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文檔簡(jiǎn)介
1、腎臟病理診斷在腎臟病學(xué)中的重要性,構(gòu)成完整的腎臟疾病診斷顯示病變的活動(dòng)指標(biāo)協(xié)助臨床制定治療方案協(xié)助臨床判斷治療效果協(xié)助臨床判斷預(yù)后,目 的,1. 了解腎臟病理知識(shí)2. 根據(jù)臨床資料推斷病理改變,基礎(chǔ)篇—閱片,,Anatomy of Kidney,Note the positions of GlomerulusLoop of HenleyPCT, DCT, CTCortex, Medulla, Pelvis.,
2、腎活檢病理的研究方法,光學(xué)顯微鏡檢查 半薄切片和多種特殊染色方法免疫病理學(xué)方法 免疫熒光、免疫組織化學(xué) 電子顯微鏡檢查 透射電鏡、掃描電鏡、免疫電鏡,要求:切片?。?μm), 有特殊染色。 腎小球數(shù)一般≧10個(gè)/切片。觀察:,光鏡,HE(蘇木素伊紅染色):觀察細(xì)胞核,分辨細(xì)胞種類,提示GBM厚度。PAS(過碘酸雪夫氏染色):觀察GBM
3、、TBM及細(xì)胞外基質(zhì)(ECM), 但系膜基質(zhì)(MM)染得比實(shí)際寬,且GBM很少用該染色。PASM(六胺銀):GBM為主,MM也很清楚(膠原Ⅳ, LN,F(xiàn)N 呈黑色)。Masson:觀察嗜復(fù)紅蛋白(多提示免疫復(fù)合物),間質(zhì)纖維化(膠原纖維均呈綠色,GBM、TBM、MM也為綠色,細(xì)胞核、免疫復(fù)合物、血栓、血漿成分均呈紅色)。PASM+Masson:,PAS,Masson,HE,PASM,原理:一種抗體只能與相應(yīng)的一種抗原特異性結(jié)
4、合將熒光素標(biāo)記在已知抗體上,用標(biāo)有熒光素的已 知抗體與待檢腎組織反應(yīng)若腎組織中有與已知抗體相應(yīng)的抗原存在,則兩 者結(jié)合為抗原-已知抗體-熒光素免疫復(fù)合物該復(fù)合物在具有紫外光源的熒光顯微鏡下觀察, 作為指示物的熒光素被激發(fā)放出鮮艷的熒光,免疫熒光,要求:抗體和補(bǔ)體齊全,標(biāo)本抗原性保存良好特點(diǎn):快而敏感,但不易保存觀察: (1)何種抗體沉積: 球蛋白類:IgG、IgA、IgM:以確
5、定參與免疫反應(yīng)的球蛋白種類 補(bǔ)體類:C3、C1q 或C4 :以證實(shí)免疫反應(yīng)過程中補(bǔ)體被激活的途 徑,即經(jīng)典(C1q)或旁路途徑(C3) 血漿蛋白類:FRA(纖維蛋白原) 特異性抗原:如HBsAg、HBcAg、k、入 等,免疫熒光,(2)沉積部位:Mes、GCW、TBM、A、BBM(3)形態(tài):線狀、顆粒狀、團(tuán)塊狀(4)強(qiáng)度( ±
6、; ~ ++++) ± 高倍鏡下隱約可見 + 低倍鏡隱約可見,高倍鏡下可見 ++ 低倍鏡可見,高倍鏡下清晰 +++ 低倍鏡清晰,高
7、倍鏡下耀眼 ++++ 低倍鏡耀眼,高倍鏡下刺眼,免疫熒光,必要性:1、在光鏡病理改變輕微的腎臟疾病,EM檢查 非常必要2、在伴特殊有形結(jié)構(gòu)的腎臟疾病診斷中,EM具 有非常重要的價(jià)值優(yōu)點(diǎn):定位準(zhǔn)確缺點(diǎn):視野較小,觀察局限、片面,電鏡,觀察:1、足突是否融合-廣泛性、部分、節(jié)段性2、基底膜的變化3、電子致密物的沉積部位與形狀、密度
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