高效提純巢湖藍藻藻藍蛋白工藝研究.pdf

1、藻藍蛋白是一種重要的藻膽蛋白，具有抗氧化性、抗癌性等特性，在發(fā)達國家中被廣泛用作天然色素、醫(yī)藥保健品和制作熒光探針。本研究以巢湖新鮮藍藻藻泥為原料，通過凍融破壁的方法破碎藻細胞，獲得藻藍蛋白粗提液，然后用粉末活性炭吸附法粗提藻藍蛋白，并在此基礎(chǔ)上分別通過雙水相萃取法和多步鹽析法純化藻藍蛋白，以探尋高效提純藻藍蛋白的最佳工藝。
　　在粉末活性炭吸附法粗提藻藍蛋白的實驗研究中，首先對適合用于藻藍蛋白純化的粉末活性炭進行了種類、粒徑的篩

2、選，接著對粉末活性炭的溫度、添加量、處理時間、pH值等條件進行了研究，最終確定了粉末活性炭吸附法粗提藻藍蛋白的最佳處理條件，即煤質(zhì)粉末活性炭，400～500目，溫度25℃，添加量100g/L，吸附時間10min，溶液pH值為7.0。
　　在雙水相萃取藻藍蛋白的實驗研究中，以粉末活性炭吸附法處理后的藻藍蛋白溶液為原料，分別用常見高聚物與鹽配成的20種高聚物-鹽雙水相體系進行萃取，分析處理結(jié)果選出最佳的雙水相體系;然后，通過單因素和正

3、交實驗，確定雙水相萃取法純化藻藍蛋白的最優(yōu)工藝條件為:PEG4000做高聚物，磷酸鉀做成相鹽，PEG質(zhì)量濃度為4％，磷酸鉀質(zhì)量濃度為16％，體系pH值為7.0。
　　在多步鹽析純化藻藍蛋白的實驗研究中，以粉末活性炭吸附法處理后的藻藍蛋白溶液為原料，通過多步鹽析單因素實驗研究硫酸銨濃度和鹽析次數(shù)對藻藍蛋白純化效果的影響;然后，以一至四步鹽析硫酸銨濃度為影響因素，通過正交實驗研究四步鹽析法純化藻藍蛋白的最優(yōu)工藝條件。實驗結(jié)果表明:四步