檸檬桉果實有效成分提取分離及其抗氧化研究.pdf

1、本文以廣西特色林化資源—檸檬桉為原料，開展檸檬桉果實中的揮發(fā)性成分、單寧和皂苷提取研究，考察單寧、皂苷提取物和純化物的抗氧化活性。主要內(nèi)容和結(jié)果如下:
　　(1)水蒸氣蒸餾法對檸檬桉果實和花的揮發(fā)性成分進(jìn)行提取，采用氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用（Gas Chromatography-Mass Spectrometry technology，簡稱GC-MS）對其成分進(jìn)行分析。檸檬桉果實揮發(fā)油的主要成分有1R-α-蒎烯(49.61％)、γ-松油烯

2、(22.87％)、石竹烯(6.48％)等;檸檬桉花揮發(fā)油的主要成分有1R-α-蒎烯、γ-萜品烯、α-松油醇等;頂空直接進(jìn)樣法分析了檸檬桉果實和花的揮發(fā)性成分，檸檬桉果實揮發(fā)性成分有反式-β-羅勒烯、γ-萜品烯、3-崖柏烯等;檸檬桉花揮發(fā)性成分有反式-β-羅勒烯、γ-松油烯、1R-α-蒎烯等。
　　并對檸檬桉果實中的脂肪酸進(jìn)行提取并分析其成分，檸檬桉果實脂肪酸得率為5.11％，其中主要成分有:十八碳烯酸、十八碳二烯酸和十六烷酸等。<

3、br>　　(2)采用超聲波輔助溶劑法對檸檬桉果實中的單寧進(jìn)行提取，顏色和沉淀反應(yīng)定性分析結(jié)果表明，它屬縮合單寧，優(yōu)化了檸檬桉果實單寧的提取工藝，最優(yōu)提取工藝為:提取溫度63.02℃，提取時間為44.89min，提取液乙醇濃度為47.55％，單寧得率為9.43％。
　　采用溶劑法、大孔吸附樹脂法以及兩種方法聯(lián)用純化單寧粗提物，得出最佳大孔吸附樹脂純化工藝為:選用X-5型樹脂，上樣流速1.0 mL/min，上樣濃度0.6 mg/mL，

4、洗脫劑乙醇濃度60％，洗脫流速1.5 mL/min，純化完成后，樣品純度從9.42％提高到58.52％。
　　(3)采用超聲波輔助溶劑法對檸檬桉果實中的皂苷進(jìn)行提取，泡沫和顏色反應(yīng)定性分析結(jié)果表明，它屬三萜類皂苷，優(yōu)化了檸檬桉果實皂苷的提取工藝，最優(yōu)的提取工藝為:提取溫度40.00℃，提取時間45.5 min，乙醇體積分?jǐn)?shù)40.00％，在這個條件下皂苷得率為18.48％。。
　　采用正丁醇萃取法、乙醚沉淀法和大孔吸附樹脂法對

5、粗提物進(jìn)行純化，純化結(jié)果為正丁醇萃取物純度為43.62％，乙醚沉淀物純度為56.64％，大孔吸附樹脂的最優(yōu)純化工藝為:D101型樹脂，上樣流速1.0 mL/min，上樣濃度0.5，洗脫流速1.5 mL/min，洗脫劑乙醇濃度80％，純化完成后，大孔樹脂純化物的純度為34.37％。
　　(4)對檸檬桉果實單寧各純化物進(jìn)行抗氧化活性實驗，結(jié)果表明檸檬桉果實單寧的大孔樹脂純化物總抗氧化能力是單寧酸的135.47％;各種純化物對DPPH·

6、有較好的清除能力，其中大孔樹脂純化物清除率達(dá)到了92.18％;大部分純化物對·OH自由基的清除能力都比單寧酸強(qiáng)，乙酸乙酯萃取后經(jīng)由大孔樹脂純化的純化物的清除率為74.61％，其次為大孔樹脂純化物為68.12％;各單寧樣品的清除能力呈現(xiàn)出明顯的劑量依賴性。
　　(5)考察了檸檬桉果實皂苷純化物的總抗氧化性、清除DPPH·和·OH自由基的能力，實驗結(jié)果表明發(fā)現(xiàn)總抗氧化性大小依次為乙醚沉淀物＞粗提物＞正丁醇萃取物＞皂苷大孔樹脂純化物＞抗

7、壞血酸，與純化物的純度成正比的;清除DPPH·自由基的結(jié)果為:抗壞血酸＞粗提物＞正丁醇萃取物＞乙醚沉淀物＞皂苷大孔樹脂純化物，清除率依次為:95.27％、90.07％、84.88％、83.62％和80.55％，基本與純度成反比;對·OH的清除率的次序為:乙醚沉淀物＞正丁醇萃取物＞粗提物＞抗壞血酸＞大孔樹脂純化物，清除率依次為:81.90％、70.85％、60.79％、58.99％和51.87％，基本與純度成正比。大部分的純化樣品對·OH