拉莫三嗪誘發(fā)皮膚不良反應與TCRBV基因表達的相關性研究.pdf

1、目的：
　　研究拉莫三嗪（LTG）激活T細胞介導免疫應答而誘發(fā)皮膚不良反應（cADRs）的可能致病機制。分析在LTG-cADRs患者與LTG耐受者外周血單個核細胞（PBMCs）中，TCRBV基因表達的差異。探討LTG-cADRs與TCRBV基因表達的相關性。
　　資料與方法：
　　收集10例cADRs已治愈達6周以上的LTG-cADRs患者作為病例組，依據病例對照研究的方法按1:1匹配納入10例LTG耐受者作為對照組，

2、分離病例組與對照組患者PBMCs，給予LTG體外刺激并培養(yǎng)，采用ELISA法測定病例組與對照組患者PBMCs分泌IFN-γ、IL-5及TNF-β的情況，運用實時熒光定量逆轉錄PCR技術（RT-qPCR）的SYBR GreenⅠ熒光染料法檢測TCRBV基因的表達。用兩獨立樣本t（或t'）檢驗比較兩組IFN-γ、IL-5及TNF-β的濃度差異。采用2-ΔΔCt相對定量法計算在病例組與對照組中，TCRBV基因的相對表達量。用Mann-Whit

3、ney U檢驗分析兩組TCRBV基因相對表達量的差異。
　　結果：
　　1、以終濃度為25μg/ml的LTG分別刺激病例組與對照組的PBMCs，發(fā)現病例組細胞上清液中IFN-γ濃度（1.06±0.09ng/ml）明顯高于對照組（0.86±0.16ng/ml），差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。病例組細胞上清液中IL-5和TNF-β的濃度（0.73±0.06ng/ml，0.69±0.05ng/ml）均略高于對照組（0.70±0

4、.07ng/ml，0.65±0.05ng/ml），差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。
　　2、病例組與對照組TCRBV基因表達存在差異，TCRBV11、TCRBV15、TCRBV17、TCRBV18、TCRBV19在病例組中的相對表達量均較對照組高(P<0.05)。
　　結論：
　　1、LTG可在體外激活LTG-cADRs患者的PBMCs分泌IFN-γ，提示T細胞介導的免疫反應可能參與了LTG-cADRs的致病機制。<