hiv質(zhì)控與評(píng)價(jià)

1、艾滋病檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室的質(zhì)量控制與評(píng)價(jià),孫偉東北京市疾病預(yù)防控制中心北京市艾滋病確證中心,北京市疾病預(yù)防控制中心,一、質(zhì)量控制,質(zhì)量控制是指為確保檢測(cè)工作正常進(jìn)行而在每一次實(shí)驗(yàn)過(guò)程中必須采取的各種措施。涉及每一次試驗(yàn)中，保證實(shí)驗(yàn)正常進(jìn)行必須包括的各種措施。是對(duì)檢測(cè)過(guò)程的監(jiān)控，盡可能減少實(shí)驗(yàn)過(guò)程中產(chǎn)生的各種誤差。具體內(nèi)容是將質(zhì)控品（內(nèi)部對(duì)照和外部對(duì)照）和檢測(cè)標(biāo)本一起實(shí)驗(yàn)操作，從而了解分析過(guò)程的質(zhì)量情況。質(zhì)控的最終結(jié)果可以了解本次實(shí)

2、驗(yàn)是否有效、試驗(yàn)條件是否正常、試驗(yàn)結(jié)果是否可靠。,北京市疾病預(yù)防控制中心,采集標(biāo)本前病人的準(zhǔn)備正確的標(biāo)本采集方法準(zhǔn)確及時(shí)的運(yùn)送標(biāo)本實(shí)驗(yàn)前正確地處理和保存標(biāo)本,實(shí)驗(yàn)前質(zhì)量控制,北京市疾病預(yù)防控制中心,實(shí)驗(yàn)中質(zhì)量控制,質(zhì)控品的準(zhǔn)備試劑盒的評(píng)價(jià)開(kāi)展質(zhì)控圖質(zhì)控（或“即刻法”質(zhì)控）,北京市疾病預(yù)防控制中心,實(shí)驗(yàn)后質(zhì)量控制,實(shí)驗(yàn)后準(zhǔn)確填寫(xiě)檢驗(yàn)結(jié)果及時(shí)發(fā)出報(bào)告正確地解釋檢驗(yàn)結(jié)果的臨床意義,北京市疾病預(yù)防控制中心,質(zhì)控品,內(nèi)部對(duì)照質(zhì)控血清

3、內(nèi)部對(duì)照質(zhì)控血清是指每個(gè)試劑盒內(nèi)廠方提供的一套陰性和陽(yáng)性對(duì)照外部對(duì)照質(zhì)控血清外部對(duì)照質(zhì)控血清是各實(shí)驗(yàn)室為了監(jiān)控每次檢測(cè)的重復(fù)性和穩(wěn)定性以及檢驗(yàn)試劑盒批間差異而設(shè)置的一套陰性和陽(yáng)性對(duì)照血清。設(shè)立外部對(duì)照還可以提示標(biāo)本處于弱陽(yáng)性和臨界值狀態(tài)時(shí)的檢驗(yàn)操作情況,北京市疾病預(yù)防控制中心,外部對(duì)照質(zhì)控血清的組成,理想的外部對(duì)照應(yīng)該包括強(qiáng)陽(yáng)性對(duì)照、弱陽(yáng)性對(duì)照、臨界值對(duì)照和陰性對(duì)照。在每次實(shí)驗(yàn)時(shí)可只使用一個(gè)單一濃度水平的質(zhì)控品即弱陽(yáng)性對(duì)照。

4、這個(gè)弱陽(yáng)性對(duì)照的值以設(shè)定在該試劑盒Cut-off值的2－3倍為宜。,北京市疾病預(yù)防控制中心,外部對(duì)照質(zhì)控血清的來(lái)源,購(gòu)買自備混合試劑盒內(nèi)部對(duì)照血清。稀釋HIV抗體強(qiáng)陽(yáng)性血清。,北京市疾病預(yù)防控制中心,每一次試驗(yàn)必須使用外部對(duì)照質(zhì)控血清建立質(zhì)控圖，即檢驗(yàn)性能數(shù)據(jù)與計(jì)算出的“控制線”進(jìn)行比較的圖上面標(biāo)有一中心橫線及其上、下各一或兩條平行的質(zhì)控線，并有按時(shí)間順序填入的各質(zhì)控血清測(cè)定的數(shù)值，以便監(jiān)控實(shí)驗(yàn)操作的一致性和結(jié)果的準(zhǔn)確性。同時(shí)

5、可以了解各批試劑盒之間的誤差（批間差異）。,外部對(duì)照的使用,北京市疾病預(yù)防控制中心,算術(shù)平均值（ ）：采用至少20次（天）所測(cè)得的外部對(duì)照質(zhì)控血清S/CO值結(jié)果計(jì)算出平均值標(biāo)準(zhǔn)差（s）：是描述樣本與均數(shù)之間離散程度的一個(gè)指標(biāo)，是與對(duì)照質(zhì)控血清S/CO值均值有關(guān)的預(yù)期范圍。一組S/CO值標(biāo)準(zhǔn)差以s 表示變異系數(shù)（cv）：是反映各次S/CO 值相對(duì)均值的離散程度的一個(gè)指標(biāo)，可以用于衡量被檢標(biāo)本檢測(cè)的重復(fù)性或精密度。,建立質(zhì)控圖的參數(shù),

6、,,北京市疾病預(yù)防控制中心,計(jì)算公式,北京市疾病預(yù)防控制中心,質(zhì)控圖的建立,北京市疾病預(yù)防控制中心,以每個(gè)質(zhì)控對(duì)照的OD值 /CUT OFF比值（S/CO）為縱座標(biāo)（Y軸），每一次實(shí)驗(yàn)為橫座標(biāo)（X軸）建立質(zhì)控圖。 ①采用至少20次（天）所測(cè)的外部對(duì)照質(zhì)控血清S/CO 值結(jié)果計(jì)算出平均值（ ）； ②計(jì)算20次S/CO值的標(biāo)準(zhǔn)差（s）； ③計(jì)算出 ±1s， ± 2s ，± 3s范圍；④標(biāo)出每次

7、實(shí)驗(yàn)外部對(duì)照值，每次實(shí)驗(yàn)質(zhì)控的結(jié)果依次點(diǎn)入該質(zhì)控圖框架圖中。,質(zhì)控圖的建立,北京市疾病預(yù)防控制中心,質(zhì)控圖制作實(shí)例,1、計(jì)算均值=1.742、計(jì)算標(biāo)準(zhǔn)差=0.253、按標(biāo)準(zhǔn)差計(jì)算范圍如下：1S=1.74+/-（1×0.25）=（1.49-1.99）2S=1.74+/-（2×0.25）=（1.24-2.24）3S=1.74+/-（3×0.25）=（0.99-2.49）,北京市疾病預(yù)防控制中心

8、,質(zhì)控圖,北京市疾病預(yù)防控制中心,質(zhì)控圖,北京市疾病預(yù)防控制中心,①外部對(duì)照S/CO值超出±2s，系統(tǒng)處于告警狀態(tài)，應(yīng)予注意，是否可以繼續(xù)檢測(cè)需要進(jìn)一步觀察； ②失控：外部對(duì)照S/CO值超出±3s，系統(tǒng)處于失控狀態(tài)，本次實(shí)驗(yàn)結(jié)果不能被接受，需查找原因，重新檢測(cè)；③位移：如果幾個(gè)連續(xù)質(zhì)控對(duì)照值（3-5次）都落在均值的一側(cè)稱之為位移，通常表示存在大的變化（失控）。引起位移的原因有使用新批號(hào)的試劑盒、使用新試劑、實(shí)驗(yàn)員

9、的更換、孵育溫度的改變、儀器故障等。④趨勢(shì)：當(dāng)幾個(gè)連續(xù)質(zhì)控對(duì)照值（5-7個(gè)）幾乎按一個(gè)方向分布時(shí)稱之為趨勢(shì)，通常由參數(shù)的緩慢改變引起，如試劑失效和移液器逐漸不準(zhǔn)確等。發(fā)生位移和趨勢(shì)的最常見(jiàn)的原因是試劑（如酶標(biāo)記物）或?qū)φ盏氖А?質(zhì)控圖的判定和分析,北京市疾病預(yù)防控制中心,北京市疾病預(yù)防控制中心,①建立質(zhì)控圖的目的是發(fā)現(xiàn)出現(xiàn)的問(wèn)題，所以在每次實(shí)驗(yàn)時(shí)應(yīng)該觀察外部對(duì)照值是否在允許范圍之內(nèi)；②為減少試劑盒更換造成的變化，最好長(zhǎng)期穩(wěn)定地使用

10、一種質(zhì)量好的試劑盒，更換不同廠家的試劑盒及改用新批號(hào)試劑盒應(yīng)重新制作質(zhì)控圖；③每月定期召開(kāi)質(zhì)控分析會(huì)，討論本月質(zhì)控情況；④質(zhì)控結(jié)果失控時(shí)，應(yīng)填寫(xiě)報(bào)告單交質(zhì)量負(fù)責(zé)人，分析原因并決定是否發(fā)出檢測(cè)報(bào)告；⑤使用新批次的外部對(duì)照質(zhì)控血清時(shí)，必須重新繪制質(zhì)控圖。變異系數(shù)小于20%，表示處于穩(wěn)定狀態(tài)。,質(zhì)控圖分析要點(diǎn),北京市疾病預(yù)防控制中心,在20%）時(shí)，提示加樣量不一致。校準(zhǔn)加樣器及每次更換吸頭加樣可以減少cv值使對(duì)照值更趨一致。,變異系數(shù)（

11、cv）,北京市疾病預(yù)防控制中心,過(guò)去認(rèn)為OD值在CUT OFF值±10%~15%范圍內(nèi)的樣本定為灰色帶反應(yīng)。對(duì)這類標(biāo)本最好復(fù)檢，或用其他方法再檢測(cè)，通過(guò)灰區(qū)的判斷有助于發(fā)現(xiàn)早期感染者目前的EIA試劑已有較高的靈敏度，EIA檢測(cè)應(yīng)該只有兩種結(jié)果：陽(yáng)性或陰性,灰區(qū)問(wèn)題,北京市疾病預(yù)防控制中心,即刻法質(zhì)控,在對(duì)同一批外部質(zhì)控血清連續(xù)測(cè)定3次后，即可對(duì)第三次檢驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行質(zhì)控計(jì)算方法：1、將質(zhì)控血清的測(cè)定值從小到大排列：X1,

12、X2 , X3 … Xn（X1為最小值， Xn 為最大值）；2、計(jì)算 和 s ；3、計(jì)算SI上限值和SI下限值,北京市疾病預(yù)防控制中心,4、將SI上限和SI下限與表中數(shù)字比較當(dāng)SI上限和SI下限 n3s值時(shí)表示該值已在3s范圍之外， 屬“失控” 數(shù)值處于“告警” 和“失控”狀態(tài)應(yīng)舍去，重新測(cè)定該質(zhì)控血清和病人樣品。舍去的只是失控的數(shù)值，其它值仍可繼續(xù)使用,即刻法質(zhì)控,北京市疾病預(yù)防控制中心,必須使用經(jīng)衛(wèi)生部批準(zhǔn)或注冊(cè)，中

13、國(guó)藥品生物制品檢定所批批檢定合格、有效期內(nèi)且保存條件符合要求的國(guó)產(chǎn)或進(jìn)口HIV1+2混合型抗體初篩試劑盒按照SOP中規(guī)定的要求進(jìn)行操作，對(duì)影響檢驗(yàn)的物理因素，如孵育時(shí)間、反應(yīng)溫度、洗滌程序和次數(shù)等，均應(yīng)按試劑盒說(shuō)明書(shū)的要求操作，以保證質(zhì)量控制實(shí)驗(yàn)前必須檢查待檢標(biāo)本的質(zhì)量，如標(biāo)本不符合要求必須重新采集標(biāo)本。冰凍的標(biāo)本應(yīng)全部融化，搖勻后檢測(cè)每次檢驗(yàn)，內(nèi)部對(duì)照和外部對(duì)照的結(jié)果必須在允許的范圍內(nèi)，否則應(yīng)視為無(wú)效,質(zhì)量控制的基本要求,北京市

14、疾病預(yù)防控制中心,二、質(zhì)量評(píng)價(jià),質(zhì)量評(píng)價(jià)是一種手段，用于判定實(shí)驗(yàn)室測(cè)定結(jié)果的質(zhì)量。通常使用有關(guān)權(quán)威機(jī)構(gòu)提供的一套質(zhì)控品(質(zhì)量控制參比血清)從外部來(lái)評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)室的工作，即對(duì)數(shù)個(gè)實(shí)驗(yàn)室的檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析和評(píng)價(jià)。這種評(píng)價(jià)方式常稱為室間質(zhì)量評(píng)價(jià)（EQA）。質(zhì)量評(píng)價(jià)用于評(píng)價(jià)質(zhì)量保證體系的效果，其目的在于幫助發(fā)現(xiàn)其質(zhì)控與質(zhì)保系統(tǒng)有無(wú)問(wèn)題。各實(shí)驗(yàn)室可根據(jù)上一級(jí)提供的質(zhì)評(píng)檢驗(yàn)報(bào)告的結(jié)果，檢查其質(zhì)量控制狀況。,北京市疾病預(yù)防控制中心,必要性,是監(jiān)督檢驗(yàn)

15、質(zhì)量、得到質(zhì)量保證的重要途徑之一是一種有系統(tǒng)、有組織的外部約束和橫向參比措施。不僅有助于提高各參評(píng)實(shí)驗(yàn)室的檢測(cè)質(zhì)量，增加實(shí)驗(yàn)室間檢驗(yàn)結(jié)果的可比性，還可通過(guò)試劑評(píng)價(jià)、方法比較和技術(shù)交流等方式，促進(jìn)實(shí)驗(yàn)方法的進(jìn)步和檢驗(yàn)試劑的優(yōu)化，這些工作都直接或間接地提高了檢驗(yàn)質(zhì)量,北京市疾病預(yù)防控制中心,也稱為能力驗(yàn)證（PT），是指多家實(shí)驗(yàn)室分析統(tǒng)一標(biāo)本并由外部獨(dú)立機(jī)構(gòu)收集、反饋實(shí)驗(yàn)室上報(bào)結(jié)果并評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)能力的活動(dòng)。主要用途：評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)室的分析

16、能力；監(jiān)控實(shí)驗(yàn)室可能出現(xiàn)的技術(shù)問(wèn)題；改正存在的問(wèn)題；改進(jìn)分析能力、實(shí)驗(yàn)方法和其它實(shí)驗(yàn)室的可比性；評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)室工作人員的能力；教育和訓(xùn)練實(shí)驗(yàn)室工作人員；作為實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量保證的外部監(jiān)督工具。,室間質(zhì)量評(píng)價(jià),北京市疾病預(yù)防控制中心,PT報(bào)告中可以回答兩個(gè)重要問(wèn)題,比較本實(shí)驗(yàn)室與使用同一方法（試劑）的其他實(shí)驗(yàn)室的結(jié)果差異與做同一試驗(yàn)但使用不同方法（試劑）的實(shí)驗(yàn)室結(jié)果進(jìn)行比較通過(guò)比較可以提示實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控難以發(fā)現(xiàn)的偏差或系統(tǒng)誤差。

17、,北京市疾病預(yù)防控制中心,PT失敗時(shí)應(yīng)注意,核查原始記錄，確認(rèn)沒(méi)有轉(zhuǎn)抄錯(cuò)誤；確認(rèn)當(dāng)時(shí)測(cè)定時(shí)，室內(nèi)質(zhì)控可接受審核儀器維護(hù)和校準(zhǔn)記錄查對(duì)標(biāo)本處理記錄核對(duì)與PT標(biāo)本同時(shí)測(cè)定的其它實(shí)驗(yàn)記錄若有剩余PT標(biāo)本，重復(fù)分析,北京市疾病預(yù)防控制中心,PT的不足,評(píng)價(jià)的可能不是實(shí)驗(yàn)室的正常水平而是它的最好水平有時(shí)成績(jī)不好并不代表實(shí)驗(yàn)室水平不行有時(shí)成績(jī)比實(shí)際檢測(cè)水平要好，靶值確定是一個(gè)十分重要的因素PT不可能確認(rèn)分析前和分析后存在的許多問(wèn)題

18、整個(gè)過(guò)程時(shí)間較長(zhǎng),北京市疾病預(yù)防控制中心,室間質(zhì)評(píng)與室內(nèi)質(zhì)控的關(guān)系⑴,室內(nèi)質(zhì)控是對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果的即時(shí)性評(píng)價(jià)，通過(guò)對(duì)室內(nèi)質(zhì)控結(jié)果的連續(xù)觀察，監(jiān)測(cè)實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)結(jié)果的精密性。室內(nèi)質(zhì)控是實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)質(zhì)量保證的基礎(chǔ)，沒(méi)有完善的室內(nèi)質(zhì)控措施就談不上質(zhì)量保證，即使在室間質(zhì)評(píng)中取得很好的成績(jī)也不能說(shuō)明實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)結(jié)果的可靠性。因此，實(shí)驗(yàn)室的質(zhì)量保證工作，應(yīng)首先從室內(nèi)質(zhì)控抓起，持之以恒，不斷的觀察、分析和解決實(shí)驗(yàn)中的質(zhì)量問(wèn)題，才能使檢驗(yàn)工作的質(zhì)量得到穩(wěn)步提高。,北

19、京市疾病預(yù)防控制中心,,室間質(zhì)評(píng)是對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果的回顧性評(píng)價(jià)，其主要目的是評(píng)價(jià)和修正實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，并與各參評(píng)單位結(jié)果比較，了解本室結(jié)果的偏倚程度，是發(fā)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)室系統(tǒng)誤差的重要手段之一。,室間質(zhì)評(píng)與室內(nèi)質(zhì)控的關(guān)系⑵,北京市疾病預(yù)防控制中心,室間質(zhì)評(píng)與室內(nèi)質(zhì)控的關(guān)系⑶,室間質(zhì)評(píng)應(yīng)在室內(nèi)質(zhì)控具有相當(dāng)水平的基礎(chǔ)上進(jìn)行，因?yàn)閷?shí)驗(yàn)室沒(méi)有穩(wěn)定可靠的室內(nèi)質(zhì)控措施，就不可能獲得良好的精密性，沒(méi)有良好的精密性是談不上準(zhǔn)確性的。因此，實(shí)驗(yàn)室不能好高騖遠(yuǎn)，

20、舍本求末,只重視室間質(zhì)評(píng)的成績(jī)，而不實(shí)實(shí)在在地抓好室內(nèi)質(zhì)控。當(dāng)然，室內(nèi)質(zhì)控和室間質(zhì)評(píng)都是質(zhì)量保證的重要環(huán)節(jié)之一，兩者應(yīng)互為補(bǔ)充，辯證統(tǒng)一，缺一不可。,北京市疾病預(yù)防控制中心,室間質(zhì)量評(píng)價(jià)體系,1.國(guó)家艾滋病參比實(shí)驗(yàn)室和個(gè)別省級(jí)艾滋病確 證中心接受國(guó)際相關(guān)機(jī)構(gòu)的質(zhì)量評(píng)價(jià)。2.國(guó)家艾滋病參比實(shí)驗(yàn)室對(duì)全國(guó)各省、自治區(qū)和直轄市的艾滋病確證中心實(shí)驗(yàn)室和其他艾滋病確證實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行質(zhì)量評(píng)價(jià)，并負(fù)責(zé)提供質(zhì)量評(píng)價(jià)標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)以及有關(guān)文件。3

21、.艾滋病確證中心實(shí)驗(yàn)室對(duì)所在省份內(nèi)各級(jí)艾滋病篩查實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行質(zhì)量評(píng)價(jià)。,北京市疾病預(yù)防控制中心,室間質(zhì)評(píng)方式,1.隨機(jī)派調(diào)查員到實(shí)驗(yàn)室實(shí)地調(diào)查2.發(fā)放問(wèn)卷調(diào)查表3.發(fā)放質(zhì)控物4.以上方法相結(jié)合,北京市疾病預(yù)防控制中心,質(zhì)量評(píng)價(jià)管理,1.實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量評(píng)價(jià)工作每年要進(jìn)行總結(jié)，以提高質(zhì)量評(píng)價(jià)的工作質(zhì)量。2.表彰質(zhì)量評(píng)價(jià)工作做得好的實(shí)驗(yàn)室，推廣和宣傳質(zhì)量管理好的經(jīng)驗(yàn)。3.對(duì)多次質(zhì)量評(píng)價(jià)不合格的實(shí)驗(yàn)室，由主管機(jī)構(gòu)(衛(wèi)生部疾病控制司和省級(jí)