山梨醇對馬鈴薯試管苗低溫保存的影響研究.pdf

1、由于離體組織在保存過程中，存在繼代時間短的問題，且超低溫保存的研究還處于初級階段，使得馬鈴薯種質(zhì)資源利用脫毒試管苗保存的方法研究進(jìn)展緩慢。本研究以馬鈴薯品種費(fèi)烏瑞它、川芋117試管苗為材料，對其在20 g·L-1山梨醇結(jié)合4℃低溫條件下的保存時間和生理變化以及保存后再生植株遺傳穩(wěn)定性進(jìn)行了深入研究。
　　主要研究結(jié)果如下:
　　1.MS培養(yǎng)基內(nèi)添加不同濃度的矮壯素、山梨醇和甘露醇，結(jié)合4℃的低溫處理，結(jié)果表明，添加20 g·

2、L-1山梨醇結(jié)合4℃的低溫處理延長馬鈴薯試管苗繼續(xù)時間的效果顯著，可將保存時間由100d延長到300d以上，且保存后的馬鈴薯材料，重新轉(zhuǎn)接到新的MS培養(yǎng)基中，能很快恢復(fù)生長。
　　2.以常溫不加任何試劑為對照，對添加20 g·L-1山梨醇處理的馬鈴薯試管苗在低溫保存過程中的生理變化進(jìn)行了初步研究，發(fā)現(xiàn)所有處理隨著培養(yǎng)時間的延長，試管苗逐漸老化，葉綠素和游離脯氨酸含量均逐漸下降，但20 g·L-1山梨醇結(jié)合4℃低溫處理，能顯著延緩試

3、管苗各生理指標(biāo)的下降速度，且低溫能顯著延緩試管苗的生長，降低其老化速度;丙二醛含量隨時間的延長而上升，20 g·L-1山梨醇結(jié)合4℃的低溫處理下丙二醛含量上升緩慢，顯著低于對照。
　　3.低溫離體保存后的馬鈴薯試管苗經(jīng)復(fù)壯培養(yǎng)后，在形態(tài)指標(biāo)上無顯著差異，通過RAPD技術(shù)對該再生植株進(jìn)行遺傳穩(wěn)定性檢測，共篩選了200條隨機(jī)引物，檢測結(jié)果表明，無顯著的變異條帶，說明馬鈴薯試管苗在經(jīng)過山梨醇處理和低溫保存后，其遺傳物質(zhì)可能沒有發(fā)生改變。