山梨醇對馬鈴薯試管苗低溫保存的影響研究.pdf

1、由于離體組織在保存過程中，存在繼代時間短的問題，且超低溫保存的研究還處于初級階段，使得馬鈴薯種質(zhì)資源利用脫毒試管苗保存的方法研究進展緩慢。本研究以馬鈴薯品種費烏瑞它、川芋117試管苗為材料，對其在20 g·L-1山梨醇結合4℃低溫條件下的保存時間和生理變化以及保存后再生植株遺傳穩(wěn)定性進行了深入研究。
　　主要研究結果如下:
　　1.MS培養(yǎng)基內(nèi)添加不同濃度的矮壯素、山梨醇和甘露醇，結合4℃的低溫處理，結果表明，添加20 g·

2、L-1山梨醇結合4℃的低溫處理延長馬鈴薯試管苗繼續(xù)時間的效果顯著，可將保存時間由100d延長到300d以上，且保存后的馬鈴薯材料，重新轉接到新的MS培養(yǎng)基中，能很快恢復生長。
　　2.以常溫不加任何試劑為對照，對添加20 g·L-1山梨醇處理的馬鈴薯試管苗在低溫保存過程中的生理變化進行了初步研究，發(fā)現(xiàn)所有處理隨著培養(yǎng)時間的延長，試管苗逐漸老化，葉綠素和游離脯氨酸含量均逐漸下降，但20 g·L-1山梨醇結合4℃低溫處理，能顯著延緩試

3、管苗各生理指標的下降速度，且低溫能顯著延緩試管苗的生長，降低其老化速度;丙二醛含量隨時間的延長而上升，20 g·L-1山梨醇結合4℃的低溫處理下丙二醛含量上升緩慢，顯著低于對照。
　　3.低溫離體保存后的馬鈴薯試管苗經(jīng)復壯培養(yǎng)后，在形態(tài)指標上無顯著差異，通過RAPD技術對該再生植株進行遺傳穩(wěn)定性檢測，共篩選了200條隨機引物，檢測結果表明，無顯著的變異條帶，說明馬鈴薯試管苗在經(jīng)過山梨醇處理和低溫保存后，其遺傳物質(zhì)可能沒有發(fā)生改變。