肝纖維化小鼠內(nèi)皮祖細(xì)胞歸巢肝臟機(jī)制及3.0t磁共振示蹤研究

1、復(fù)旦大學(xué)博士學(xué)位論文肝纖維化小鼠內(nèi)皮祖細(xì)胞歸巢肝臟機(jī)制及3.0-T磁共振示蹤研究姓名：嚴(yán)福華申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：博士專(zhuān)業(yè)：影像醫(yī)學(xué)與核醫(yī)學(xué)指導(dǎo)教師：王慶國(guó)20090403肝纖維化小鼠內(nèi)皮祖細(xì)胞歸巢肝臟機(jī)制及3 ．0 - T 磁共振示蹤研究 中文摘要結(jié)果與對(duì)照組相比，S D F ．1a 及C X C R 4 在肝纖維化模型小鼠肝臟組織中的表達(dá)較對(duì)照組明顯上調(diào)，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義( P < 0 ．0 5 ) ；B M - E P C sC

2、X C R 4 的表達(dá)陽(yáng)性率為( 6 9 ．3 5 ％M 6 ．0 4 ％) ，T r a n s w e l l 遷移實(shí)驗(yàn)顯示，B M ．E P C s 向S D F ．1 a 的遷移數(shù)量是1 5 8 ．4 0 d ：1 2 ．6 6 ／高倍視野，明顯高于正常g t ( 8 7 ．8 0 - J ：1 4 ．2 4 ／高倍視野) ( ( P< 0 ．0 1 ，t = 8 ．2 9 ) ，在體外經(jīng)C X C R 4 受體抑制劑A

3、M D 3 1 0 0 處理后，B M ．E P C s 向S D F ．1 a 遷移的數(shù)量顯著減少( 9 2 ．6 0 生1 3 ．5 9 ／高倍視野) ( P < 0 ．0 1 ) 。結(jié)論S D F ．1a ／C X C R 4 軸在E P C s 肝纖維化歸巢中具有重要作用，為E P C s 移植治療肝纖維化提供了理論基礎(chǔ)。關(guān)鍵詞：肝纖維化；S D F ．1a ；C X C R 4第三部分3 ．O ．T 磁共振R 2 * 和

4、R 2 m a p p i n g 在S P I O 標(biāo)記內(nèi)皮祖細(xì)胞向肝纖維化肝臟歸巢的活體定量示蹤研究目的：評(píng)價(jià)臨床用3 ．0 T 磁共振R 2 奉和R 2m a p p i n g 定量示蹤S P I O 標(biāo)記的內(nèi)皮祖細(xì)胞( E P C s ) 向肝臟歸巢。方法：C 5 7 小鼠骨髓來(lái)源E P C s 培養(yǎng)7 d ，并進(jìn)行標(biāo)記物鑒定，進(jìn)行氧化鐵顆粒．魚(yú)精蛋白( F E ．P I 的) 標(biāo)記。用電鏡和普魯士藍(lán)染色來(lái)評(píng)價(jià)鐵顆粒攝取。制做

5、不同濃度標(biāo)記細(xì)胞( 0 乏．0 x 1 0 6 ／m 1 ) 的1 ．O ％瓊脂糖模型，并采用臨床用3 ．o T 磁共振進(jìn)行R 2 和l 毪奉測(cè)定；活體示蹤：選用純系C 5 7 小鼠( 雌性，6 周齡，體重1 9 9 ．2 0 9 ) ，腹腔內(nèi)注射4 0 ％C C L 4 橄欖油溶液制成肝纖維化模型，經(jīng)鼠尾靜脈注射5 ．0 x 1 0 6 個(gè)S P I O 標(biāo)記的E P C s 懸液( O ．5 m 1 ) ，在注射前及注射后2 h 、

6、4 d 、8 d及1 2 d 行磁共振掃描測(cè)定肝臟R 2 * 和R 2 值，對(duì)照組小鼠接受同樣劑量S P I O 標(biāo)記和未標(biāo)記的E P C s 移植，并行磁共振掃描，移植后1 2 d 所有小鼠均處死行組織病理學(xué)觀察。結(jié)果：電鏡和普魯士藍(lán)染色顯示S P I O 鐵顆粒標(biāo)記率達(dá)9 5 ％以上，與正常細(xì)胞相比未見(jiàn)細(xì)胞器結(jié)構(gòu)損傷；R 2 和R 2 * 值與瓊脂糖凝膠模型中標(biāo)記細(xì)胞的數(shù)量成正比( ，．分別為0 ．9 8 及0 ．9 9 ，P &l

7、t; 0 ．0 1 ) ，R 2 毒效應(yīng)較R 2 效應(yīng)明顯( P < 0 ．0 1 ) ：活體磁共振細(xì)胞示蹤成像顯示，肝纖維化及正常小鼠肝臟R 2 * 值在注射S P I O 標(biāo)記的E P C s 后2 h 、4 d 、8 d 均明顯高于對(duì)照組( 尸均小于0 ．0 5 ) ，R 2 * 值隨時(shí)間延長(zhǎng)逐漸減低；注射標(biāo)記S P I O 的細(xì)胞后肝纖維化小鼠肝臟R 2 * 值在注射后2 h 、4 d 、8 d 均明顯高于正常組( 尸均小