腫瘤檢測的臨床應

1、腫瘤標志物檢測的臨床應用,檢驗科，賀明盟,腫瘤標志物檢測的臨床應用,一，腫瘤發(fā)病的情況二，腫瘤檢查的方法 三，腫瘤的實驗室檢測,世界癌癥發(fā)病率,一項最近研究發(fā)現(xiàn)，到2030年，世界范圍內的癌病發(fā)病率將增加75%，而貧窮國家將增長90%。這項5月31號發(fā)表在《柳葉刀：腫瘤學》網絡版的報告指出，在某些發(fā)展中國家，宮頸癌、胃癌等某些癌癥的發(fā)病率看起來會下降，但是其他一些與“西式生活方式”相關的癌癥的發(fā)病率將會有較大增加，比如，乳腺

2、癌、前列腺癌、直腸癌。,世界腫瘤情況,在人類發(fā)展指數較低的國家(主要是撒哈拉以南的非洲國家)，感染類癌癥(尤其是宮頸癌)，以及肝癌、胃癌、卡波西肉瘤發(fā)病率較高。在人類發(fā)展指數高的國家(比如澳大利亞、巴西、俄羅斯、英國)，與吸煙、生殖系統(tǒng)風險因素、肥胖、飲食習慣相關的癌癥，如肺癌、乳腺癌、前列腺癌、直腸癌，發(fā)病率較高。該研究的領導者，世界癌癥研究機構的弗萊迪.布雷博士(Dr. Freddie Bray)及同事指出，到2030年，人類發(fā)展指

3、數較低的國家的癌癥發(fā)病率將增加93%，而中等發(fā)展國家(如南非、中國、印度)將增長78%。,一、我國惡性腫瘤發(fā)病率與死亡率,2012年全國腫瘤登記中心收到全國104個腫瘤登記處2009年的腫瘤登記數據。通過對上報數據的綜合審核，有72個登記處的數據入選，以反映2009年我國腫瘤登記覆蓋地區(qū)惡性腫瘤的發(fā)病與死亡水平。入選資料覆蓋人口達8547萬，包括了31個城市地區(qū)（5749萬人）和41個農村地區(qū)（2789萬人），登記結果令人震驚。,腫瘤發(fā)

4、病率與死亡率,全國登記地區(qū)發(fā)病率（粗率）285.91/10萬，中國人口標化率為146.87/10萬，累計率（0～74歲）為22.08%。全國登記地區(qū)惡性腫瘤死亡率（粗率）為180.54/10萬，中國人口標化率為85.06/10萬，累計率（0～74歲）為我國居民因癌死亡的幾率為12.94%。這讓也就意味著，約每5個人中就可能有一個人會患癌癥，約每8個死亡人中就可能有一個人會死于癌癥！,惡性腫瘤發(fā)病,惡性腫瘤發(fā)病前十位主要是肺癌、消化系統(tǒng)癌

5、（胃癌、結直腸癌、肝癌、食管癌、胰腺癌）、乳腺癌、淋巴瘤、膀胱癌、甲狀腺癌。這十類腫瘤占全部惡性腫瘤發(fā)病的76.39%。,惡性腫瘤發(fā)病,惡性腫瘤發(fā)病率最高的腫瘤為：肺癌，胃癌，肝癌、食管癌；男性發(fā)病率最高的為肺癌，女性為乳腺癌。城市惡性腫瘤發(fā)病首位，男性是肺癌，女性是乳腺癌；農村惡性腫瘤發(fā)病首位男女均是胃癌。,惡性腫瘤發(fā)病,城市與農村相比，城市粗發(fā)病率高出農村，而中國人口標準化發(fā)病率城市男性低于農村，女性高于農村。男性40歲以前和75歲

6、以后城市惡性腫瘤發(fā)病率高于農村，50～74歲農村高于城市；女性除了60～64歲城市低于農村外，其余年齡段均高于農村。,惡性腫瘤死亡率,城市惡性腫瘤死亡率整體高于農村，而男性死亡率略低于農村。0～15歲男女、城鄉(xiāng)差距不大；男性15～79年齡段惡性腫瘤死亡率城市低于農村，80歲以上城市高于農村；女性15～69歲年齡段農村高于城市，70歲以上農村低于城市。,惡性腫瘤死亡率,惡性腫瘤死亡前十位是肺癌、消化系統(tǒng)癌（肝癌、胃癌、食管癌、結直腸癌、胰

7、腺癌）、乳腺癌、白血病、腦癌、淋巴瘤。這十類腫瘤占全部惡性腫瘤的84.27%。男女、城鄉(xiāng)惡性腫瘤死亡首位均為肺癌,,我國每年新發(fā)癌癥病例200萬人，因癌癥(cancer)死亡人數為140萬；我國居民每死亡5人中，即有1人死于癌癥；在全國不少大城市，惡性腫瘤已經超越心腦血管疾病，成為第一死亡原因。,二，腫瘤檢查的方法,１、病理學的確證結果（金標準）脫落細胞學，穿刺細胞學，組織細胞學２、影像學的大體檢測　　超聲影像，普通放射　CT,　

8、MRI,　PECT３、實驗室的腫瘤標志物檢驗方法及應用,三、實驗室腫瘤標志物檢測方法,１、血清學水平２、組織學水平３、細胞學水平４、分子學水平：,1、血清學水平,1、放射免疫分析2、酶免疫分析3、熒光免疫分析 4、化學發(fā)光分析 5、電化學發(fā)光分析,二、組織學水平,１、免疫組織化學２、原位分子雜交組化技術它是將免疫學技術、分子生物學技術同組織病理學制片技術巧妙結合在一起，在組織細胞原位顯示某些化學成分和特定基因

9、片段以確定腫瘤性質的檢測方法３、圖像分析技術，可以定量測定組織切片上腫瘤細胞DNA含量和形態(tài)學分析，對判斷腫瘤惡性程度和預后有重要臨床價值,三、細胞學水平,１、流式細胞術，F(xiàn)CM用流式細胞術對細胞和細胞器的結構和某些功能進行定量測定，并利用細胞表面的特異性對特定細胞亞型進行分析和分選的先進技術方法，常用的于：白血病和淋巴瘤的標記物（CD系列）來診斷和鑒別，用來選擇腫瘤細胞的化療藥提供依據，用來測定消化道外周CD４４水平。２、電鏡：

10、電鏡酶細胞化學技術、免疫電鏡技術，原位雜交電鏡技術,四、分子水平,1、PCR，聚合酶鏈反應技術是一種簡單，敏感，高效，特異，快速的能在體外進行DNA擴增技術用于上皮細胞，CK19MRNA,CK20MRNACEAMRNA,AFPMRNA２、生物芯片技術：基因芯片技術，組織芯片技術，蛋白基因芯片技術,Put science on your side.,19,© 2009 Abbott,腫瘤標志物運用,1. 癌癥的早期診斷（

11、臨床醫(yī)學）療效及復發(fā)的監(jiān)測腫瘤疾病的預后和分期癌癥高危人群識別（預防醫(yī)學）組織學鑒別診斷（病理學）腫塊良惡性狀況鑒別診斷（病理學）,腫瘤標志物的定義,腫瘤標志物主要是指癌細胞分泌或脫落到體液或組織中的物質，或是縮主(人體)對體內新生物反應而產生并進入到體液或組織中的物質。,"理想"的腫瘤標志物的特點：,(1)敏感性高，能早期測出所有腫瘤患者；(2)特異性好，鑒別腫瘤和非腫瘤患者應100％準確；(3)有器

12、官特異性，能對腫瘤定位；(4)血清中濃度與瘤體大小、臨床分期相關，可用以判斷預后；(5)半衰期短，能反映腫瘤的動態(tài)變化，監(jiān)測治療效果、復發(fā)和轉移；(6)測定方法精密度、準確性高，操作簡便，試劑盒價廉。但至今為止，尚無一種"理想"的TM。,腫瘤標志物的分類及臨床應用,腫瘤標志物的分類和命名尚未完全統(tǒng)一；粗粗分類有癌胚抗原類、酶類、激素類、糖蛋白類、癌基因類和細胞表面腫瘤抗原類等6大類。前4類稱為血清腫瘤標志物，后

13、兩類稱細胞腫瘤標志物,癌胚抗原類,如AFP，CEA等，是從肝癌、結腸癌的組織中發(fā)現(xiàn)的，而胚胎時期的肝、胃腸管組織也能合成，并存在于胎兒的血清中，因此稱為胚胎抗原。,酶類,當機體某個部位發(fā)生腫瘤時，腫瘤細胞代謝異常，使某些酶或同工酶合成增加；或由于腫瘤組織的壓迫和浸潤，導致某些酶的排泄受阻，使腫瘤患者血清中酶活性異常升高。酶是較早發(fā)現(xiàn)并用于臨床診斷的一類腫瘤標志物，如患肝癌時γGT升高，患前列腺癌時PAP升高等。,糖蛋白類,.糖鏈抗原類：

14、是用各種腫瘤細胞株制備單克隆抗體，來識別的腫瘤相關抗原，大多是糖蛋白或粘蛋白，如CA125，CA15-3，CA19-9等。,激素類,正常情況下不產生激素的某些組織，在發(fā)生惡變時能產生和釋放一些肽類激素（異位內分泌激素）并導致相應的征候群，因此，這些異位內分泌激素升高也可作為腫瘤相關的標志物，如小細胞肺癌可分泌促腎上腺皮質激素（ACTH），患甲狀腺髓樣癌時降鈣素升高，患絨毛膜上皮細胞癌時hCG明顯升高。,癌基因類,癌基因的激活和抑癌基因的

15、變異，可使正常細胞發(fā)生惡變，導致腫瘤的發(fā)生。因此，癌基因表達的蛋白可作為腫瘤標志物，如ras基因蛋白，myc基因蛋白，p53抑癌基因蛋白等。,細胞表面腫瘤抗原類,SCC,鱗狀上皮細胞癌抗原,檢驗科已經開展的腫瘤標志物檢測項目,AFP,CEA,CA-125.CA-153.CA-199.T-PSA.f-PSA B-HCG.B2-MG. Ferritin,１、甲胎蛋白(AFP)：,AFP在胚胎期是功能蛋白，合成于卵黃囊、肝和小腸， AFP在臨

16、床上用于以下輔助診斷：(1)產前篩查診斷胎兒宮內死亡、神經管畸形、無腦兒和脊柱裂。(2)急慢性肝炎，在1100例肝炎患者測定中發(fā)現(xiàn)16．7%AFP20-90μg/L，8．7％90-400μg/L，2．8％400-1000μg/L，其中1例維持1000μg/L以上達6周，后逐步下降。(3)原發(fā)性肝細胞癌約70％以上AFP在400μg/L以上，多逐漸升高，亦有不高于400μg/L，甚至在正常水平的患者。用于高危人群的篩查，不建議用于正

17、常健康人體檢。,AFP,1、主要相關腫瘤：肝細胞癌和生殖細胞癌。 ２、其它相關腫瘤：胚胎細胞癌、卵巢畸胎瘤、胃癌、膽道癌、胰腺癌等。 ３、其他影響因素：良性疾病包括肝炎、肝硬化、腸炎以及遺傳性酪氨酸血癥等會升高；懷孕時也可一時性升高。,2．癌胚抗原(CEA)：,CEA是一種酸性糖蛋白，胚胎期在小腸、肝臟、胰腺合成，成人血清含量極低(<5μg/L ，如吸煙者為15-20μg/L，6．5％可達20-40μg/L )。 C

18、EAl965年被發(fā)現(xiàn)時，認為是結腸癌的標志物(60%-90％患者升高)，但以后發(fā)現(xiàn)胰腺癌(80%)、胃癌(60％)、肺癌(75％)和乳腺癌(60％)也有較高表,CEA,１、主要相關腫瘤：廣譜的腫瘤標志物。 ２、其它相關腫瘤：常見于肺癌、大腸癌、胰腺癌、胃癌、乳腺癌、甲狀腺髓樣癌等。 ３、其他影響因素：吸煙者假陽性較多，妊娠期婦女和心血管疾病、糖尿病、非特異性結腸炎等疾病患者中約有15%~53%的血清CEA也會升高。,CA12

19、5：,最初認為是卵巢癌特異的，但深入研究，它也是一種廣譜的標志物。正常值以35U／ml為界，82．2％卵巢癌、58％胰腺癌、32％肺癌，及其他非婦科腫瘤皆有不同程度的升高，但作為卵巢癌的輔助診斷是個重要的標志物，與病程有關。,CA-125,１、主要相關腫瘤：卵巢癌。 ２、其它相關腫瘤：肺癌、胰腺癌、乳腺癌、肝癌、胃腸道惡性腫瘤、子宮癌。 ３、其他影響因素：女性盆腔炎、子宮內膜異位、行經期、卵巢囊腫、子宮肌瘤、慢性肝炎、胰腺

20、炎、膽囊炎、肺炎等會升高。,CAl5-3：,是乳腺細胞上皮表面糖蛋白的變異體，近年推出作為乳腺癌標志物，正常＜40U／ml哺乳期婦女或良性乳腺腫瘤皆低于此值。乳腺癌晚期100％，其他 期75%此值明顯升高。同樣，該標志物也是廣譜的，可見于50％肝細胞癌、53％肺癌、34％卵巢癌患者。由于CEA在乳腺癌中也有診斷價值，如兩者聯(lián)合將可提高10％陽性率。,CA-153,１、主要相關腫瘤：乳腺癌的首選標志物。 ２、其它相關腫瘤：肺癌、卵巢

21、癌、肺腺癌、結直腸癌等均可增高３、其他影響因素：良性乳腺疾患、子宮內膜異位、卵巢囊腫等患者的血清CA15-3也可超過正常值。,4．CA19-9：,CAl9-9為唾液酸化的乳-N-巖藻戊糖II，是一種類粘蛋白的糖蛋白成分，與Lewis血型成分有關。血清內正常值＜37U／mL(＞95％)，異常升高也是在多種腫瘤出現(xiàn)，如79%胰腺癌、58%結腸癌、49％肝癌、67％胃癌、67如膽囊癌、肺癌、乳腺癌皆有10％左右是升高的。,CA-199,主要

22、相關腫瘤：胰腺癌、膽管癌、結直腸癌。 其它相關腫瘤：肝癌、膽囊癌、膽管癌等。 其他影響因素：很多消化系統(tǒng)的良性疾病患者中也有升高，據報道又近10%的胰腺炎患者血清CA19-9有中等度升高。,β-HCG：,是一存在于胎盤中的糖蛋白激素，分于量為45000，當懷孕時血與尿中水平上升，正常血中只含微量。以特殊的免疫試驗可測定HCG的β亞單位。由于60％以上的非精原細胞瘤患者體內HCG上升，所以β-HCG的測定可監(jiān)視非精原細胞瘤的治

23、療反應及復發(fā)狀況，甚至有些腫瘤復發(fā)可在臨床體征出現(xiàn)前幾周或幾個月通過測定HCG查出。,β-HCG,主要相關腫瘤：婦科腫瘤和非精原性睪丸癌。 其它相關腫瘤：乳腺癌、精原性睪丸癌、肺癌、肝癌等,β2-MG：,表達在大多數有核細胞表面 ,臨床上多用于證實淋巴增殖性疾病，如白血病、淋巴瘤及多發(fā)性骨髓瘤。其水平與腫瘤細胞數量、生長速率、預后及疾病活動性有關。例如骨髓瘤β2-microglobulin水平高于4．O mg／L時，預示生存時間

24、短，高于6．0mg／L時，對化療反應不敏感。此外，根據此水平還可為骨髓瘤患者分期。,β2-MG,主要相關腫瘤：惡性腫瘤輔助性標志物，慢性淋巴細胞白血病、淋巴細胞肉瘤、多發(fā)性骨髓瘤等尤為明顯。 其它相關腫瘤：肺癌、乳腺癌、胃腸道癌及子宮頸癌中也可見升高。 其他影響因素：腎功能衰竭、多種血液系統(tǒng)疾病及炎癥時會升高， 且在多種疾病中均可增高，故應排除由于某些炎癥 疾病或腎小球濾過功能見底所致的血清β2-MG增高。,鐵蛋白：,是一種

25、鐵結合蛋白，存在于各種組織，病理狀態(tài)下，釋放到血液增加，不是腫瘤特異的標志，在多種癌癥患者血中均有不同程度的陽性率，肝癌患者的陽性率在70％以上，所以可輔助肝癌診斷。此外，在進展性乳腺癌思考Ferritin水平也有顯著升高，且與病程有關。,前列腺特異性抗原(PSA)：,PSA是目前診斷前列腺癌最敏感的指標，可用于前列腺癌的早期診斷、監(jiān)測治療及預測復發(fā)具有極高的組織器官特異性。正常人體血清內PSA ＜4μg/L，這個正常值有隨年齡增長的趨

26、勢。＜50歲者一般低于4．0μg/L，50-55歲為4．4μg/L，60-69歲為6．8μg/L，＞70歲可達7．7μg/L，（有文章觀點：每增１０歲結果加１為參考范圍）異常升高預示有患前列腺癌的可能。以 ＞4μg/L為臨界值，早期前列腺癌63％-70％陽性，總陽性率可達69-92．5％。有報告，PSA值如為4．0-10．0μg/L，特異性相對較低，只有25％確診前列腺癌；但＞10．Oμg/L者，往往又是晚期前列腺癌，,,測定PSA的類

27、型和百分比有利于鑒定前列腺良性和惡性疾患，f-PSA百分比較低可能是前列腺癌惡性度較高。固定臨界值應是＜25％(占PSA的量).國內報告，如以t-PSA＞4．2μg/L為診斷標準，其敏感性 為 l00%，特異性僅 68%，符合率為74％；如以fPSA／tPSA(F／T)值＜O．11為診斷標準，其敏感性為85%，特異性98％，符合率96％；如以tPSA＞4．2μg/L，同時F／T＜0．11為診斷標準，其敏感性為86%，特異性為99％，符合

28、率97%?？梢?，最后一個指標為最佳。,PSA,主要相關腫瘤：前列腺癌。 其它相關腫瘤：某些婦科腫瘤、多囊卵巢綜合癥、乳腺癌。 其他影響因素：前列腺炎、前列腺肥大會引起升高。,Put science on your side.,48,© 2011 Abbott,腫瘤標志物套餐設置,肺癌SCC + CEA + Cyfra + ProGRP消化道癌癥AFP + CA199 +CEA+ PG I + PG II

29、婦科腫瘤SCC + HE4 + CA125 + CA153 + CEA 前列腺癌tPSA + fPSA,Put science on your side.,49,© 2011 Abbott,Pepsinogen：胃癌癌前病變標志物ProGRP：小細胞肺癌標志物HE4：卵巢癌標志物SCC：宮頸癌標志物,獨有腫瘤標志物,Put science on your side.,50,© 2009 Abbott,肺癌

30、標志物檢測組,SCC: 肺鱗癌ProGRP：小細胞肺癌CEA：肺腺癌Cyfra 21-1：非小細胞肺癌,Put science on your side.,51,© 2009 Abbott,多標志物聯(lián)合篩查，有利于肺癌早期檢出,多標志物聯(lián)合使用，針對于高危人群（吸煙人群）及出現(xiàn)疑似肺癌癥狀（咳血，胸痛，肺部腫物）的患者進行肺癌篩查非小細胞肺癌（NSCLC）：SCC＋Cyfra21-1＋CEA小細胞肺癌（SCLC）：

31、ProGRP＋NSE＋CEA靈敏度：NSCLC 82％，SCLC 80％特異性：92％此篩查表現(xiàn)優(yōu)于PSA在前列腺癌篩查中的表現(xiàn),52,Company Confidential© 2010 Abbott,胃蛋白酶原(PG)檢測臨床應用,體檢中心,消化科,消化科,如何看檢驗報告單,單位　:因為檢測方法學的不同，單位的不同，所以參考范圍（截斷值）也有所不同因為檢驗項目結果的不確定性，必須看動態(tài)的檢測結果，二次差２０