檸檬桉果實有效成分提取分離及其抗氧化研究.pdf

1、本文以廣西特色林化資源—檸檬桉為原料，開展檸檬桉果實中的揮發(fā)性成分、單寧和皂苷提取研究，考察單寧、皂苷提取物和純化物的抗氧化活性。主要內(nèi)容和結果如下:
　　(1)水蒸氣蒸餾法對檸檬桉果實和花的揮發(fā)性成分進行提取，采用氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用（Gas Chromatography-Mass Spectrometry technology，簡稱GC-MS）對其成分進行分析。檸檬桉果實揮發(fā)油的主要成分有1R-α-蒎烯(49.61％)、γ-松油烯

2、(22.87％)、石竹烯(6.48％)等;檸檬桉花揮發(fā)油的主要成分有1R-α-蒎烯、γ-萜品烯、α-松油醇等;頂空直接進樣法分析了檸檬桉果實和花的揮發(fā)性成分，檸檬桉果實揮發(fā)性成分有反式-β-羅勒烯、γ-萜品烯、3-崖柏烯等;檸檬桉花揮發(fā)性成分有反式-β-羅勒烯、γ-松油烯、1R-α-蒎烯等。
　　并對檸檬桉果實中的脂肪酸進行提取并分析其成分，檸檬桉果實脂肪酸得率為5.11％，其中主要成分有:十八碳烯酸、十八碳二烯酸和十六烷酸等。<

3、br>　　(2)采用超聲波輔助溶劑法對檸檬桉果實中的單寧進行提取，顏色和沉淀反應定性分析結果表明，它屬縮合單寧，優(yōu)化了檸檬桉果實單寧的提取工藝，最優(yōu)提取工藝為:提取溫度63.02℃，提取時間為44.89min，提取液乙醇濃度為47.55％，單寧得率為9.43％。
　　采用溶劑法、大孔吸附樹脂法以及兩種方法聯(lián)用純化單寧粗提物，得出最佳大孔吸附樹脂純化工藝為:選用X-5型樹脂，上樣流速1.0 mL/min，上樣濃度0.6 mg/mL，

4、洗脫劑乙醇濃度60％，洗脫流速1.5 mL/min，純化完成后，樣品純度從9.42％提高到58.52％。
　　(3)采用超聲波輔助溶劑法對檸檬桉果實中的皂苷進行提取，泡沫和顏色反應定性分析結果表明，它屬三萜類皂苷，優(yōu)化了檸檬桉果實皂苷的提取工藝，最優(yōu)的提取工藝為:提取溫度40.00℃，提取時間45.5 min，乙醇體積分數(shù)40.00％，在這個條件下皂苷得率為18.48％。。
　　采用正丁醇萃取法、乙醚沉淀法和大孔吸附樹脂法對

5、粗提物進行純化，純化結果為正丁醇萃取物純度為43.62％，乙醚沉淀物純度為56.64％，大孔吸附樹脂的最優(yōu)純化工藝為:D101型樹脂，上樣流速1.0 mL/min，上樣濃度0.5，洗脫流速1.5 mL/min，洗脫劑乙醇濃度80％，純化完成后，大孔樹脂純化物的純度為34.37％。
　　(4)對檸檬桉果實單寧各純化物進行抗氧化活性實驗，結果表明檸檬桉果實單寧的大孔樹脂純化物總抗氧化能力是單寧酸的135.47％;各種純化物對DPPH·

6、有較好的清除能力，其中大孔樹脂純化物清除率達到了92.18％;大部分純化物對·OH自由基的清除能力都比單寧酸強，乙酸乙酯萃取后經(jīng)由大孔樹脂純化的純化物的清除率為74.61％，其次為大孔樹脂純化物為68.12％;各單寧樣品的清除能力呈現(xiàn)出明顯的劑量依賴性。
　　(5)考察了檸檬桉果實皂苷純化物的總抗氧化性、清除DPPH·和·OH自由基的能力，實驗結果表明發(fā)現(xiàn)總抗氧化性大小依次為乙醚沉淀物＞粗提物＞正丁醇萃取物＞皂苷大孔樹脂純化物＞抗

7、壞血酸，與純化物的純度成正比的;清除DPPH·自由基的結果為:抗壞血酸＞粗提物＞正丁醇萃取物＞乙醚沉淀物＞皂苷大孔樹脂純化物，清除率依次為:95.27％、90.07％、84.88％、83.62％和80.55％，基本與純度成反比;對·OH的清除率的次序為:乙醚沉淀物＞正丁醇萃取物＞粗提物＞抗壞血酸＞大孔樹脂純化物，清除率依次為:81.90％、70.85％、60.79％、58.99％和51.87％，基本與純度成正比。大部分的純化樣品對·OH