sur2bkir6.1通道開放劑介導(dǎo)內(nèi)皮細胞保護效應(yīng)分子途徑的研究

1、 分類號 密 級 公 開 UDC 保密期限 博 士 學(xué) 位 論 文 博 士 學(xué) 位 論 文 題 目 SUR2B/Kir6.1 通道開放劑介導(dǎo)內(nèi)皮細胞保護效應(yīng)分子途徑的研究 通道

2、開放劑介導(dǎo)內(nèi)皮細胞保護效應(yīng)分子途徑的研究 作者姓名 陳學(xué)軍 陳學(xué)軍 指導(dǎo)教師 汪 海 研究員 研究員

3、培養(yǎng)單位 軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院衛(wèi)生學(xué)環(huán)境醫(yī)學(xué)研究所 軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院衛(wèi)生學(xué)環(huán)境醫(yī)學(xué)研究所 專業(yè)名稱 藥理學(xué) 藥理學(xué) 論文提交日期 2016 年 5 月 9 日 學(xué)位授予單位

4、 中 國 人 民 解 放 軍 軍 事 醫(yī) 學(xué) 科 學(xué) 院 中 國 人 民 解 放 軍 軍 事 醫(yī) 學(xué) 科 學(xué) 院 答辯委員會主席 田增明 田增明 教授 教授 中 國 人 民 解 放 軍 軍 事 醫(yī) 學(xué) 科 學(xué) 院 制 中 國 人 民 解 放 軍 軍 事 醫(yī) 學(xué) 科 學(xué) 院 制 目

5、錄 縮略詞表 縮略詞表 ....................................................................................................................... 1 中文摘要 中文摘要 .........................................................................

6、.............................................. 3 英文摘要 英文摘要 ....................................................................................................................... 8 材料和方法 材料和方法 .........................

7、........................................................................................ 19 1 實驗材料 實驗材料 .................................................................................................................

8、19 1.1 實驗動物 ....................................................................................................... 19 1.2 細胞 .............................................................................................

9、.................. 19 1.3 主要藥品和試劑 ........................................................................................... 19 1.4 主要儀器和設(shè)備 .............................................................................

10、.............. 21 2 實驗方法 實驗方法 ................................................................................................................. 21 2.1 細胞復(fù)蘇、傳代及種板 ........................................................

11、....................... 21 2.2 反轉(zhuǎn)錄 PCR ................................................................................................... 21 2.3 免疫細胞化學(xué) ................................................................

12、............................... 23 2.4 RNAi 實驗 ...................................................................................................... 23 2.5 Western blot 實驗 ...........................................

13、............................................... 24 2.6 內(nèi)皮細胞活力檢測 ....................................................................................... 25 2.7 NO 含量檢測 ...................................................

14、.............................................. 25 2.8 內(nèi)皮細胞 [Ca2+]i 的測定 .............................................................................. 25 2.9 微血管張力實驗 ....................................................

15、....................................... 26 2.10 統(tǒng)計學(xué)分析 ................................................................................................. 26 實驗結(jié)果 實驗結(jié)果 .....................................................

16、................................................................ 27 第一部分 第一部分 KCOs 對內(nèi)皮細胞 對內(nèi)皮細胞 KATP 通道亞型選擇性的研究 通道亞型選擇性的研究 ................................. 27 1 EA.hy926 細胞表達的 細胞表達的 KATP 通道亞基驗證 通道亞基驗證 .................

17、.................................. 27 1.1 RT-PCR 法驗證內(nèi)皮細胞 KATP 各個亞基的表達 ..................................... 27 1.2 免疫細胞化學(xué)方法驗證內(nèi)皮細胞 KATP 各亞基的表達 ........................... 28 2 內(nèi)皮細胞 內(nèi)皮細胞 KATP 各亞基在 各亞基在 KCOs 促進內(nèi)皮細胞 促進內(nèi)皮

18、細胞 NO 釋放中的作用 釋放中的作用 ........... 29 2.1 KCOs 促進內(nèi)皮細胞釋放 NO 的作用 ...................................................... 29 2.2 內(nèi)皮細胞 SUR2B 亞基在 KCOs 促進內(nèi)皮細胞 NO 釋放中的作用 ...... 31 2.3 內(nèi)皮細胞 SUR2A 亞基在 KCOs 促進內(nèi)皮細胞 NO 釋放中的作用......

19、 35 2.4 內(nèi)皮細胞 Kir6.1 亞基在 KCOs 促進內(nèi)皮細胞 NO 釋放中的作用 ........ 38 2.5 內(nèi)皮細胞 Kir6.2 亞基在 KCOs 促進內(nèi)皮細胞 NO 釋放中的作用 ........ 42 結(jié) 語 ....................................................................................................