白藜蘆醇對(duì)SIRT1基因mRNA表達(dá)的影響.pdf

1、SIRT1屬于沉默信息調(diào)節(jié)因子2(silence information regulator 2，Sir2)家族成員，該蛋白家族的基本活性是依賴NAD<'+>的去乙?；福谡{(diào)節(jié)基因表達(dá)、細(xì)胞凋亡、代謝和老化過程中發(fā)揮重要作用。SIRTUINS家族在進(jìn)化中具有高度保守性，廣泛存在于不同生物，酵母中有5個(gè)家族成員(Sir2 and Hstl-4)，哺乳動(dòng)物中有7個(gè)成員(SIRT1-7)，最早發(fā)現(xiàn)酵母Sir2是一種轉(zhuǎn)錄抑制因子，進(jìn)一步的研究

2、發(fā)現(xiàn)Sir2除參與酵母染色質(zhì)沉默、調(diào)節(jié)DNA復(fù)制和轉(zhuǎn)錄調(diào)控等功能外，還與酵母、線蟲和果蠅等低等生物壽命延長(zhǎng)有關(guān)。SIRT1是哺乳動(dòng)物該家族成員中研究得最多的一種，研究發(fā)現(xiàn)SIRT1在氧化應(yīng)激條件下可通過對(duì)FOXO3和p53等的調(diào)節(jié)，促進(jìn)細(xì)胞在氧化應(yīng)激條件下的存活，提示可能有延長(zhǎng)細(xì)胞壽命的作用。 由于Sir2可能具有延長(zhǎng)壽命的作用，促使研究者尋找Sirtuins激活因子。白藜蘆醇(Resveratrol，Res)是目前發(fā)現(xiàn)的最有效

3、的一種Sir2激活劑。白藜蘆醇是自然界中存在的一種植物多酚，存在于葡萄等多種植物中，是一種植物抗毒素。研究發(fā)現(xiàn)白藜蘆醇具有抗炎、抗癌、抗氧化、雌激素樣作用、影響骨代謝等多種生理活性，但目前對(duì)其延長(zhǎng)脊柱類生物尤其是哺乳動(dòng)物壽命的作用還不明確。 為了分析白藜蘆醇對(duì)哺乳動(dòng)物SIRT1表達(dá)的影響，本文實(shí)驗(yàn)中將250±10g的Wistar大鼠18只隨機(jī)分為3組：分別以0.05％的羧甲基纖維素溶液、2mg/Kg bw和20mg/Kg bw的

4、白藜蘆醇灌胃3周后，提取各組大鼠腦及肝組織總RNA。采用RT-PCR和實(shí)時(shí)定量PCR方法檢測(cè)服用白藜蘆醇三周后大鼠腦和肝組織中SIRT2基因表達(dá)情況，未檢測(cè)到不同劑量白藜蘆醇對(duì)大鼠腦和肝組織中SIRT1基因mRNA表達(dá)的影響。為評(píng)價(jià)服用白藜蘆醇大鼠血清對(duì)培養(yǎng)細(xì)胞SIRTI基因mRNA表達(dá)的影響，本課題用收集到的不同組大鼠血清以10％和20％濃度培養(yǎng)PCI2細(xì)胞。顯微鏡下觀察未發(fā)現(xiàn)各組細(xì)胞形態(tài)差異；利用RT-PCR和實(shí)時(shí)定量PCR方法也未