疳、扁平濕疣、黏膜斑等皮損部位組織液或淋巴結(jié)穿刺術(shù)得到的組織液，在暗視野顯微鏡下，光線從聚光器的邊緣斜射到涂片上的梅毒螺旋體而發(fā)出亮光，從而可根據(jù)其特殊形態(tài)和運(yùn)動方式進(jìn)行檢測。方法：（1）暗視顯微鏡檢查 （2

4、）鍍銀染色法 （3）核酸檢測意義：螺旋體檢查是診斷早期現(xiàn)癥梅毒的最佳方法，對于患者的早期診斷、及時治療、預(yù)后和盡早切斷傳染源都有十分重要的意義。如未見到梅毒螺旋體，并不能排除患梅毒的可能性。,梅毒血清學(xué)檢測方法,(1) 非梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗 （非特異性梅毒抗體）(2) 梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗 （特異性梅毒抗體）兩類方法。,,非梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗原理,梅毒螺旋體一旦感染人體，宿主可對螺旋體表面的脂質(zhì)

5、作出免疫應(yīng)答，產(chǎn)生抗類脂抗原的抗體（非特異性抗體）未經(jīng)治療的病人，其血清內(nèi)的非特異性抗體可長期存在。經(jīng)正規(guī)治療后，非特異性抗體可以逐漸減少滴度至轉(zhuǎn)為陰性。方法包括： （1）快速血漿反應(yīng)素環(huán)狀卡片試驗 (RPR) （2）甲苯胺紅不加熱血清試驗（TRUST）等,,非梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗臨床意義,早期梅毒（一期、二期）經(jīng)足量規(guī)則抗梅毒治療后3個月， RPR/TRUST試驗抗體滴度下降2個稀釋度，6個月下降4個稀釋度。 一期梅

6、毒1年后轉(zhuǎn)為陰性 二期梅毒2年后轉(zhuǎn)為陰性。 晚期梅毒 治療后血清滴度下降緩慢，2年后約50%病人血清反應(yīng)仍為陽性。,,非梅毒螺旋體抗原血清試驗臨床意義,非梅毒螺旋體抗原血清試驗方法簡單、快速、敏感性和特異性較好。可作為梅毒篩查試驗。因治療后血清滴度可下降并陰性，故（1）可作為療效觀察、判愈、復(fù)發(fā)或再感染的指征；（2）結(jié)合梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗鑒別梅毒現(xiàn)癥感染和既往感染VDRL試驗用于神經(jīng)梅毒腦脊液檢測特異性高，檢測陽性可以作

7、為神經(jīng)梅毒確診依據(jù)，但敏感性較低，即檢測陰性不能排除神經(jīng)梅毒。,梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗原理,抗原為梅毒螺旋體特異蛋白（包括螺旋體重組特異抗原），檢測梅毒患者血中特異性抗梅毒螺旋體抗原的抗體。感染梅毒螺旋體后，一旦梅毒螺旋體抗體試驗呈陽性，則患者終身陽性。,梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗方法,梅毒螺旋體顆粒凝集試驗 (TPPA) 梅毒螺旋體血球凝集試驗 (TPHA) 梅毒酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA） 化學(xué)發(fā)光免疫分析法（CLI

8、A） 梅毒免疫層析法-梅毒快速檢測 (RT) 熒光螺旋體抗體吸收試驗（FTA-ABS）梅毒螺旋體蛋白印跡試驗（WB）,梅毒螺旋體抗原血清試驗臨床意義,作為非梅毒螺旋體抗原血清試驗(如RPR等)初篩陽性標(biāo)本的確證試驗，排除RPR 假陽性。不能區(qū)分既往感染和現(xiàn)癥感染，應(yīng)結(jié)合非梅毒螺旋體抗原血清試驗結(jié)果進(jìn)行診斷。不能作為療效觀察的指標(biāo)。,梅毒血清學(xué)試驗結(jié)果解釋（梅毒臨床診斷參考依據(jù)）,17,*該結(jié)果解釋不適用于胎傳梅毒、神經(jīng)梅毒

9、,梅毒IgM抗體（TP-IgM）,IgM抗體的產(chǎn)生是感染后的早期體液免疫應(yīng)答反應(yīng)。IgM分子比較大，所以不能通過胎盤屏障。因此若在新生兒血中檢測到IgM抗體是先天梅毒的診斷依據(jù)。目前已有商品化的TP-IgM檢測試劑盒，檢查到IgM抗體可作為對先天梅毒臨床診斷的依據(jù)，其特異性較高，但敏感性較低。因此，IgM陰性，不能排除先天梅毒感染。,18,梅毒實驗室檢測基本策略--血清學(xué)檢測,,,19,非梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗,梅毒螺旋體抗原血清學(xué)

10、試驗,,排除試驗假陽性確證梅毒螺旋體現(xiàn)癥感染,,排除治愈的既往感染者確證梅毒螺旋體現(xiàn)癥感染,？RPR：初篩試驗 TPPA：確證試驗,20,,,,21,陽性,主要內(nèi)容,梅毒實驗室檢測概述重要性常用檢測方法工作要求現(xiàn)場督導(dǎo)發(fā)現(xiàn)的問題梅毒實驗室室間質(zhì)評活動,梅毒實驗室檢測基本要求,一、人員 檢測技術(shù)人員需經(jīng)過上崗培訓(xùn)。接受上崗培訓(xùn)內(nèi)容應(yīng)包括：梅毒檢測相關(guān)基礎(chǔ)知識、梅毒實驗室檢測技術(shù)基本實驗操作要求、結(jié)果解讀及

11、臨床意義、質(zhì)量保證與生物安全等。二、試劑 常規(guī)血清學(xué)檢測應(yīng)采用經(jīng)國家食品藥品監(jiān)督管理局注冊批準(zhǔn)的試劑。因不同廠家生產(chǎn)的同一種試劑的敏感性和特異性存在一定的差異，建議選擇臨床質(zhì)量評估敏感性和特異性高的試劑。所有試劑須嚴(yán)格按要求妥善保存，并控制在有效期內(nèi)使用。,23,梅毒實驗室檢測基本要求,三、設(shè)備及環(huán)境 實驗室應(yīng)根據(jù)開展的方法配備基本的儀器設(shè)備,24,不同方法所需主要儀器設(shè)備,2014年全國梅毒診斷試劑臨床質(zhì)量評估結(jié)果

12、(非梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗),試劑簡稱 敏感性(%) 特異性(%) 上?？迫A 97.78 99.55 北京金豪 97.78 99.55 上海榮盛 96.67 100.00

13、 廈門英科 95.56 98.18 北京萬泰 91.11 98.64,2014年全國梅毒診斷試劑臨床質(zhì)量評估結(jié)果(梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗-ELISA),試劑簡稱 敏感性(%) 特異性(%)

14、 北京華大 100.00 100.00 北京萬泰 100.00 100.00 北京現(xiàn)代 100.00

15、 100.00 北京金豪 100.00 99.48 珠海麗珠 100.00 98.95 濰坊三維

16、 100.00 83.25 上?？迫A 99.1 100.00 北京科衛(wèi) 99.1 100.00

17、 廈門英科 98.29 100.00 北京科美(化學(xué)發(fā)光) 100.00 100.00,2014年全國梅毒診斷試劑臨床質(zhì)量評估結(jié)果(梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗-免疫層析法),試劑簡稱 敏感性(%) 特異性(%)

18、 杭州艾博 99.15 100.00 北京藍(lán)十字 99.74 92.15 Determin 99.15 98.95

19、 廣州萬孚 98.29 100.00 廈門英科 98.29 98.43 北京萬泰 97.74 90.58,主要內(nèi)容,梅毒實驗室檢測概述重要性常用

20、檢測方法工作要求現(xiàn)場督導(dǎo)發(fā)現(xiàn)的問題梅毒實驗室室間質(zhì)評活動,現(xiàn)場核查發(fā)現(xiàn)的不足與問題,使用不符合要求的實驗室檢測方法進(jìn)行診斷實驗室開展項目不全，未掌握各種試驗的適應(yīng)癥，不具備診斷條件部分醫(yī)院無開展TRUST試驗的梅毒水平旋轉(zhuǎn)儀，或無開展TPPA的微量振蕩器實驗室檢測方法標(biāo)注有誤或不規(guī)范,現(xiàn)場核查發(fā)現(xiàn)的不足與問題,部分實驗室缺乏原始記錄或登記不規(guī)范而無法查找核實報告病例的相關(guān)數(shù)據(jù)試劑來源多，質(zhì)量難以保障多數(shù)醫(yī)療機(jī)構(gòu)對儀器未定

21、期校準(zhǔn)和記錄部分檢驗人員培訓(xùn)不足，操作臺無標(biāo)準(zhǔn)作業(yè)指導(dǎo)書實驗室檢驗人員與臨床醫(yī)生、疫情管理人員溝通不夠,主要建議,制定性病實驗室檢測的作業(yè)指導(dǎo)書，放置在操作臺加強(qiáng)儀器設(shè)備的校準(zhǔn)與維護(hù)，確保正確的運(yùn)轉(zhuǎn)對檢驗人員開展培訓(xùn),加強(qiáng)對性病檢測方法和臨床結(jié)果解釋的培訓(xùn)規(guī)范實驗室檢測方法規(guī)范完善檢測結(jié)果信息登記,檢測結(jié)果登記示例,主要內(nèi)容,梅毒實驗室檢測概述現(xiàn)場督導(dǎo)發(fā)現(xiàn)的問題梅毒實驗室室間質(zhì)評活動開展現(xiàn)況申請流程,梅毒實驗室室間質(zhì)

22、評活動,《關(guān)于開展梅毒血清學(xué)實驗室室間質(zhì)量評價工作的通知》(衛(wèi)辦疾控〔2011〕186號)要求：自2011年始在全省范圍內(nèi)開展梅毒血清學(xué)實驗室室間質(zhì)量評價 ，各地認(rèn)真組織轄區(qū)內(nèi)縣（區(qū)）級以上醫(yī)療機(jī)構(gòu)參加全省統(tǒng)一組織的每年兩次的室間質(zhì)評,督促室間質(zhì)評不合格的醫(yī)療保健機(jī)構(gòu)實驗室進(jìn)行限期整改,梅毒實驗室室間質(zhì)評活動,具體參評項目TP（非）、TP（特TPPA）、TP（特ELISA）、TP(ELISA-S/CO值）、TP(特除ELISA、TPPA

23、）。 省臨床檢驗中心（www.ahccl.org）負(fù)責(zé)統(tǒng)一發(fā)放全省質(zhì)控標(biāo)本（上下半年各一次）省皮膚病防治所負(fù)責(zé)結(jié)果的收集、分析、匯總、上報及反饋工作。,首次室間質(zhì)評活動,2011年11月首次梅毒血清學(xué)室間質(zhì)評，全省共129家二級以上醫(yī)療機(jī)構(gòu)參加梅毒血清學(xué)室間質(zhì)評活動，81家合格，合格率62.79%2011年我省五個國家級性病監(jiān)測點(diǎn)的11家醫(yī)療機(jī)構(gòu)參加全國性病實驗室室間質(zhì)量評價活動，7家合格，合格率63.63%,2014年

24、室間質(zhì)評,全省梅毒實驗室室間質(zhì)評,219家二級以上醫(yī)療機(jī)構(gòu)參加，191家醫(yī)療機(jī)構(gòu)合格,合格率 87.21%。國家級性病監(jiān)測點(diǎn)的十二家醫(yī)療機(jī)構(gòu)參加全國性病實驗室室間質(zhì)量評價，參與率為100%，梅毒合格率91.67%、衣原體合格率100%，淋球菌83.33%,2014年我省梅毒室間質(zhì)評參加率,2014年參加率指標(biāo)：85 %,,85 %,2014年我省梅毒室間質(zhì)評合格率,2014年合格率指標(biāo)：95%,2015年室間質(zhì)評,省級梅毒實驗室室間質(zhì)

25、評, 208家二級以上醫(yī)療機(jī)構(gòu)參加，183家醫(yī)療機(jī)構(gòu)合格, 合格率為87.98%國家級性病監(jiān)測點(diǎn)的十二家醫(yī)療機(jī)構(gòu)參加全國質(zhì)評，參與率100%，梅毒、衣原體合格率100%，淋球菌合格率66.67%，淋球菌距離國家提出合格率達(dá)85%還有很大差距,主要內(nèi)容,梅毒實驗室檢測概述現(xiàn)場督導(dǎo)發(fā)現(xiàn)的問題梅毒實驗室室間質(zhì)評活動開展現(xiàn)況申請流程,安徽省臨床檢驗中心網(wǎng)站www.ahccl.org→申請參控流程,1、賬戶申請,,安徽省臨床檢驗中心網(wǎng)站

26、→參控實驗室登錄窗口,,信息維護(hù) 使用臨檢中心分配賬號及密碼登錄“參控端”，首次登錄需維護(hù)實驗室基礎(chǔ)信息，注意事項：所有事項務(wù)必仔細(xì)填寫，建議填寫兩個不同手機(jī)號，活動信息多以短信發(fā)送。,按照全省統(tǒng)一安排及實驗室需求，本年度9~10月份申請次年度活動，例如2015年9~10月底申請2016年安徽省EQA活動?；顒油ㄖ獙⑼ㄟ^信件、短信等方式通知參控實驗室。,2、項目申報,專業(yè)申報注意事項：