霍亂弧菌檢測方法 文檔

1、霍亂弧菌的檢測霍亂弧菌的檢測霍亂弧菌相關(guān)知識：霍亂弧菌相關(guān)知識：稻葉型（A、C）古典型小川型（A、B、C少量）O1群霍亂弧菌：群霍亂弧菌：彥島型（A、B、C）稻葉型（A、C）艾爾托型小川型（A、B、C少量）彥島型（A、B、C）實驗室準備：實驗室準備：1.培養(yǎng)基：堿性蛋白胨水、TCBS、4號或慶大霉素瓊脂、營養(yǎng)平板、半固體菌種保存管。2.試劑：拉絲實驗用試劑（0.5%去氧膽酸鈉水溶液）、氧化酶試劑（1%鹽酸對氨基二甲基苯胺或鹽酸對氨基四甲

2、基苯胺水溶液。3.診斷血清：O1群霍亂診斷血清、稻葉型霍亂血清、小川型霍亂血清、O139群霍亂血清。4.快診試劑：O1群霍亂膠體金標記快診卡、O139群霍亂膠體金標記快診卡。霍亂弧菌檢驗流程圖：霍亂弧菌檢驗流程圖：標本快速診斷增菌培養(yǎng)直接分離37度68小時TCBS、4號或慶大霉素瓊脂37度1014小時膠體金快診卡制動等試驗血清學(xué)凝集試驗氧化酶實驗拉絲實驗O129敏感試驗初步報告、菌種保存注意事項：試驗時避開含鐵物質(zhì)（如接種環(huán)）。不能直接

3、取產(chǎn)酸培養(yǎng)基上的菌落，不能取含還原劑的培養(yǎng)基及含亞碲酸鹽培養(yǎng)基上的菌落（亞碲酸鹽培養(yǎng)基可抑制氧化酶），以免出現(xiàn)假陽性和假陰性。2拉絲實驗：在玻片上加一滴試劑，取一接種環(huán)被檢菌的新鮮瓊脂培養(yǎng)物在試劑旁邊研磨均勻，再與試劑混合制成濃厚懸液。陽性者很快（30秒內(nèi)）由混變清并變得很粘稠，再用接種環(huán)挑取時，可以拉出細絲來。陰性者呈均勻懸液狀態(tài)，與蒸餾水對照相同。(古典型、埃爾托型和O139群霍亂弧菌均陽性。)3O129(二氨基二異丙基喋啶)敏感試

4、驗：用接種環(huán)或滅菌棉拭子在含0.5%氯化鈉的普通平皿上均勻涂抹待檢菌，放上10微克、150微克O129磷酸鹽藥敏紙片各一片，37度培養(yǎng)過夜。凡藥敏紙片周圍出現(xiàn)抑菌圈者為敏感。古典型、埃爾托型霍亂弧菌二者均敏感；O139群霍亂弧菌10微克、150微克均不敏感。五、初步結(jié)果報告霍亂弧菌以血清學(xué)鑒定為主，結(jié)合菌落形態(tài)、特征和初步生化反應(yīng)可做出判定。凡具備弧菌菌落特征、與O1群或O139群多價血清凝集，O1群并可用單價血清分型即可判定。首例病人