應(yīng)用蛋白質(zhì)組學(xué)方法研究鹽角草(salicorniaeuropaeal.)的抗鹽性—鹽角草雙向電泳體系的建立

1、中國(guó)科學(xué)院植物研究所碩士學(xué)位論文應(yīng)用蛋白質(zhì)組學(xué)方法研究鹽角草（Salicornia europaeaL.）的抗鹽性—鹽角草雙向電泳體系的建立姓名：李肖芳申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：細(xì)胞生物學(xué)指導(dǎo)教師：李銀心20060526應(yīng)用蛋白質(zhì)組學(xué)方法研究鹽角草的抗鹽性一鹽角草雙向電泳體系的建立S t u d yo f s a l tt o l e r a n c e i nS a l i c o r n i ae u r o p a e aL ．u

2、s i n g ap r o t e o m i ca p p r o a c h- - E s t a b l i s h m e n t o f t h et w o - d i m e n s i o n a l e l e c t r o p h o r e s i ss y s t e mX i a o f a n gL i ( C y t o l o g y )D i r e c t e db y P r o f e s s

3、 o rY i n x i nL iA b s t r a c tS a l i c o r n i ae u r o p a e a L ．i so n eo ft h em o s ts a l t —t o l e r a n t p l a n ts p e c i e si n t h ew o r l d ．P r o t e o m i ca n a l y s i so f i t ss a l tt o l e r a

4、 n c e i so f g r e a t s i g n i f i c a n c ef o r U St ou n d e r s t a n d t h em e c h a n i s m o f p l a n t s a l t t o l e r a n c e a n d t o i m p r o v e s a l t t o l e r a n c e o f c r o p s ．T w o ．d i m

5、e n s i o n a l e l e c t r o p h o r e s i s ( 2 - D E ) i sap o w e r f u lt o o l o fp r o t e o m i c s ．S a m p l ep r e p a r a t i o n i s ac r i t i c a l s t e p a n d i s a b s o l u t e l y e s s e n t i a l f

6、 o r g o o dr e s u l t s ．A sae u h a l o p h y t e ，& e u r o p a e ac o n t a i n sal a r g ea m o u n to fs a l t a d d i t i o n a l t o t h ev a r i o u ss e c o n d a r ym e t a b o l i t e s ，a n d i t s p r

7、o t e i n e x t r a c t i o n i s m o r e d i f f i c u l t ．T h u s ，i t i sn e c e s s a r yt o d e v e l o pa ne f f i c i e n tp r o t e i ne x t r a c t i o nm e t h o db e f o r e p e r f o r m i n gt h ep r o t e

8、o m i ca n a l y s i s ．I n t h i s s t u d y , w e c o m p a r e d t h r e e d i f f e r e n t m e t h o d s ，i ．e ．t r i c h l o r o a c e t i ca c i d ／a c e t o n e p r e c i p i t a t i o n ( T C A ) ，t r i c h l o

9、r o a c e t i c a c i d p r e c i p i t a t i o n ( E —T C A ) ，a n dp h e n o le x t r a c t i o n ( P h e ) ，t o d e t e r m i n et h e i re f f i c i e n c yi ne x t r a c t i n g t o t a lp r o t e i n sf r o m&

10、e u r o p a e a b y2 - D E a n a l y s i s ．F o r p l a n t st h a tw e r e t r e a t e d w i t h7 0 0 m M N a C I f o r 2 d ，5 7 9 ，3 4 3 ，a n d5 3 5 p r o t e i ns p o t sw e r eg e n e r a t e d b yt h et h r e em e t

11、 h o d s ．T h e2 - D E g e l so f T C A a n d E —T C As h o w e d s t r o n gh o r i z o n t a ls t r e a k s ，w h i l et h a to f t h eP h e m e t h o dh a do n l y af e wf a i n t s t r e a k s ，w h i c h i n d i c a t

12、 e de f f e c t i v e r e m o v a lo fs a l t f r o m t h ep r o t e i ns a m p l e b y t h e P h e m e t h o d ．T h i s w a s a l s os u p p o r t e d b y r e s u l t sf r o m p l a n t st h a tw e r e t r e a t e d w i

13、 t h 2 0 0m M N a C l f o r 9 0 d ．C o m p a r i s o no fd i f f e r e n t p r e c i p i t a n t ss u g g e s t e d t h a tm e t h a n o l c o u l d n ’t r e p l a c et h e m e t h a n o ls o l u t i o n o f a m m o n i