食品綜合實(shí)驗(yàn)vc測定

1、實(shí)驗(yàn)九食品中維生素C總量的測定1實(shí)驗(yàn)?zāi)康恼莆?4二硝基苯肼比色法測定食品中維生素C總量的方法。2實(shí)驗(yàn)原理用酸處理過的活性炭，把還原性維生素C氧化為脫氫型維生素C，再繼續(xù)氧化為二酮古樂糖酸。二酮古樂糖酸與24二硝基苯肼偶聯(lián)生成紅色的脎。其成色的強(qiáng)度與二酮古樂糖酸濃度成正比，可以比色測定。3儀器與材料3.1儀器電子天平，鑰匙，容量瓶，燒杯，具塞試管，移液管，移液槍，刀，砧板，752型分光光度計(jì)，比色皿，洗耳球；3.2材料蘋果，檸檬，獼猴桃；

2、3.3試劑1%草酸，2%草酸，2%24二硝基苯肼溶液，10%硫脲溶液，85%硫酸溶液，維生素C標(biāo)準(zhǔn)儲備液，維生素C工作液4實(shí)驗(yàn)步驟4.1稱取檸檬0.5~1g放入研缽中，加入少量2%草酸進(jìn)行研磨，研磨后轉(zhuǎn)入容量瓶中定容到100ml過濾后濾液待測；4.2稱取獼猴桃0.5~1g放入研缽中，加入少量2%草酸進(jìn)行研磨，研磨后轉(zhuǎn)入容量瓶中定容到100ml過濾后濾液待測；4.3按照下表向具塞試管中加入各種試劑。表1試劑用量表項(xiàng)目01234567Vc工

3、作液ml（6、7為檸檬獼猴桃濾液）00.40.81.21.62221%草酸ml21.61.20.80.4000硫脲d1111111124二硝基苯肼ml0.50.50.50.50.50.50.50.537℃反應(yīng)1~3h85%硫酸2.52.52.52.52.52.52.52.54.4恒溫反應(yīng)結(jié)束后在冷水浴中加入85%硫酸搖勻，反應(yīng)15min。利用分光光度計(jì)測量反應(yīng)試劑在540nm波長的吸光值，制的標(biāo)準(zhǔn)曲線，得到樣品含量。5結(jié)果分析5.1數(shù)據(jù)

4、記錄項(xiàng)目質(zhì)量gA540吸收值檸檬0.6880.012獼猴桃0.6010.0185.2數(shù)據(jù)處理0~6號管內(nèi)加的是標(biāo)準(zhǔn)工作液，在540nm波長下的吸光度都為0，無法繪制試驗(yàn)曲線，無法求出檸檬和獼猴桃中維生素C的含量，實(shí)驗(yàn)失敗。5.3無法測出數(shù)據(jù)的可能原因：5.3.1反應(yīng)時間果斷，在本次試驗(yàn)中，由于時間限制，只反應(yīng)了45min，而正常的時間應(yīng)該是2~3h。5.3.2標(biāo)準(zhǔn)維生素C儲備液在儲藏或配制標(biāo)準(zhǔn)維生素C工作液時損失過度；6注意事項(xiàng)：1、在

5、對檸檬和獼猴桃取樣時應(yīng)使用四分取樣法；2、樣品研磨充分，轉(zhuǎn)入容量瓶后應(yīng)用1%草酸洗滌，將洗滌液倒入容量瓶；3、在加濃硫酸時應(yīng)注意安全，帶膠皮手套；4、加入濃硫酸的過程要把具塞試管放在冷水浴中，并搖勻；5、溶液在恒溫箱中反應(yīng)的時間應(yīng)盡量長些，使反應(yīng)完全；6、加入濃硫酸后要將具塞試管放到暗處反應(yīng)15分鐘；7思考題：1、測定食品中的維生素C還有什么方法？答二氯酚靛酚法該法簡便易行，但有下列缺點(diǎn):1。在生物組織內(nèi)和組織提取液中，抗壞血酸能以脫氫

6、抗壞血酸及結(jié)合抗壞血酸的形式存在。它們同樣具有維生素的生理功能，但不能將2，6二氯酚靛酚還原脫色。（總抗壞血酸的量常用2，4二硝基苯肼法和熒光分光光度法測定）2.生物組織提取物和生物體液中常含有其它還原性物質(zhì)，其中有些在同樣的條件下也可使2，6二氯酚靛酚還原脫色。3.在生物組織中，常有色素類物質(zhì)存在，給滴定終點(diǎn)的觀察造成困難紫外測定法紫外測定法是維生素C測定的方法，操作簡單，不受其它還原性物質(zhì)等成分的干擾。熒光法熒光法利用硼酸對脫氫抗壞