例肝臟干細胞移植術(shù)

1、肝臟干細胞移植術(shù) 臨床應(yīng)用初步體會,,一、干細胞的概念,干細胞是能夠長期存活，具有不斷的自我繁殖能力和多向化潛能，幾乎存在于所有組織中的原始細胞?？梢苑譃樯掣杉毎凸δ芨杉毎?。 干細胞是不均一的細胞群體，缺乏直接的形態(tài)學特征。其表面無血型分子、無MHC分子，故不需要配血型及MHC。,二、骨髓干細胞和臍血干細胞的特點,干細胞長期存活不斷地自我繁殖的特性： 干細胞不論在體內(nèi)還是體外培養(yǎng)都能表現(xiàn)為長期存活，不斷地自我繁殖。

2、只有長期存活，才能用于臨床治療。,二、骨髓干細胞和臍血干細胞的特點,可塑性： 成體干細胞，可以跨系跨胚層分化為所有的組織細胞類型的特性，稱為可塑性。這是成體干細胞能夠治療各種細胞損傷性疾病的理論基礎(chǔ)。,二、骨髓干細胞和臍血干細胞的特點（3）,化學趨向性： 成體干細胞的分化常發(fā)生在病理情況下，干細胞向病理部位遷移，成為病理部位的前體細胞，并分化為終末成熟細胞，因此不僅可以利用干細胞來修復組織的損傷，而且可以把它作為

3、多種疾病細胞替代治療和基因治療的理想載體”。這一特性被稱為稱為化學趨向性。,三、干細胞移植在肝臟疾病中的應(yīng)用,意義： 臨床證實，干細胞移植能夠顯著促進終末期肝病患者肝功能恢復，治療安全有效，在當今原位肝移植供肝緊缺的情況下，可以部分代替肝移植治療，值得臨床上大力開展。,三、干細胞移植在肝臟疾病中的應(yīng)用,適應(yīng)癥： 肝硬化，肝功能 Child－pugh分級A、B級，移植前后加強保肝、降酶、抗病毒治療。急性、亞急性重型肝炎恢

4、復期。,三、干細胞移植在肝臟疾病中的應(yīng)用,禁忌癥：原發(fā)性肝癌；重型肝炎急性期；肝功能C級。,三、干細胞移植在肝臟疾病中的應(yīng)用,程序 ： 干細胞來源：采集胎盤臍血，臍血要求：足月產(chǎn)婦，留臍血70-100ml存放臍血袋內(nèi)，放置2-8℃保存（<12小時）。,三、干細胞移植在肝臟疾病中的應(yīng)用,干細胞分離注意事項： 全部分離操作必須在萬級潔凈實驗室、局部百級超凈工作臺內(nèi)完成，以保證整個分離過程的無菌操作；必須保

5、證在操作過程中使用的其他容器及所有接觸臍血的物品無菌!,三、干細胞移植在肝臟疾病中的應(yīng)用,干細胞分離注意事項： 由細胞分離專業(yè)人員按試劑盒說明書要求操作分離干細胞，儲存在專用試管中，在2-8℃容器內(nèi)，不超過1小時，留取2ml做細胞計數(shù)、CD34檢測、細菌培養(yǎng)、內(nèi)毒素檢測。,三、干細胞移植在肝臟疾病中的應(yīng)用,干細胞分離原理： 主要是利用改變細胞膜電位（離子濃度）產(chǎn)生的血沉現(xiàn)象，采取負收集混合法分離并收

6、集細胞。,三、干細胞移植在肝臟疾病中的應(yīng)用,干細胞的檢測： 干細胞終制品有核細胞存活率必須大于96%，有核細胞收集率大于85%（我院干細胞收集計數(shù)大于5.0*108 ）.,三、干細胞移植在肝臟疾病中的應(yīng)用,病例選擇： 乙肝患者11例，丙肝2例，特發(fā)性1例，共計14例。Child C級11例，B級2例，A級1例。,三、干細胞移植在肝臟疾病中的應(yīng)用,患者入院后完善相關(guān)檢查，明確診斷后給予保肝降酶、抗病毒

7、、退黃利尿、輸白蛋白、血漿治療?；颊吒姑洝⒎α?、納差、腹水等消退或減輕。經(jīng)與患者及其家屬溝通，征得知情同意的情況下，采用干細胞移植治療。,三、干細胞移植在肝臟疾病中的應(yīng)用,術(shù)前查常規(guī)化驗檢查、PCR-HBV-DNA,CT肝臟（平掃CT值、強化CT值、三維血管成像）、門靜脈一級分枝肝臟截面積。,三、干細胞移植在肝臟疾病中的應(yīng)用,在介入治療室內(nèi)，病人首先進行肝動脈造影記錄、攝像，14例患者中，發(fā)現(xiàn)2例直徑為1.5cm的小肝癌，隨后行碘

8、油5ml、MMC10mg、EADR 20mg 由微導管行TACE；然后經(jīng)肝固有動脈再注入干細胞（慢速，2ml/min）。術(shù)后股動脈穿刺點壓迫止血6小時。,三、干細胞移植在肝臟疾病中的應(yīng)用,術(shù)后處理： 術(shù)后常規(guī)監(jiān)護、治療，特別用藥:HGF180mg ivgtt qd×14天，生長激素4u皮下×14天；發(fā)現(xiàn)有小肝癌的患者加用IL-2 100萬u ivgtt qd×14天。注意繼續(xù)抗病毒

9、、保肝及對癥支持治療。,三、干細胞移植在肝臟疾病中的應(yīng)用,療效觀察： 術(shù)后1、2周常規(guī)化驗檢查，在干細胞移植后4周常規(guī)化驗，第10周、第16周分別做常規(guī)化驗、肝臟CT測定。,四、干細胞移植治療肝臟疾病應(yīng)遵守的四項基本原則,自愿原則：臍血供者、肝病患者自愿；土壤原則：盡可能將肝功能提升至A級，解決病人可能的出血問題，腹水消失，膽紅素降至43nmol/L；,干細胞移植治療肝臟疾病應(yīng)遵守的四項基本原則,滅“蟲”原則：乙、

10、丙肝患者盡量將病毒轉(zhuǎn)為陰性，或HBV-DNA3.5kg,剖腹產(chǎn)。,我院已治療患者療效觀察,目前有10例完成了4周觀察，有4例完成了16周觀察，臨床療效超過預(yù)期值。,一、術(shù)后并發(fā)癥,12例患者在術(shù)后2周內(nèi)未出現(xiàn)任何不適癥狀，肝功化驗變化不大；2例同時行TACE的患者，出現(xiàn)發(fā)熱、肝區(qū)不適，其中1例患者術(shù)后第2日體溫超過38.2℃，均未使用激素，給予吲哚美辛栓30mg肛塞后病情好轉(zhuǎn)，共發(fā)熱3天。,二、短期療效（1－4周）,患者均在術(shù)后1周左右

11、出現(xiàn)精神、體力、食欲明顯好轉(zhuǎn)，原有腹脹、噯氣等癥狀消失，到2周觀察期結(jié)束時，盡管肝功并無明顯改善，但患者癥狀卻明顯好轉(zhuǎn)：精神、體力、食欲明顯好轉(zhuǎn)，患者間斷補充白蛋白，雙下肢水腫消失，未發(fā)現(xiàn)明顯不良反應(yīng)。,三、近期療效（10周）（4例平均值）,肝功：ALT AST基本恢復正常；前白蛋白：由23mg/L升至185mg/L；白蛋白：由28.6g/L升至37.2g/L；總膽紅素：由37.5mmol/L降至31.2mmol/L；血凝I

12、號：PTa由41 ％升至67％,三、中期療效（16周以內(nèi)）,行干細胞移植的患者治療前、　　　　　　　治療后的平掃CT對比： 治療前 治療后10周 治療后16周,三、中期療效（16周以內(nèi)）,下面是同一患者治療 前后的強化CT對比：

13、 治療前 治療后10周 治療后16周,四、其他觀察項目,4例患者的肝臟最大截面積由124增至198cm2肝臟CT值平掃由52.7降至49.2PV值變化不大,五、同一患者治療前、后平掃CT對比,治療前術(shù)后10周術(shù)后16周,六、