htertpcdna3.1表達載體誘導抗腫瘤免疫應答的實驗研究

1、鄭州大學碩士學位論文hTERT/pcDNA3.1表達載體誘導抗腫瘤免疫應答的實驗研究姓名：錢麗麗申請學位級別：碩士專業(yè)：免疫學指導教師：楊勝利20060510直接注射列動物體內(nèi)，使其在活體細胞中表達，通過觀察桐天免疫指標及倘瘤小鼠的塵，f l = ：甥廊糖瘸‘l i 長債況，了解其激活抗融矮免疫求平，扶蠢為探討以h T E R T為靶點的抗辨瘸疫苗的構建提供依掰。方} 麥：體外實驗：將h T E R T ／p c D N A 3 ．1

2、轉(zhuǎn)染E c 9 7 0 6 腫瘤緇胞，獲僚h H r E R T ／p c D N A 3 ．1 一E c 9 7 0 6 細胞。后用凍融法分列制備E C 9 7 0 6 、p c D N A 3 ．1 一E c 9 7 0 6霹l b 下囂焱Ⅳp c D N A 3 ．1 一E e 9 7 0 6 三耱捩原，莠分別體終辯，毒懿壤鑫愿者柬源躲D c ，并將其與自體T 細胞混合培養(yǎng)，誘導出抗E c 9 7 0 6 腫瘤細胞f ；| 勺C

3、T L ，用乳酸脫氯酶釋放法檢測三組c T L 對E C 9 7 0 6 腫瘤的殺傷作用。俸內(nèi)寰驗：垮6 ～8 爨齡鏈康戇蛙c 5 7 B “6 奪鬣隨礁公戲三縫：p B S 綴、p c D N A 3 ．1 組、h T E R Wp c D N A 3 ．1 紐。每組2 0 只。通過雙側(cè)股四頭胍注射免疫小鼠。各小組分別于第1 天，1 0 天，2 0 天各免痰1 次，／此3 次。免疫三次后第5 天，每綴夔艇取l o 只小鬣處死，瘸囂H

4、s A 法測黲漤巴纓腿上漩滾綏瞧因予l L 。2 、I F N —r 含璧。免疫三次后第6 天，每組另外1 0 只腹腔注射鼠肝癌H 2 2 細胞。注射量為：2 ×1 0 7 個細胞／只。每日同一時間測體羹，并觀察其成瘤期和生存期。結果：體外實驗：h T E R T ／p c D N A 3 ．1 組的h T E R T 表達量顯蔣高于P B s 組及p e 誹A 3 ．1 縫，PO ．0 5 。體內(nèi)實驗：P B s 緞與p c

5、 D N A 3 ．1 組生存期均顯著低于h T E R T ／p c D N A 3 ，l 組，P < O 。∞l ；P B s 嬗與p ∞雌A 3 。l 韁黲漤巴纓魏上瀵滾纓戇羈予l b 2 ，l F N ．r 岔慧均矬著低于h T E R W p c D N A 3 ．1 組，P 《0 ．O O l ；h T E R W p c D N A 3 ．1 組荷瘤小鼠腫瘤生長明顯低于P B s 組與p c D N A 3 ．1 組