細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)考試重點

1、名詞解釋：1.群體倍增時間群體倍增時間：細(xì)胞指數(shù)增長期時，細(xì)胞群倍增所需的時間。是由于表示群體細(xì)胞指數(shù)生長期內(nèi)細(xì)胞分裂活動的程度，是判斷細(xì)胞生長是否旺盛的重要指標(biāo)。2.接觸抑制接觸抑制（contactinhibition）：細(xì)胞相互接觸后失去運動的現(xiàn)象。3.密度抑制密度抑制（densityinhibition）：由于細(xì)胞密度過大，培養(yǎng)液營養(yǎng)耗盡，代謝產(chǎn)物過多和生存空間消失所引起的細(xì)胞增殖的抑制現(xiàn)象。4.腫瘤干細(xì)胞腫瘤干細(xì)胞(tu(tum

2、mstemstemcellscells，TSC)TSC)表現(xiàn)為一種特殊類型的干細(xì)胞，具備高度增殖能力與自我更新能力，也具備多向分化的潛能。TSC增殖過程中，通過不均一分裂，一個TSC分裂形成一個新的TSC和另一個可最終分化為包括腫瘤細(xì)胞在內(nèi)的各種細(xì)胞的子細(xì)胞，其結(jié)果是維持TSC數(shù)目穩(wěn)定并產(chǎn)生腫瘤。5.細(xì)胞匯合細(xì)胞匯合(Confluent)(Confluent)：指細(xì)胞增殖生長相互連接成片占據(jù)所有底物面積現(xiàn)象。6.飽和密度(Saturat

3、iondensity)：在特殊培養(yǎng)條件下，每平方厘米(單層培養(yǎng))或每毫升細(xì)胞懸液內(nèi)可達(dá)到的最大細(xì)胞數(shù)。7.二倍體細(xì)胞系或株(Diploidcelllinestrain)：具有二倍體染色體數(shù)的細(xì)胞系或株。8.二倍體(Diploid)：指雙倍數(shù)的染色體數(shù)或具有此數(shù)的細(xì)胞系。9.組織工程組織工程：是應(yīng)用生命科學(xué)和工程學(xué)的原則及方法，在正確認(rèn)識正常及病理兩種狀態(tài)下的組織結(jié)構(gòu)與功能關(guān)系的基礎(chǔ)上，研究、開發(fā)用于修復(fù)、維護(hù)、促進(jìn)人體各種組織或器官損傷

4、后的功能和形態(tài)的生物替代物的一門新興學(xué)科。10.細(xì)胞融合細(xì)胞融合(Cellfusion)：指兩個獨立的細(xì)胞借媒介物(PEG等)融合成雜種細(xì)胞的過程。11.細(xì)胞富集細(xì)胞富集：當(dāng)細(xì)胞分離純化并不完全徹底，培養(yǎng)物中能達(dá)到以某種細(xì)胞為主（占絕大多數(shù)）的程度。12.三維培養(yǎng)三維培養(yǎng)：把細(xì)胞懸液接種在一定立體形態(tài)的支架上，使細(xì)胞生長在三維環(huán)境中的培養(yǎng)方法。13.平衡鹽溶液平衡鹽溶液（balancedsaltsolutionBSS）：簡稱鹽溶液，集緩

5、沖液的緩沖能力、生量鹽水的等滲性以及培養(yǎng)液的營養(yǎng)供應(yīng)特點于一體。兼具緩沖和調(diào)節(jié)溶液的酸堿度、維持滲透壓、同時供給細(xì)胞生存所需的能量和無機離子成分的作用。14.生長基質(zhì)生長基質(zhì)（growthsubstratum）：培養(yǎng)器皿表面包被的一層能改善生長表面的特性，促進(jìn)細(xì)胞粘附和貼壁的物質(zhì)。15.去分化（去分化（dedifferentiation）：指已成熟的細(xì)胞和組織倒退分化，返回原始幼稚的狀態(tài)。16.消化液：消化液：在原代細(xì)胞培養(yǎng)和細(xì)胞傳代時

6、，都要用消化液，最常用的是胰蛋白酶和二乙烯四乙酸二鈉（EDTA），其次是一些特殊的組織細(xì)胞培養(yǎng)用的各型膠原酶。在原代細(xì)胞培養(yǎng)中，使用消化液從組織塊中分離（散）出單個的細(xì)胞；在進(jìn)行細(xì)胞傳代時，消化液使細(xì)胞脫離生長表面并離散成單個細(xì)胞。17.消毒disinfection殺死物體上病原微生物的方法。滅菌滅菌sterilizationterilization殺滅物體上所有微生物的方法，包括病原微生物和非病原微生物、繁殖體和芽胞。18.轉(zhuǎn)化細(xì)胞系

7、轉(zhuǎn)化細(xì)胞系：指細(xì)胞發(fā)生了不可逆轉(zhuǎn)的遺傳改變而引起恒定的表型改變的細(xì)胞系。19.雜交瘤技術(shù)雜交瘤技術(shù)：又稱單克隆抗體制備技術(shù)，是指建立雜交瘤細(xì)胞系的技術(shù)，通常指B淋巴細(xì)胞雜交瘤技術(shù)，即將骨髓瘤細(xì)胞與B淋巴細(xì)胞融合，以建立可以分泌單一性抗體的雜交瘤細(xì)胞系的技術(shù)。20.指由一個B淋巴細(xì)胞克隆所產(chǎn)生的，只識別一種抗原決定簇的均質(zhì)抗體。背景相同的群體，可以保存。3）實際意義：組織（細(xì)胞）培養(yǎng)對醫(yī)學(xué)、生命科學(xué)的意義①培養(yǎng)的組織器官或細(xì)胞，能再一定范

8、圍和程度上反映生命活動規(guī)律和機體功能特點。培養(yǎng)的組織器官或細(xì)胞，能再一定范圍和程度上反映生命活動規(guī)律和機體功能特點。培養(yǎng)的細(xì)胞為生命科學(xué)和生物醫(yī)學(xué)各種研究奠定了物質(zhì)基礎(chǔ)。如藥物篩選，療劑評價，新生物制品研發(fā)，研究病毒及其他微生物，發(fā)現(xiàn)新的傳染因子，組織工程中的支撐技術(shù)等。②細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)已經(jīng)成為商品化生物技術(shù)產(chǎn)品的核心。細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)已經(jīng)成為商品化生物技術(shù)產(chǎn)品的核心。如目前可提供的產(chǎn)品，病毒疫苗：口蹄疫、狂犬疫苗和乙肝疫苗等；非抗體型免疫調(diào)

9、節(jié)劑：干擾素、白介素和集落刺激因子等；多肽生長因子：表皮生長因子和神經(jīng)生長因子等；酶類：組織型纖溶酶原激活劑；激素：EPO和促黃體生成素等；殺蟲劑：桿狀病毒；腫瘤特異抗原；癌胚抗原；通過雜交瘤生產(chǎn)的各種單克隆抗體；細(xì)胞本身（如干細(xì)胞）；皮膚重植等。4）組織（細(xì)胞）培養(yǎng)的局限性：細(xì)胞（組織）培養(yǎng)，包括器官培養(yǎng)終歸是離體培養(yǎng)，缺少生物整體的嚴(yán)密聯(lián)系，不能代表整個機體。在進(jìn)行醫(yī)學(xué)生物實驗過程及對結(jié)果的評估都必須考慮這些。3.3.簡述細(xì)胞培養(yǎng)過

10、程中如何進(jìn)行微生物污染防治簡述細(xì)胞培養(yǎng)過程中如何進(jìn)行微生物污染防治1）把好每一個關(guān)口，盡可能禁止任何有污染的物品進(jìn)入培養(yǎng)操作環(huán)節(jié)；2）抗生素：一般用常用量的5~10倍作沖擊療法。用藥24~48h后，再換常規(guī)培養(yǎng)液。3）加溫處理：根據(jù)支原體對熱敏感的特點，將受支原體污染的細(xì)胞放置在41℃作用5~10h，最長不超過18h后，以殺滅支原體。4）動物體內(nèi)接種：將支原體污染的細(xì)胞接種在同種動物的皮下或腹腔，借動物體內(nèi)的免疫系統(tǒng)消滅支原體。待一定時

11、間后取出細(xì)胞，做原代培養(yǎng)再進(jìn)行繁殖。4.4.試述目前體外細(xì)胞培養(yǎng)中廣泛使用最多的天然培養(yǎng)基類型及其作用試述目前體外細(xì)胞培養(yǎng)中廣泛使用最多的天然培養(yǎng)基類型及其作用天然培養(yǎng)基（液）的種類很多，包括生物性體液（如血清、血漿）、組織浸液（胚胎浸液）、水解乳蛋白等。1）血清：①血清中含有基本的營養(yǎng)物質(zhì)②血清中含有激素與生長調(diào)節(jié)因子③血清中含有促進(jìn)細(xì)胞粘附和鋪展的因子④血清中含有結(jié)合蛋白⑤血清中含有抗機械損害的非特異性保護(hù)物質(zhì)⑥血清中含有pH緩沖物

12、質(zhì)⑦血清中含有蛋白酶抑制劑2）胚胎浸出液（embryonicextract）是早期動物細(xì)胞培養(yǎng)中應(yīng)用的天然培養(yǎng)基，如雞胚浸出液、牛胚浸出液等。胚胎浸出液主要成分為大分子蛋白和小分子氨基酸，有促進(jìn)細(xì)胞生長的作用。3）水解乳蛋白（lactalbuminhydrolysate）為乳白蛋白經(jīng)蛋白酶水解的產(chǎn)物，含有富的氨基酸，是常用的天然培養(yǎng)基，可用于許多細(xì)胞系和原代細(xì)胞的培養(yǎng)。5.5.血清的優(yōu)缺點：血清的優(yōu)缺點：1）優(yōu)點：①血清中含有基本的營養(yǎng)