人凝血因子分離純化工藝分析

1、人凝血因子ⅷ的分離純化工藝,,制作人：龍益如,班級：144092,,,,,The Preparation Procedure of Human Coagulation Factor ⅷ,1,,,,,2,,,F Ⅷ,F Ⅸ,,,,,3,人凝血因子Ⅷ是人血漿中一種非常重要的凝血因子，其缺失或缺乏會(huì)引起不同程度的甲型血友病——一種連鎖隱性遺傳的出血性疾病，嚴(yán)重時(shí)甚至?xí)＜盎颊叩纳?。甲型血友病是一種終生性疾病，目前仍沒有根治的方法，只能通過輸

2、注產(chǎn)品進(jìn)行替代性治療。,,,,,4,,,,,5,,原材料：人新鮮冰凍血漿主要雜質(zhì)：人纖維蛋白原、人纖維結(jié)合蛋白、白蛋白、其他凝血因子等,,,,,6,關(guān)鍵步驟：,,,,,7,冷沉淀中所含雜質(zhì)：,,,,,8,2. 乙酸緩沖液調(diào)節(jié)pH —— 等電點(diǎn)沉淀法調(diào)節(jié)溫度為15℃，pH6.3左右去除等電點(diǎn)較高的人纖維白蛋白和人纖維結(jié)合蛋白,,,,,9,3.Al(OH)3 吸附 —— 吸附分離法 （負(fù)吸附）使用Al(OH)3 作為吸附劑

3、，通過預(yù)實(shí)驗(yàn)確定鋁膠含量為12%。由于該吸附劑為兩性離子，在pH7.1（預(yù)實(shí)驗(yàn)確定）左右時(shí)帶正電，易于吸附小分子酸性蛋白，去除F Ⅸ、F Ⅱ、F Ⅶ、F Ⅹ 等,,,,,10,4. DEAE 650M 弱陰離子交換凝膠 —— 離子交換層析固定層析過程為pH7.0,通過調(diào)節(jié)緩沖液鹽濃度來改變蛋白結(jié)合能力，進(jìn)行洗脫。梯度洗脫方案：,,,,,11,,,,,12,5. 病毒滅活（1）S/D處理法 滅活脂包膜病毒（2）100℃ 30