靈芝免疫調節(jié)蛋白對肺腺癌的防治功效

1、柯俊良教授簡歷【學歷】臺大醫(yī)學院生化所博士輔仁大學生物學研究所碩士輔仁大學生物學系學士【經歷】中山醫(yī)學大學醫(yī)學分子毒理學研究所副教授農藥藥物毒物實驗所藥劑系博士后研究員臺大公衛(wèi)學院HLA研究室博士研究員中山醫(yī)學院毒理學研究所助理教授【現(xiàn)任】中山醫(yī)學大學醫(yī)學分子毒理學研究所教授兼所長【專長】環(huán)境毒理﹑癌癥分子生物﹑生物農藥近年來中草藥在抗癌方面的能力陸續(xù)被證實，其中靈芝一直被視為傳統(tǒng)中藥的翹楚，其有效成分包括靈芝多糖體，靈芝三萜類和靈芝免

2、疫調節(jié)蛋白等等。許多細胞核動物實驗已經證實。靈芝多醣體和靈芝三萜類具有抗腫瘤等功能，而不同靈芝屬菌類，如小孢子靈芝（Ganodermamicrospum）﹑赤芝（Ganodermafucidium）和松杉靈芝（Ganodermatusgae），皆含有一大約13KDa分子量的蛋白質，它們都具有促進淋巴球增殖及刺激干擾素γ表現(xiàn)量的功能，且其胺基酸序列與免疫球蛋白重鏈區(qū)高達30﹪相識度，不具有半胱胺酸（cysteine）.因此不易被氧化和水解

3、。我的授業(yè)恩師中央研究院林榮耀院士所領導的研究團隊。統(tǒng)稱這類蛋白質為『靈芝免疫調節(jié)蛋白質』。靈芝免疫調節(jié)蛋白質可抑制端粒酶活性提高肺癌的治療率，降低復發(fā)的可能在許多癌癥中可偵測到端粒酶活性，而體細胞中，除了肝細胞中通常偵測不到此酶素的活性。染色體端粒酶的再活化可使正常細胞具有高度的細胞增殖速率。進而走向不朽化，并提高正常細胞轉型成惡性腫瘤的機率。更有研究進一步指出，非小細胞肺腺癌病人的端粒酶活性。與高度的細胞增殖速率和惡化程度有關。因而

4、推測端粒酶活性是肺癌患者重要的預后表現(xiàn)較佳。所以端粒酶的活性控制，可能是發(fā)展新型癌癥治療策略的主要標的之一。研究進一步發(fā)現(xiàn)，靈芝免疫調節(jié)蛋白可使肺癌細胞周期停滯在G1期，走向未成熟的衰老反應（Prematuresenescence）并明顯增加ysosome胞器增大，此為衰老細胞重要特征。一般哺乳類細胞大多會藉由兩種細胞防御機制，細胞凋亡（apoptosls）和細胞衰老（cellularsenescence）避免正常細胞走向癌化階段，這兩

5、種細胞防御機制具差異，細胞凋亡會造成細胞死亡；細胞衰老還可分為『復制衰老（replicativesenoscence）』和『未成熟衰老（prematuresenescence）』.復制衰老主要是正常細胞因為染色體端粒酶復制問題所產生的生長屏障（Hayfllcklimlt）進而誘發(fā)的細胞反應；未成熟的衰老則是細胞受到外在壓力（如氧化性傷害），造成年輕的細胞走向細胞老化的現(xiàn)象。這兩種細胞衰老反應的差別主要在于，前者細胞的端粒序列長度會逐漸縮

6、短，后者細胞的端粒序列長度則不受影響，但端粒序列的穩(wěn)定受到破壞。兩者細胞型態(tài)和生理特征皆相同嗎，包括細胞外形呈現(xiàn)平坦及脹大，細胞質顆粒狀囊泡增多，脂褐質（lipofuscin）和B半乳糖苷酸（Bgalactosidease）的生產。衰老反應所造成的生長停滯通常是細胞周期的『負調控者』，包括P53、Rb和cyclindependentkinaseinhibit(如P21CIPIP27kip1和p16INK4a).有文獻指出，透過活化腫瘤抑

7、制基因或抑制抑癌基因，會造成癌細胞走向未成熟的衰老反應，產生類似衰老的現(xiàn)象，也有文獻指出，造成癌細胞走向未成熟的衰老反應，主要是抑制端粒酶活性和誘發(fā)細胞周期負調控者的表現(xiàn)所造成，最近的研究也陸續(xù)證實，癌細胞會受到物理性或化學性傷害，而出現(xiàn)未成熟的衰老反應。此外，以抗癌藥物Doxubicin(俗稱小紅莓)和Aphidicolin處理，也會促使腫瘤細胞趨于未成熟的衰老反應。由此可見，誘發(fā)腫瘤細胞趨于細胞衰老階段，已被視為癌癥治療的新策略。根

8、據上述的理論基礎，我們利用細胞衰老的方法SABGAL染色和Acrldineange染色加以分析，結果發(fā)現(xiàn)，經靈芝免疫調節(jié)蛋白處理的A549肺癌細胞，細胞呈現(xiàn)SABGAL的呈色反應則占236﹪.Acridineange的呈色反應占450.2﹪.以同樣的方法分析Calu1肺癌細胞，結果發(fā)現(xiàn)，經靈芝免疫調節(jié)蛋白處理后，細胞呈現(xiàn)SABGal的呈色反應占505.8﹪，Acridineange的呈色反應則占7628﹪.不過實驗也發(fā)現(xiàn)，經靈芝免疫調節(jié)

9、蛋白處理的A549肺癌細胞，其端粒序列長度并未受到影響。有文獻指出，細胞衰老的誘發(fā)決定于端粒序列的穩(wěn)定，而不是端粒序列的縮短。未成熟的細胞衰老是抑制癌細胞生長的抗癌機制之一，因此顯示靈芝免疫調節(jié)蛋白抑制端粒酶活性，會造成肺癌細胞走向未成熟的細胞衰老。靈芝免疫調節(jié)蛋白可抑制肺癌細胞『移行』和『轉移』的能力目前國人肺腺癌治療已有部分使用標靶治療，特別是不抽煙的女性肺腺癌患者，她們的上皮生長因子受器（epidemdkgrowthfactcrr

10、ecept簡稱EGFR）通常具有突變，所以非常適合使用標靶治療藥，如艾瑞莎（lressa）.因為艾瑞莎主要攻擊的目標就是癌細胞的EGFR它會作用在EGFR位于細胞內酪胺酸磷酸化的部分，使EGFR失去刺激癌細胞增生﹑轉移的功能。一般癌癥細胞會先有移行性，接下來才會進行轉移作用（metastasis）.由于靈芝免疫調節(jié)蛋白質刺激A549細胞后，會使細胞的形態(tài)產生變化，推估可能會因此改變細胞的移行性。我們先將肺癌細胞經不同濃度（0﹑2﹑4﹑8