高同型半胱氨

1、1,同型半胱氨酸的檢測及臨床應用,2024/3/5,2,前 言,同型半胱氨酸（homocysteine, Hcy）是一種人體內的含硫氨基酸，為蛋氨酸和半胱氨酸代謝過程中的重要中間產物。新熱點:許多學者認為血液Hcy升高已成為動脈粥樣硬化發(fā)生的一個獨立危險因子，也成為基礎醫(yī)學和臨床醫(yī)學研究的新熱點。新理念:伴有血漿Hcy升高(>10umol/L)的原發(fā)性高血壓定義為H型高血壓。,2,2024/3/5,3,,,同型半胱氨酸（H

2、cy）能夠讓四分之三的高血壓患者腦卒中死亡風險增加12倍。,3,2024/3/5,4,一、Hcy的存在形式,有研究發(fā)現(xiàn)在正常人和高Hcy血癥患者血漿中，Hcy大部分（70％）是與蛋白質結合，血漿中與Hcy結合的是白蛋白。Hcy在血液中的存在方式: 部分以同型半胱氨酸-半胱氨酸二硫化物存在，微量以還原型同型半胱氨酸存在，大部分通過二硫鍵與白蛋白結合而存在。,4,2024/3/5,5,二、影響血液Hcy水平的因素,1、遺傳因素： 

3、; ①C667T點突變可引起Hcy升高。 ②CBS基因多態(tài)性。 ③蛋氨酸合成酶基因多態(tài)性。,5,2024/3/5,6,2、性別與年齡： 國內外不少研究發(fā)現(xiàn)，Hcy隨年齡增長而升高，而且男性>女性。女性在絕經前的水平較低，絕經后顯著升高，認為其機制可能與雌激素水平的變化有關。,6,2024/3/5,7,3、營養(yǎng)因素：   ①VitB6、VitB12、葉酸是Hcy代謝輔酶，它們的水平與

4、Hcy水平呈負相關，攝入不足時，上述三個酶活性下降，則Hcy升高。 ②飲酒：長期飲酒可引起肝細胞蛋氨酸合成酶活性下降，從而造成Hcy血癥。 ③飲食中蛋氨酸含量過高：有報道認為高動物蛋白、低植物蛋白飲食可能是Hcy血癥的危險因素之一。,7,2024/3/5,8,三、同型半胱氨酸致病機理,1、內皮毒性作用： Hcy可引起內皮細胞損傷，尤其合并高血壓時更易受損，并且破壞血管壁彈力層和膠原纖維。2、刺激血管平滑肌細胞增

5、生： Hcy可直接誘導血管平滑肌細胞增殖。,8,2024/3/5,9,3、致血栓作用： Hcy可促進血栓調節(jié)因子的表達，激活蛋白C和凝血因子Ⅻ、Ⅴ，血小板內前列腺素合成增加，從而促進血小板粘附和聚集。,9,2024/3/5,10,Hcy通過多種途徑損傷血管，它損傷血管內皮細胞同時刺激血管平滑肌細胞生長，二者導致的損傷阻塞血流通路；Hcy還破壞正常凝血機制；增加血栓形成引起心臟病發(fā)作及中風 。,10,2024/3/5,11,4、

6、脂肪、糖、蛋白代謝紊亂：　 Hcy可促進脂質沉積于動脈壁，泡沫細胞增加，還可改變動脈壁糖蛋白分子纖維化結構，促進斑塊鈣化。,11,2024/3/5,12,5、干擾谷胱甘肽的合成 ： 谷胱甘肽是一種重要的高氧化劑，它能防止很多細胞成分的氧化互相作用，對血管產生保護作用。Hcy干擾谷胱甘肽的合成，從而對機體造成危害 。,12,2024/3/5,13,6、影響體內的轉甲基化反應 ： Hcy濃度的升高會影響體內許多物質的甲基化過程

7、，如核酸（DNA和RNA）、蛋白質、髓磷脂、多糖、膽堿和兒茶酚胺類的甲基化；甲基化能力的降低影響細胞的發(fā)育及分化，這可能是Hcy致病的關鍵因素。,13,2024/3/5,14,四、Hcy的測定方法,同位素法：該方法靈敏度高，特異性強，但操作繁瑣且有放射污染，未能推廣使用。色譜法：靈敏度、特異性好，但儀器價格昂貴而不能推廣。 熒光偏振免疫測定：此法需要專門的熒光偏光免疫檢測儀。,14,2024/3/5,15,ELISA：對儀器要求不高

8、，易普及，但結果準確性相對較差。放射免疫法：結果準確，但有放射性污染，很少使用。循環(huán)酶法：快速、簡便、靈敏度高?？缮先詣由治鰞x，適用大批標本，臨床應用廣泛。,15,2024/3/5,16,Hcy循環(huán)酶法實驗參數(shù)的設計,實驗參數(shù)根據(jù)分析儀的不同有所差異，可要求試劑供應商提供相應的實驗參數(shù)。下面列舉OLYMPUS系列的實驗參數(shù)： Sample Volume（樣品體積）： 9ul R1 Volume

9、（試劑1體積）：167ul R2 Volume （試劑2體積）： 45ul Measure Wave1（主波長） ：340nm Measure Wave2（副波長） ：700nm,16,2024/3/5,17,METHOD （反應類型） ： END Method Point（反應點）： 20~27Reagent OD Limit（吸光度范圍）：-2.0~2.5Dyn

10、amic Range (反應范圍)： 3~50Calibration Type （定標數(shù)）： 1點Unit （單位）： umol/L,17,2024/3/5,18,五、同型半胱氨酸的臨床應用,18,2024/3/5,19,1、心血管病防治,（1）HCY升高與動脈粥樣硬化(AS)的關系： 1969年就曾有人從尸檢中發(fā)現(xiàn)2例血漿Hcy濃度超過正常人幾十倍的病兒存在廣泛

11、的動脈粥樣硬化和動脈血栓。臨床上發(fā)現(xiàn)高胱氨酸尿癥病人早年多因全身動脈粥樣硬化和血栓形成死于腦梗塞和心肌梗塞，這與血中Hcy升高有關。,19,2024/3/5,20,有學者在動物實驗中觀察到注射Hcy后引起高Hcy血癥，2—3個月后發(fā)生動脈粥樣硬化 。認為高Hcy血癥是發(fā)生動脈粥樣硬化的獨立危險因素。,20,2024/3/5,21,（3）Hcy水平與心血管疾病的危險性  通過血管內超聲觀察AS斑塊情況 ，觀察到血漿HCY

12、 濃度 8umol/L時，斑塊明顯增大（0.27-1.04，p<0.001）,表明與冠狀動脈病變程度呈正相關。,* Mayer E L, Robinson K, Jacobsen D W. et al .Low plasm homocyseine levels predic reduced atheroma burden in patient undergoing coronary intervention:

13、Evideence from intravascular ultrsund.J Am Coll Cardiol,1995,25(special issum):81 A.,24,2024/3/5,22,,,惠汝太教授等的研究結果顯示： 冠狀動脈病變支數(shù)隨著血漿Hcy濃度增高而增加。,25,2024/3/5,23,有研究表明： 輕度、中度Hcy水平升高可使心血管疾病死亡危險性增加4 ~6倍，血漿總Hcy水平每升

14、高5 μmol/L則CHD危險性男性增加60%，女性增加80%。,* Arnesen E,Refsum H,Bonaa K H,et al.Serum total homocysteine and coronary heart disease［J］. Int J Epidemiol,1995,24(4):704-709.,26,2024/3/5,24,美國專家在Framingham心臟病研究項目中發(fā)現(xiàn)，Hcy與心力衰竭的相關性更為密切

15、，對尚未出現(xiàn)心臟病癥狀者來說，Hcy升高者患心力衰竭的危險可加倍，婦女的危險可增加3倍。,27,2024/3/5,25,2、HCY與神經系統(tǒng)疾病,腦血管病是目前嚴重危害人類健康的主要疾病，近年來隨著分子生物學的深入發(fā)展，Hcy在腦卒中的作用日益受到重視，普遍認為血漿Hcy>15umol／L為高Hcy血癥，普通人群血漿Hey水平升高者只有不到5％ ，而在腦卒中患者中可達30~40％ 。,28,2024/3/5,26,美國研究表明：

16、 Hcy的升高是與中風有重要關聯(lián)的危險因子。美國最新的數(shù)據(jù)顯示中年后期男性中風發(fā)病率，處于55-64這個年齡段的男性相對于45-54年齡段的男性而言，前者患中風的幾率是后者的三倍?！吨酗L和腦血管疾病》雜志2008；17；165-168“美國中年后期的男性發(fā)生中風的相關因子急劇增加”,29,2024/3/5,27,惠汝太教授等的研究結果顯示:隨著Hcy濃度增高，腦中風危險度增加1.87倍。,30,2024/3/5,28,高HCY是

17、造成老年癡呆癥與帕金森的重要因素：弗明漢醫(yī)學研究中心對1092例（>76歲）追蹤調查8年Hcy值，結果：Hcy超出14μmol/L，患老年性癡呆的危險性增加1.8倍，患多異古怪癡呆發(fā)生率增加1.6倍。英國OPTIMA項目研究發(fā)現(xiàn)： Hcy水平大于11.2μmol/L的病人，三年后隨訪，發(fā)現(xiàn)他們大腦顳葉（包括海馬）快速萎縮。,31,2024/3/5,29,3、糖尿病及并發(fā)癥防治,國內外大量研究結果顯示，血漿Hcy水平可作為2-型

18、糖尿病患者患大血管疾病的獨立危險因素。監(jiān)測糖尿病患者Hcy水平有利于對其預后的評估。Hcy升高在糖尿病伴腎臟、視網膜及血管并發(fā)癥的患者更為嚴重高Hcy血癥也能促進糖尿病微血管并發(fā)癥的發(fā)生與發(fā)展。,32,2024/3/5,30,4、CRF并發(fā)癥防治,慢性腎功能衰竭（CRF）患者普遍有高Hcy血癥，其發(fā)生率是正常人33倍。尿毒癥時一方面肝臟蛋氨酸腺苷轉移酶活性升高，導致S-腺苷蛋氨酸水平升高；另一方面腎功能下降使Hcy代謝的必需產物—

19、—絲氨酸合成減少，導致Hcy代謝受抑制引起Hcy的堆積。,33,2024/3/5,31,5、肺血栓栓塞癥防治,研究表明，高Hcy血癥（>20μmol/L）使得深靜脈血栓的危險性明顯增大，高Hcy血癥可使深靜脈血栓發(fā)生率增加4倍。高Hcy是我國漢族人群肺血栓栓塞癥（PTE）發(fā)病的一個獨立的危險因子，降低Hcy可降低國人靜脈血栓栓塞癥（VTE）的危險。,34,2024/3/5,32,6、預測骨折風險,美國和荷蘭的流行病學研究結果顯示

20、：高Hcy的人容易骨折，高Hcy組與低Hcy組相比，男性的骨折風險為后者的4倍，女性為1.9倍。研究還顯示：老年人骨折中19%是由高Hcy引起的。Hcy阻礙骨膠原纖維狀蛋白質形成網狀結構的作用可能就是高Hcy者容易骨折的原因。,35,2024/3/5,33,7、診斷與監(jiān)測肝損傷,研究結果顯示：血漿Hcy濃度在急性肝病和慢性肝病患者間差異有顯著性；血漿Hcy濃度對于慢性肝損傷的敏感性為91%，特異性為89%。以病理組織切片對照敏感性

21、為94%，特異性為89%。血漿Hcy濃度檢測還可應用于對普通人群慢性肝病的篩選。,36,2024/3/5,34,8、優(yōu)生優(yōu)育與母嬰健康,流行病學研究報導：血中Hcy值高的婦女容易產生妊娠并發(fā)癥 (32%)；早產 (38%)；新生兒體重減低 (> 99%)。孕婦檢測Hcy對防治妊娠并發(fā)癥與優(yōu)生優(yōu)育（預防早產、流產、新生兒體重減低、胎兒神經管畸型等）具有重要意義。,37,2024/3/5,35,9、腫瘤防治,有研究發(fā)現(xiàn)：未服抗葉酸

22、藥物的乳腺癌、卵巢癌和胰腺癌中有許多患者的血清Hcy升高。Ueland和Refsum在白血病患者的研究認為Hcy升高是因腫瘤細胞的快速增殖所致。許多惡性腫瘤細胞有對蛋氨酸的依賴性，蛋氨酸的依賴或高Hcy血癥可能是惡性腫瘤一種表型的表達。,38,2024/3/5,36,Lily L等在一組未用藥的腫瘤患者中將Hcy濃度與主要的腫瘤標志物進行了比較，發(fā)現(xiàn)Hcy血清濃度的變化與血清腫瘤標志物CA125、CA15-3、CA19-9及CEA的

23、變化是平行的。這提示血清Hcy與腫瘤標記物一樣反應腫瘤細胞的活性或腫瘤細胞的快速增生狀況。,39,2024/3/5,37,什么樣的人需要做HCY檢查？,①已有CHD、腦血管病或周圍AS病者；②有高血壓、糖尿病、肥胖、吸煙者；③有CHD或AS家族史者，尤其是直系親屬中有早發(fā)病或早病死者；④有黃瘤或黃疣者； ⑤有家族性高脂血癥者；⑥40歲以上男性及絕經期后女性。,40,2024/3/5,38,六、血標本采集注意事項,樣品為

24、血清或血漿，空腹 8h以上，采血后1h之內離心分離, 置干凈試管中保存。樣本穩(wěn)定性： 室溫 ：2-7天；2-8℃ ：14天； -20℃ ：幾年。樣品不宜反復凍融 。血紅蛋白,膽紅素,甘油三脂等對 Hcy 結果干擾小。,41,2024/3/5,39,七、Hcy參考值,空腹血漿總Hcy水平正常值為5~15umol/L理想值<10umol/L 高于15umol/L被認為是高Hcy血癥 將高Hcy分為輕、中、重度，其空腹

25、血漿濃度分別為15~30、31~100及大于100umol/L,42,2024/3/5,40,八、高Hcy血癥的預防及治療,可預防及治療高Hcy血癥的藥物：葉酸維生素B6維生素B12甜菜堿依那普利葉酸片（依葉片）依那普利葉酸片——是治療H型高血壓和我國預防腦卒中的新思路。,43,2024/3/5,41,結 語,Hcy作為獨立的心血管風險指標已被廣泛接受，中國高血壓人群75%為H型高血壓。高Hcy是腦卒中的獨立危險因素。